During the winemaking process, glyc

During the winemaking process, glycerol synthesis represents the first adaption response of Saccharomyces cerevisiae to osmotic stress after inoculation in grape must. We have implemented an RT-qPCR (Reverse Transcription-quantitative PCR) methodology with a preventive evaluation of candidate reference genes, to study six target genes related to glycerol synthesis (GPD1, GPD2, GPP2 and GPP1) and flux (STL1 and FPS1), and three ALD genes coding for aldehyde dehydrogenase involved in redox equilibrium via acetate production. The mRNA level in three strains, characterized by different metabolite production, was monitored in the first 120 min from inoculation into natural grape must. Expression analysis shows a transient response of genesGPD1, GPD2, GPP2, GPP1 and STL1 with differences among strains in term of mRNA abundance, while FPS1 was expressed constitutively. The transient response and different expression intensity among strains, in relation to the intracellular glycerol accumulation pattern, prove the negative feedback control via the HOG (High Osmolarity Glycerol) signalling pathway in S. cerevisiae wine strains under winery conditions. Among the ALD genes, only ALD6 was moderately induced in the hyperosmotic environment but not in all strains tested, while ALD3 and ALD4 were drastically glucose repressed. The intensity of transcription of ALD6 and ALD3 seems to be related to different acetate production found among the strains.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ระหว่าง winemaking สังเคราะห์กลีเซอรแทนคำตอบ adaption แรกของ Saccharomyces cerevisiae การการออสโมติกความเครียดหลังจากต้อง inoculation ในองุ่น เราใช้วิธีการ RT-qPCR (Transcription ปริมาณกลับ PCR) มีการประเมินผู้สมัครอ้างอิงยีน ยีนเป้าหมายศึกษาหกเกี่ยวข้องกับการสังเคราะห์กลีเซอร (GPD1, GPD2, GPP2 และ GPP1) และฟลักซ์ (STL1 และ FPS1), และยีน ALD สามโค้ดสำหรับแอลดีไฮด์ dehydrogenase ในสมดุล redox ผ่าน acetate ผลิตการป้องกัน ระดับ mRNA ในสามสายพันธุ์ โดยผลิต metabolite ที่แตกต่างกัน ถูกตรวจสอบในนาทีที่ 120 แรกจาก inoculation เป็นธรรมชาติองุ่นต้องการ วิเคราะห์นิพจน์แสดงการตอบสนองแบบฉับพลันของ genesGPD1, GPD2, GPP2, GPP1 และ STL1 มีความแตกต่างระหว่างสายพันธุ์ในแง่ของความอุดมสมบูรณ์ของ mRNA ในขณะแสดง FPS1 constitutively ตอบสนองแบบฉับพลันและความเข้มของนิพจน์ที่แตกต่างระหว่างสายพันธุ์ เกี่ยวกับรูปแบบสะสม กลีเซอร intracellular พิสูจน์การควบคุมป้อนกลับเชิงลบผ่านทางเดินหมู (สูง Osmolarity กลีเซอร) signalling ใน S. cerevisiae สายพันธุ์ไวน์ไวน์สภาวะ ระหว่างยีน ALD, ALD6 เท่านั้นถูกทำให้เกิดปานกลาง ในสภาพแวดล้อม hyperosmotic แต่ไม่ได้อยู่ ในสายพันธุ์ทั้งหมดที่ทดสอบ ในขณะที่ ALD3 และ ALD4 อย่างรวดเร็ว น้ำตาลใน repressed ความเข้มเสียงของราชบัณฑิตยสถานของ ALD6 และ ALD3 ดูเหมือนว่าจะเกี่ยวข้องกับการผลิตอื่น acetate พบในสายพันธุ์

