3. Results and discussion3.1. Anthe

3. Results and discussion
3.1. Anther culture progression revealed genotype-dependent
responses to embryogenesis-inductive conditions (stress and
medium)
An analysis to correlate the phenological stage of flower buds,
anther size and pollen developmental stage was firstly carried out
in order to establish a convenient selection criterion of the buds.
Several flower bud stages containing anthers of different sizes
were determined according to the total length and their sepal-petal
lengths ratio. DAPI staining for DNA was performed on anthers
to reveal the developmental stage of the microspores contained
in each bud/anther type. Selected stages showed young and late
vacuolated microspores (Fig. 1d, e, g and h) inside buds which
exhibited the petals appearing with a length lesser than the sepals
(Fig. 1a and b), and bicellular pollen (Fig. 1f and i) and mature pollen
inside the longer buds, with the length of petals higher than the
sepals (Fig. 1c). These results permitted us to select the buds at
the most appropriate stage for the in vitro culture, those containing
vacuolate microspores (Fig. 1a and b), according to most reports
on pollen embryogenesis (González-Melendi et al., 1995; Ramírez
et al., 2003; Peixe et al., 2004; Germanà et al., 2006; Solís et al.,
2008).
Different features have been described in anther cultures as
signs of initiation of amorphogenic response and the change of the
developmental pathway. After one week of culture, while the nonresponsive
anthers decreased in volume and turgenscence (Fig. 2b),
in other anthers, the swelling, that is the first anatomical change
accompanying the morphogenic response (Germanà et al., 2006),
was observed (Fig. 2c) and keep swelling for more than four weeks;
then, some of the swollen anthers started to produce callus (Fig. 2d
and e). Different types of callus were observed: in few cases calli
were white, transparent and friable (Fig. 2d), but in most cases, calli
were yellowish (Fig. 2e), with some globular structures (Fig. 2f).
DAPI staining performed after two months of culture, on anthers
with globular structures, showed some multinucleated structures
(Fig. 2g), indicating that the microspores were induced to follow
the sporophytic pathway.
Different responses were observed among anthers cultured on
medium P (Table 1). Statistical analysis showed that the best results
were obtained from the cultivar Sajeb, Palumella and Ninfa; in
fact, these cultivars showed the lowest percentage of not developed
anthers (41.8%, 49,4% and 57,9% respectively) and the highest
percentages of swollen anthers (56.3%, 49,8% and 41,4% respectively).
Nostatistically significant differences were observedamong
cultivars regarding callus production (Table 1). These three cultivars
were selected for the culture in the medium NN4, which
was previously reported for anther culture of another cultivar
of apricot (Peixe et al., 2004). The cultivar Ninfa gave the best

