During the winemaking process, glycerol synthesis represents the first adaption response of Saccharomyces cerevisiae to osmotic stress after inoculation in grape must. We have implemented an RT-qPCR (Reverse Transcription-quantitative PCR) methodology with a preventive evaluation of candidate reference genes, to study six target genes related to glycerol synthesis (GPD1, GPD2, GPP2 and GPP1) and flux (STL1 and FPS1), and three ALD genes coding for aldehyde dehydrogenase involved in redox equilibrium via acetate production. The mRNA level in three strains, characterized by different metabolite production, was monitored in the first 120 min from inoculation into natural grape must. Expression analysis shows a transient response of genesGPD1, GPD2, GPP2, GPP1 and STL1 with differences among strains in term of mRNA abundance, while FPS1 was expressed constitutively. The transient response and different expression intensity among strains, in relation to the intracellular glycerol accumulation pattern, prove the negative feedback control via the HOG (High Osmolarity Glycerol) signalling pathway in S. cerevisiae wine strains under winery conditions. Among the ALD genes, only ALD6 was moderately induced in the hyperosmotic environment but not in all strains tested, while ALD3 and ALD4 were drastically glucose repressed. The intensity of transcription of ALD6 and ALD3 seems to be related to different acetate production found among the strains.
ระหว่าง winemaking สังเคราะห์กลีเซอรแทนคำตอบ adaption แรกของ Saccharomyces cerevisiae การการออสโมติกความเครียดหลังจากต้อง inoculation ในองุ่น เราใช้วิธีการ RT-qPCR (Transcription ปริมาณกลับ PCR) มีการประเมินผู้สมัครอ้างอิงยีน ยีนเป้าหมายศึกษาหกเกี่ยวข้องกับการสังเคราะห์กลีเซอร (GPD1, GPD2, GPP2 และ GPP1) และฟลักซ์ (STL1 และ FPS1), และยีน ALD สามโค้ดสำหรับแอลดีไฮด์ dehydrogenase ในสมดุล redox ผ่าน acetate ผลิตการป้องกัน ระดับ mRNA ในสามสายพันธุ์ โดยผลิต metabolite ที่แตกต่างกัน ถูกตรวจสอบในนาทีที่ 120 แรกจาก inoculation เป็นธรรมชาติองุ่นต้องการ วิเคราะห์นิพจน์แสดงการตอบสนองแบบฉับพลันของ genesGPD1, GPD2, GPP2, GPP1 และ STL1 มีความแตกต่างระหว่างสายพันธุ์ในแง่ของความอุดมสมบูรณ์ของ mRNA ในขณะแสดง FPS1 constitutively ตอบสนองแบบฉับพลันและความเข้มของนิพจน์ที่แตกต่างระหว่างสายพันธุ์ เกี่ยวกับรูปแบบสะสม กลีเซอร intracellular พิสูจน์การควบคุมป้อนกลับเชิงลบผ่านทางเดินหมู (สูง Osmolarity กลีเซอร) signalling ใน S. cerevisiae สายพันธุ์ไวน์ไวน์สภาวะ ระหว่างยีน ALD, ALD6 เท่านั้นถูกทำให้เกิดปานกลาง ในสภาพแวดล้อม hyperosmotic แต่ไม่ได้อยู่ ในสายพันธุ์ทั้งหมดที่ทดสอบ ในขณะที่ ALD3 และ ALD4 อย่างรวดเร็ว น้ำตาลใน repressed ความเข้มเสียงของราชบัณฑิตยสถานของ ALD6 และ ALD3 ดูเหมือนว่าจะเกี่ยวข้องกับการผลิตอื่น acetate พบในสายพันธุ์
การแปล กรุณารอสักครู่..