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ในระหว่างกระบวนการผลิตไวน์สังเคราะห์กลีเซอรอลแสดงให้เห็นถึงการตอบสนองต่อการปรับตัวแรกของ Saccharomyces cerevisiae ความเครียดออสโมติกหลังจากการฉีดวัคซีนในองุ่นต้อง เราได้ดำเนินการ RT-qPCR (ย้อนกลับถอดความเชิงปริมาณ PCR) วิธีการที่มีการประเมินผลการป้องกันของยีนอ้างอิงผู้สมัครเพื่อศึกษาหกยีนเป้าหมายที่เกี่ยวข้องกับการสังเคราะห์กลีเซอรอล (GPD1, GPD2, GPP2 และ GPP1) และฟลักซ์ (STL1 และ FPS1) และสามยีนมรกตเข้ารหัสสำหรับ dehydrogenase ลดีไฮด์ที่เกี่ยวข้องในการสมดุลอกซ์ผ่านการผลิตอะซิเตท ระดับ mRNA ในสามสายพันธุ์ที่โดดเด่นด้วยการผลิตสารที่แตกต่างกันคือการตรวจสอบในครั้งแรก 120 นาทีจากการฉีดวัคซีนเข้าองุ่นธรรมชาติต้อง การวิเคราะห์การแสดงออกแสดงให้เห็นถึงการตอบสนองชั่วคราวของ genesGPD1, GPD2, GPP2, GPP1 และ STL1 กับความแตกต่างระหว่างสายพันธุ์ในระยะของความอุดมสมบูรณ์ mRNA ในขณะที่ FPS1 ได้แสดงออก constitutively การตอบสนองชั่วคราวและความรุนแรงก​​ารแสดงออกที่แตกต่างกันในหมู่สายพันธุ์ในความสัมพันธ์กับรูปแบบการสะสมกลีเซอรอลเซลล์พิสูจน์การควบคุมลบความคิดเห็นผ่านทาง HOG (High osmolarity กลีเซอรอล) การส่งสัญญาณทางเดินในสายพันธุ์เอสไวน์ cerevisiae ภายใต้เงื่อนไขที่โรงกลั่นเหล้าองุ่น ท่ามกลางยีนมรกตเพียง ALD6 ถูกชักนำในระดับปานกลางในสภาพแวดล้อม hyperosmotic แต่ไม่ได้อยู่ในทุกสายพันธุ์ที่ผ่านการทดสอบในขณะที่ ALD3 และ ALD4 ถูกอย่างมากกลูโคสอัดอั้น ความรุนแรงของการถอดความจาก ALD6 ALD3 และดูเหมือนว่าจะเกี่ยวข้องกับการผลิตอะซิเตทที่แตกต่างกันพบในสายพันธุ์

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ในระหว่างกระบวนการ winemaking การสังเคราะห์กลีเซอรอลเป็นครั้งแรกที่เหมาะสมการตอบสนองของ Saccharomyces cerevisiae เพื่อเน้นหลังจากที่ได้รับในองุ่นจะต้อง เราได้ใช้ RT qpcr ( reverse transcription และวิธีการเชิงปริมาณกับการประเมินผลการป้องกันของยีนอ้างอิงผู้สมัคร เพื่อศึกษายีนที่เกี่ยวข้องกับการสังเคราะห์หกเป้าหมาย ( gpd1 gpd2 , กลีเซอรอล ,และ gpp2 gpp1 ) และฟลักซ์ ( stl1 และ fps1 ) และสาม ald ยีนไดอัลดีไฮด์ ดีไฮโดรจีเนสที่เกี่ยวข้องกับสมดุลรีดอกซ์ผ่านการผลิตอะซิเทต ระดับ mRNA ใน 3 สายพันธุ์ ลักษณะการผลิตอาหารที่แตกต่างกันถูกตรวจสอบในครั้งแรก 120 นาทีจากการฉีดวัคซีนเป็นองุ่นธรรมชาติต้อง การวิเคราะห์การแสดงออก แสดงการตอบสนองชั่วคราวของ genesgpd1 gpd2 gpp2 , , ,และ gpp1 stl1 กับความแตกต่างระหว่างสายพันธุ์ ในรูปของความอุดมสมบูรณ์ ในขณะที่ fps1 แสดงออก constitutively . การตอบสนองชั่วครู่และความเข้มของการแสดงออกแตกต่างกันระหว่างสายพันธุ์ ซึ่งสัมพันธ์กับการสะสมรูปแบบกลีเซอรอลพิสูจน์การควบคุมความคิดเห็นเชิงลบผ่านหมู ( กลีเซอรอลำสูง ) สัญญาณทางเดินใน S . cerevisiae สายพันธุ์ไวน์ภายใต้เงื่อนไขที่โรงงานไวน์ระหว่าง ald ยีนเพียง ald6 มีเกิดในสภาพแวดล้อม การแช่ในวัคซีน แต่ไม่ทุกสายพันธุ์ทดสอบ ในขณะที่ ald3 ald4 เป็นกลูโคสและอย่างรวดเร็วในการหักห้ามใจ ความเข้มของการถอดความของ ald6 ald3 และเหมือนจะเกี่ยวข้องกับการผลิตน้ำนมที่แตกต่างกันพบระหว่างสายพันธุ์