PCR amplification was performed usi

PCR amplification was performed using Taq DNA polymerase with
aliquots of each cell lysate suspension or genomic DNA in TE buffer
as a template. Conditions for PCR amplification were: 2 min at 95 uC,
followed by 35 cycles, each consisting of 95 uC for 40s, 50–52 uC for
40s, and 1–3 min (according to the examined region size) at 72 uC.
The final PCR extension step was 10 min at 72 uC. PCR products
were analysed on a 1% agarose gel and visualized with specific dyes
for DNA. Purified PCR products were sequenced (using BigDye
terminator v3.1; Applied Biosystems) on both strands using the
same PCR primers. Cycle-sequencing reactions were sequenced on an
Applied Biosystems ABI Prism 3100 DNA Sequencer.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ทำ PCR ขยายใช้ Taq DNA พอลิเมอเรสด้วยaliquots ของแต่ละเซลล์ lysate ระงับหรือ genomic DNA ในบัฟเฟอร์ TEเป็นแม่แบบ เงื่อนไขสำหรับ PCR ขยายได้: 2 นาทีที่ 95 uCตามรอบ 35 ซึ่ง uC 95 สำหรับยุค 40, 50 – 52 uC สำหรับยุค 40 และ 1-3 นาที (ตามขนาดกล่าวถึงภูมิภาค)ที่ 72 uCขั้นตอนสุดท้าย PCR ส่วนขยายเป็น 10 นาทีที่ 72 uC ผลิตภัณฑ์ PCRanalysed ในเจ 1% agarose และ visualized ด้วยสีเฉพาะในดีเอ็นเอ ผลิตภัณฑ์ PCR บริสุทธิ์ถูกเรียงลำดับ (ใช้ BigDyeเทอร์มิเนเตอร์ v3.1 ใช้ Biosystems) ในทั้งสอง strands โดยใช้การไพรเมอร์ PCR เดียวกัน ลำดับวงจรปฏิกิริยาถูกเรียงลำดับในการใช้ Biosystems ABI ปริซึม 3100 DNA Sequencer

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ขยาย PCR ได้รับการดำเนินการโดยใช้ดีเอ็นเอโพลิเมอร์ Taq กับ
ส่วนลงตัวของแต่ละเซลล์แขวนลอย lysate หรือดีเอ็นเอในบัฟเฟอร์ TE
เป็นแม่แบบ เงื่อนไขในการขยาย PCR คือ 2 นาทีที่ 95 UC,
ตามด้วย 35 รอบแต่ละประกอบด้วย 95 UC สำหรับยุค 40, 50-52 UC สำหรับ
ยุค 40 และ 1-3 นาที (ตามขนาดพื้นที่ตรวจสอบ) ที่ 72 UC.
ขั้นตอนการขยาย PCR สุดท้ายคือ 10 นาทีที่ 72 UC ผลิตภัณฑ์พีซีอาร์
ถูกนำมาวิเคราะห์ในเจล agarose 1% และมองเห็นด้วยสีที่เฉพาะเจาะจง
สำหรับดีเอ็นเอ ผลิตภัณฑ์ PCR บริสุทธิ์มีลำดับขั้นตอน (ใช้ BigDye
v3.1 เทอร์มิ; แอพพลายด์) ทั้งเส้นโดยใช้
ไพรเมอร์ PCR เดียวกัน ปฏิกิริยาวงจรลำดับมีลำดับขั้นตอนใน
Applied Biosystems ABI Prism 3100 ดีเอ็นเอ Sequencer

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

การใช้ดีเอ็นเอพอลิเมอเรส ( พีซีอาร์ได้ดีกับ
เฉยๆของแต่ละเซลล์ lysate ระงับหรือดีเอ็นเอใน TE buffer
เป็นแม่แบบ เงื่อนไขสำหรับ PCR แบบ : 2 นาทีที่ 95 UC
ตามด้วย 35 รอบละ 95 UC สำหรับ 40 , UC 50 – 52 สำหรับ
40 และ 1 – 3 นาที ( ตามการตรวจสอบขนาดพื้นที่ ) 72 UC .
สุดท้าย PCR ส่วนขยายขั้นตอน 10 นาทีที่ 72 เป็นต้น .ผลิตภัณฑ์ PCR
วิเคราะห์บนเจล ( 1 ) รับกับ
สีเฉพาะดีเอ็นเอ บริสุทธิ์จากผลิตภัณฑ์นี้ ( ใช้ bigdye
Terminator v3.1 ; ประยุกต์ Biosystems ) ทั้งสองเส้นโดยใช้วิธี PCR
เหมือนกัน การเรียงลำดับของปฏิกิริยาบน
Applied Biosystems ABI ปริซึม 3100 DNA sequencer ได้