Biological materialThe susceptible

Biological materialThe susceptible Hevea brasiliensis clone PB260, from the CIRAD collection in Montpellier (France), was used for monitoring the toxicity of the purification fractions.The C. cassiicola pathogenic strain CCP was collected on infected hevea leaves from Philippines and purified by singleconidium isolation. The isolate was maintained in the darkon Potato Dextrose Agar (PDA) medium at 25 ◦C. For long term conservation, mycelial plugs were kept in sterile water, in the dark, at room temperature. For toxin production, a liquid culture was set up in 500 ml flasks, by inoculating 100 ml of modified Czapeck medium (Saccharose 30 g l−1, 2.2 g l−1 lglutamic acid, K2HPO4 1 g l−1, KCl 0.5 g l−1, MgSO4·7H2O 0.5 g l−1, 36M FeSO4·7H2O, 35M ZnSO4·7H2O, 40M CuSO4·5H2O, pH being around 4 before sterilization) with 3 mycelial plugs (5mm diameter) from a 7-days-old culture o PDA medium. The liquid culture was incubated without agitation at 25 ◦C (photoperiod 12 h) for 12–20 days. The medium was filtered once through Whatman filter paper to remove most of the mycelium, then twice through 0.22 m Millipore membranes. The last filtration was conducted under sterile laminar flow. The sterile filtrate was stored at room temperature.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

วัสดุชีวภาพ
อ่อนแอยางพาราโคลน PB260 จากคอลเลกชัน CIRAD ใน Montpellier (ฝรั่งเศส) ถูกนำมาใช้สำหรับการตรวจสอบความเป็นพิษของการทำให้บริสุทธิ์ fractions.The ซี cassiicola สายพันธุ์ที่ทำให้เกิดโรค CCP ถูกรวบรวมไว้ในใบยางพาราที่ติดเชื้อจากฟิลิปปินส์และบริสุทธิ์โดยการแยก singleconidium . แยกถูกเก็บรักษาไว้ในที่มืด
บนมันฝรั่ง Dextrose Agar (PDA) ขนาดกลาง 25 ◦C เพื่อการอนุรักษ์ในระยะยาวของเส้นใยปลั๊กถูกเก็บไว้ในน้ำหมันในที่มืดที่อุณหภูมิห้อง สำหรับการผลิตสารพิษวัฒนธรรมของเหลวถูกจัดตั้งขึ้นใน 500 ขวดมิลลิลิตรโดยการฉีดวัคซีน 100 มล. ของกลาง Czapeck การแก้ไข (Saccharose 30 GL-1, 2.2 GL-1 กรด lglutamic, K2HPO4 1 GL-1, โพแทสเซียมคลอไรด์ 0.5 GL-1, MgSO4 · 7H2O 0.5 GL-1, 36 M FeSO4 · 7H2O 35? M ZnSO4 · 7H2O 40? M CuSO 4 · 5H2O ค่า pH เป็นรอบที่ 4 ก่อนที่จะฆ่าเชื้อ) มี 3 ปลั๊กเส้นใย (เส้นผ่าศูนย์กลาง 5mm) จาก 7 วันเก่า วัฒนธรรม o กลาง PDA วัฒนธรรมของเหลวถูกบ่มโดยไม่ต้องกวนที่ 25 ◦C (แสง 12 ชั่วโมง) สำหรับ 12-20 วัน สื่อที่ถูกกรองครั้งเดียวผ่านกระดาษกรอง Whatman จะลบมากที่สุดของเส้นใยแล้วสองครั้งผ่าน 0.22 m? เยื่อร์ค กรองที่ผ่านมาได้ดำเนินการภายใต้ไหลผ่านการฆ่าเชื้อ

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

วัสดุทางชีวภาพ
ที่อ่อนแอ hevea ยางพาราโคลน PB260, จากคอลเลกชัน cirad ในมงเปอลีเย (ฝรั่งเศส), ถูกใช้สำหรับการตรวจสอบความเป็นพิษของเศษส่วนบริสุทธิ์. Cassiicola การเกิดโรคสายพันธุ์ CCP ถูกเก็บรวบรวมบนใบที่ติดเชื้อจากฟิลิปปินส์และบริสุทธิ์โดยการแยก singleconidium ตัวแยกถูกเก็บรักษาไว้ในที่มืด
บนมันฝรั่ง (PDA) ขนาดกลางที่25◦ C สำหรับการอนุรักษ์ในระยะยาว, ปลั๊ก mycelial ถูกเก็บไว้ในน้ำฆ่าเชื้อ, ในที่มืด, ที่อุณหภูมิห้อง. สำหรับการผลิตสารพิษ, วัฒนธรรมของเหลวถูกตั้งขึ้นในขวด๕๐๐มล. โดย inoculating ๑๐๐ ml ของการปรับเปลี่ยนของสื่อ Czapeck (Saccharose 30 g l − 1, ๒.๒ g l-1 lglutamic กรด, K2HPO4 1 g l − 1, KCl ๐.๕ g l − 1, MgSO4 ·7H2O ๐.๕ g l − 1, 36M FeSO4 ·7H2O , 35M ZnSO4 · 7H2O, 40 m CuSO4 · 5H2O, pH เป็นรอบ4ก่อนที่จะฆ่าเชื้อ) ด้วย3ปลั๊ก mycelial (เส้นผ่าศูนย์กลาง5มม.) จากวัฒนธรรม7วันเก่า o PDA. วัฒนธรรมของเหลว incubated โดยไม่ต้องปั่นป่วนที่25◦ C (ช่วงแสง12ชั่วโมง) เป็นเวลา 12-20 วัน สื่อถูกกรองครั้งเดียวผ่าน Whatman กรองกระดาษเพื่อลบส่วนใหญ่ของ mycelium, แล้วสองครั้งผ่าน๐.๒๒ m มิลลิรูขุมขน. การกรองครั้งสุดท้ายถูกดำเนินการภายใต้การไหลของการฆ่าเชื้อ การถอนการฆ่าเชื้อถูกเก็บไว้ที่อุณหภูมิห้อง

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

วัสดุชีวภาพ
พิษของการแยกและการทำให้บริสุทธิ์บางส่วนได้รับการตรวจสอบโดยการใช้โคลน pb260 ของต้นไม้ที่ติดเชื้อจากใบยางที่ติดเชื้อในฟิลิปปินส์ การแยกจะถูกเก็บไว้ในที่มืด
เส้นใยที่ถูกเก็บไว้ในน้ำปลอดเชื้อในที่มืดและอุณหภูมิห้องเพื่อรักษาเส้นใยในระยะยาว เพื่อที่จะผลิตสารพิษในการผลิต czapeck สื่อที่ได้รับการฉีดวัคซีน、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、นี่ ก่อนการฆ่าเชื้อค่าพีเอชที่ประมาณ 4.the เส้นผ่าศูนย์กลางสาม 5mm เส้นผ่าศูนย์กลางของเชื้อจุลินทรีย์เสียบวัฒนธรรมจาก PDA วัฒนธรรมสื่อ วัฒนธรรมของเหลวฟักไข่ 12-20 วันโดยไม่ต้องกวนภายใต้วัฏจักรแสง สื่อกรองผ่าน Whatman กรองเพียงครั้งเดียวเพื่อลบมากที่สุดของเส้นใยและกรองผ่าน 0.22m ไมโครเมมเบรนสองครั้ง กรองสุดท้ายจะดำเนินการภายใต้ชั้นปลอดเชื้อ ตัวกรองที่ปราศจากเชื้อจะถูกเก็บไว้ที่อุณหภูมิห้อง