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

3. ผลลัพธ์ และสนทนา3.1. anther วัฒนธรรมก้าวหน้าขึ้นอยู่กับลักษณะทางพันธุกรรมที่เปิดเผยคำตอบเงื่อนไขการเกิดเอ็มบริโอเหนี่ยว (ความเครียด และขนาดกลาง)การวิเคราะห์การเชื่อมโยงระยะ phenological ของอาหารดอกไม้anther ขนาดและละอองเกสรพัฒนาขั้นตอนแรกทำออกมาเพื่อสร้างเกณฑ์สะดวกเลือกของอาหารฟลาวเวอร์บัดหลายขั้นเหมือนที่มีขนาดแตกต่างกันถูกกำหนดตามความยาวรวมของกลีบดอกไม้ sepalอัตราส่วนความยาว ทำการย้อมสีสำหรับ DNA DAPI ตามเหมือนให้เหมาะกับระยะการพัฒนาของ microspores ที่อยู่ในแต่ละชนิดดอก ตูม/anther ขั้นเลือกพบหนุ่ม และล่าช้าbuds vacuolated microspores (Fig. 1 d, e, g และ h) ภายในซึ่งกลีบที่ปรากฏ มีความยาวน้อยกว่า sepals จัดแสดง(Fig. 1a และ b), และ bicellular pollen (Fig. 1f และฉัน) และละอองเกสรที่เป็นผู้ใหญ่ภายในอาหารแบบยาว ความยาวของกลีบสูงกว่าsepals กิน 1c) ผลลัพธ์เหล่านี้อนุญาตให้เราเลือกอาหารที่ขั้นตอนที่เหมาะสมสำหรับการเพาะ ผู้ที่ประกอบด้วยvacuolate microspores (Fig. 1a และ b), ตามรายงานส่วนใหญ่ในการเกิดเอ็มบริโอละอองเกสร (González Melendi และ al., 1995 Ramírezและ al., 2003 Peixe et al., 2004 Germanà และ al., 2006 Solís et al.,2008)มีการอธิบายคุณลักษณะต่าง ๆ ในวัฒนธรรม anther เป็นสัญญาณเริ่มต้นของการตอบสนอง amorphogenic และการเปลี่ยนแปลงทางเดินที่พัฒนา หลังจากหนึ่งสัปดาห์ของวัฒนธรรม ในขณะที่ nonresponsiveเหมือนที่ลดลงในปริมาณและ turgenscence (Fig. 2b),ในอื่น ๆ เหมือน บวม เป็นการเปลี่ยนแปลงแรกที่กายวิภาคมาพร้อมกับการตอบสนอง morphogenic (Germanà และ al., 2006),สังเกต (Fig. 2 c) และบวมมากกว่า 4 สัปดาห์ ให้แล้ว บางเหมือนบวมเริ่มการผลิตแคลลัส (Fig. 2dก e) ชนิดต่าง ๆ ของแคลลัสสุภัค: ในบางกรณี calliมีสีขาว สีใส และ friable (Fig.), แต่ ใน กรณีส่วนใหญ่ calliมีสีออกเหลือง (Fig. 2e), มีโครงสร้างบาง globular (Fig. 2f)ย้อมสี DAPI ดำเนินหลังจากสองเดือนของวัฒนธรรม บนเหมือนมีโครงสร้าง globular แสดงให้เห็นโครงสร้างบาง multinucleatedกิน 2 กรัม), ระบุว่า microspores ที่นำไปทำตามทางเดิน sporophyticนายสุภัคตอบสนองแตกต่างกันระหว่างอ่างบนเหมือนP ปานกลาง (ตารางที่ 1) วิเคราะห์ทางสถิติพบว่าผลลัพธ์ดีที่สุดได้รับจาก cultivar Sajeb, Palumella และ Ninfa ในความจริง พันธุ์เหล่านี้แสดงให้เห็นเปอร์เซ็นต์ต่ำสุดของพัฒนาไม่เหมือน (41.8%, 49,4% และ 57,9% ตามลำดับ) และที่สูงที่สุดจากเปอร์เซ็นต์เหมือนบวม (56.3%, 49,8% และ 41,4% ตามลำดับ)ความแตกต่างอย่างมีนัยสำคัญของ Nostatistically ได้ observedamongพันธุ์เกี่ยวกับผลิตแคลลัส (ตาราง 1) พันธุ์เหล่านี้สามเลือกในวัฒนธรรมใน NN4 กลาง ซึ่งก่อนหน้านี้มีรายงานในวัฒนธรรม anther ของ cultivar อื่นของพพริ (Peixe et al., 2004) Cultivar Ninfa ให้ราคาดีสุด

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

3. ผลการอภิปรายและ
3.1 ความก้าวหน้าของวัฒนธรรมอับละอองเกสรเปิดเผยจีโนไทป์ขึ้นอยู่กับการตอบสนองต่อเงื่อนไข embryogenesis อุปนัย (ความเครียดและขนาดกลาง) การวิเคราะห์ความสัมพันธ์เวที phenological ของตาดอก, ดอกไม้ขนาดและละอองเกสรดอกไม้ขั้นตอนการพัฒนาได้ดำเนินการในตอนแรกออกมาเพื่อสร้างเกณฑ์การเลือกที่สะดวกในการตา. ขั้นตอนตาดอกอับเรณูมีหลายขนาดแตกต่างกันได้รับการพิจารณาให้เป็นไปตามความยาวทั้งหมดกลีบเลี้ยงและกลีบของพวกเขาอัตราส่วนความยาว การย้อมสี DAPI ดีเอ็นเอที่ได้ดำเนินการในอับเรณูจะเปิดเผยขั้นตอนการพัฒนาของ microspores ที่มีอยู่ในแต่ละตา/ ประเภทอับละอองเกสร ขั้นตอนที่เลือกแสดงให้เห็นว่าเด็กและปลายแวคิวโอ microspores (รูป. 1 d, E, G และเอช) ภายในตาซึ่งแสดงกลีบที่ปรากฏมีความยาวน้อยกว่ากลีบเลี้ยงที่(รูป. 1a และ b) และเกสร bicellular (รูป. 1f และฉัน ) และละอองเกสรดอกไม้ผู้ใหญ่ภายในตาอีกต่อไปกับความยาวของกลีบดอกสูงกว่าที่กลีบเลี้ยง(รูป. 1 c) ผลลัพธ์เหล่านี้ได้รับอนุญาตให้เราสามารถเลือกตาที่เวทีที่เหมาะสมที่สุดสำหรับในหลอดทดลองวัฒนธรรมผู้ที่มีmicrospores vacuolate (รูปที่ 1a และข.) ตามรายงานมากที่สุดในเกสรembryogenesis (González-Melendi, et al, 1995;. Ramírez et อัล, 2003. Peixe et al, 2004;. Germana et al, 2006;.. Solís, et al,. 2008) คุณสมบัติที่แตกต่างกันได้รับการอธิบายในวัฒนธรรมดอกไม้เป็นสัญญาณของการเริ่มต้นของการตอบสนอง amorphogenic และการเปลี่ยนแปลงของเส้นทางการพัฒนา หลังจากหนึ่งสัปดาห์ของวัฒนธรรมในขณะที่ nonresponsive อับเรณูลดลงในปริมาณและ turgenscence (รูป. 2b) ในอับเรณูอื่น ๆ บวมนั่นคือการเปลี่ยนแปลงทางกายวิภาคครั้งแรกที่มาพร้อมกับการตอบสนองmorphogenic (Germana et al., 2006) พบว่า ( รูปที่ 2 c) และให้บวมนานกว่าสี่สัปดาห์. แล้วบางส่วนของอับเรณูบวมเริ่มผลิตแคลลัส (รูปที่ 2d. และ e) รูปแบบต่างๆของแคลลัสถูกตั้งข้อสังเกตในบางกรณีแคลลัสเป็นสีขาวโปร่งใสและเปราะ (Fig. 2d) แต่ในกรณีส่วนใหญ่, แคลลัสเป็นสีเหลือง(Fig. 2e) ที่มีโครงสร้างเป็นรูปทรงกลมบาง (รูป 2f.). การย้อมสี DAPI ดำเนินการ หลังจากนั้นสองเดือนของวัฒนธรรมในอับเรณูที่มีโครงสร้างเป็นรูปทรงกลมแสดงให้เห็นบางส่วนโครงสร้างmultinucleated (รูป. 2g) แสดงให้เห็นว่า microspores ถูกเหนี่ยวนำให้เกิดการปฏิบัติตามทางเดินsporophytic. การตอบสนองที่แตกต่างกันถูกตั้งข้อสังเกตในหมู่อับเรณูเลี้ยงบนกลาง P (ตารางที่ 1) การวิเคราะห์ทางสถิติแสดงให้เห็นว่าผลลัพธ์ที่ดีที่สุดที่ได้รับจากพันธุ์ Sajeb, Palumella และ Ninfa; ในความเป็นจริงเหล่านี้แสดงให้เห็นว่าสายพันธุ์ร้อยละต่ำสุดของไม่ได้พัฒนาอับเรณู(41.8% 49,4% และ 57,9% ตามลำดับ) และสูงสุดร้อยละของอับเรณูบวม(56.3% 49,8% และ 41,4% ตามลำดับ) . Nostatistically แตกต่างอย่างมีนัยสำคัญ observedamong พันธุ์เกี่ยวกับการผลิตแคลลัส (ตารางที่ 1) ทั้งสามสายพันธุ์ที่ได้รับการคัดเลือกวัฒนธรรมใน NN4 ขนาดกลางซึ่งมีรายงานก่อนหน้านี้สำหรับการเพาะเลี้ยงอับละอองเกสรของพันธุ์อื่นของแอปริคอท(Peixe et al., 2004) พันธุ์ Ninfa ให้ดีที่สุด

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

3 . ผลและการอภิปราย
3.1 . วัฒนธรรมกับการเปิดเผยความก้าวหน้า ( ขึ้นอยู่กับเงื่อนไขของการอุปนัย ( เครียด


และขนาดกลาง ) การวิเคราะห์ความสัมพันธ์ระยะ phenological ตาดอกไม้ ขนาดอับเกสร
พัฒนาการขั้นเริ่มแรกดำเนินการ
เพื่อสร้างเกณฑ์การเลือกที่สะดวกของตา
.หลายขั้นตอนที่มีดอกตูมดอกที่มีขนาดแตกต่างกัน
ถูกกำหนดตามความยาวทั้งหมดของกลีบเลี้ยงของดอกกลีบดอก
ความยาวอัตราส่วน dapi การย้อมสีดีเอ็นเอ มีการ อับเรณู
เปิดเผยขั้นตอนการพัฒนาของไมโครสปอร์ที่มีอยู่ในแต่ละหน่อ /
( ชนิด เลือกขั้นตอน พบเด็กและสาย
vacuolated ละอองเกสร ( ภาพ 1D , E , G และ H ) ภายในซึ่ง
ตามีกลีบดอกที่ปรากฏ มีความยาวน้อยกว่ากลีบเลี้ยง
( รูปที่ 1A และ B ) และเกสร ( รูป bicellular 1f และฉัน ) และผู้ใหญ่เกสร
ข้างในตาอีกต่อไป กับความยาวของกลีบ กลีบเลี้ยงสูงกว่า
( รูปที่ 1C ) ผลลัพธ์เหล่านี้อนุญาตให้เราเลือกดอกที่
เวทีที่เหมาะสมที่สุดสำหรับการเพาะ , ผู้ที่มี
vacuolate ละอองเกสร ( รูปที่ 1A และ B )ตามรายงานของที่สุด
บนเกสร ( gonz lez . kgm melendi et al . , 1995 ; Ram í rez
et al . , 2003 ; Peixe et al . , 2004 ; เยอรมันล่าสุด et al . , 2006 ; โซลí s et al . ,

) ) ได้ถูกอธิบายไว้ในลักษณะที่แตกต่างกัน ( วัฒนธรรม เป็นสัญญาณของการเริ่มต้นของการตอบสนอง amorphogenic

) และการเปลี่ยนแปลงของการพัฒนา หลังจากหนึ่งสัปดาห์วัฒนธรรม ในขณะที่ไม่ตอบสนอง
เรณูลดลงในปริมาณและ turgenscence ( รูปที่ 2B ) ,
ใน อับเรณู , อื่น ๆ อาการบวม นั่นเป็นครั้งแรกที่เปลี่ยนไปการตอบสนอง morphogenic
( เยอรมันล่าสุด et al . , 2006 )
) ( รูปที่ 2 ) และให้บวมนานกว่าสี่สัปดาห์ที่ผ่านมา ;
แล้วบางส่วนของเรณูบวม เริ่มผลิตแคลลัส ( ภาพ 2D
และ E ) ประเภทที่แตกต่างกันของแคลลัสที่พบ : ในกรณีแคลลัส
น้อยขาวใสและเปราะ ( รูปที่ 2 ) , แต่ในกรณีส่วนใหญ่ , แคลลัส
) ( รูปที่ 2 ) สีเหลือง กับบางทรงกลมโครงสร้าง ( รูปห้อง 2F )
dapi staining แสดงหลังจากสองเดือนของวัฒนธรรม บนอับเรณู
ที่มีโครงสร้างเป็นรูปทรงกลม มีโครงสร้างบาง multinucleated
( รูป 2G ) , ระบุว่า ข้าวถูกชักนำไปตามทางเดิน sporophytic

.การตอบสนองที่แตกต่างกันที่พบในการเพาะเลี้ยงอับเรณู
) P ( ตารางที่ 1 ) การวิเคราะห์ทางสถิติพบว่า ผลลัพธ์ที่ดีที่สุด
ได้มาจาก sajeb พันธุ์ , และ palumella ฟา ;
ความเป็นจริง พันธุ์เหล่านี้มีเปอร์เซ็นต์ต่ำสุดของพัฒนาไม่
เรณู ( 41.8 เปอร์เซ็นต์ 49,4 % และ 57,9 เปอร์เซ็นต์ตามลำดับ ) และเปอร์เซ็นต์สูงสุด
เรณูบวม ( 56.3 % , 49,8 % และ 41,4 ตามลำดับ ) .
ไม่แตกต่างกัน คือ observedamong
พันธุ์เกี่ยวกับการผลิตแคลลัส ( ตารางที่ 1 ) เหล่านี้สามพันธุ์
เลือกวัฒนธรรมในสื่อ nn4 ซึ่ง
ก่อนหน้านี้รายงานพฤติกรรม วัฒนธรรมของอีกพันธุ์
ของ apricot ( Peixe et al . , 2004 ) พันธุ์ฟาให้ดีที่สุด