(diameter, 9.5 cm; height, 2 cm). M

(diameter, 9.5 cm; height, 2 cm). Mortality was determined 48 h after
treatment. Each assay was performed 5 times.
Comparative Toxicities. To determine the contribution of each
constituent to fumigant or contact toxicity against German
cockroaches, we prepared blends of all constituents for 4 active oils
that mimicked the natural oils. We also prepared a number of blends,
each lacking 1 constituent (Figures 1 and 2). Blends were based on the
natural composition of the 4 active oils, as indicated by GC-FID
(Table 4). In a fumigant toxicity test, the concentration of dill and
carvi oils was 20 mg/filter paper. The concentrations of the full
mixture of dill and carvi oils were 15.82 mg/filter paper and 16.78 mg/
filter paper, respectively. The concentrations of cumin oil and the full
mixture were 5 mg/filter paper and 3.82 mg/filter paper, respectively.
The concentrations of other blends were determined by removing
each constituent equivalent to the ratio identified in dill, carvi, and
cumin oils. In the contact toxicity test, the concentration of dill, carvi,
and ajowan oil was 2 mg/♀. The concentration of cumin oils was 1
mg/♀. The concentrations of artificial mixtures of dill, carvi, and
ajowan oils were 1.58, 1.66, and 1.96 mg/♀, respectively. The
concentration of artificial mixtures of cumin oil was 0.76 mg/♀. The
concentrations of other blends were determined by removing each
constituent equivalent to the ratio identified in dill, carvi, cumin, and
ajowan oils. We also compared the toxicities of the complete and
incomplete blends with those of the pure 4 active oils.
Primary AChE Inhibition Assay and IC50 Estimation. To
extract crude protein, an adult cockroach was ground using a glass
tissue-grinder (Wheaton Industries Inc., Millville, NJ) in protein
extraction buffer (0.1 M Tris-HCl containing 0.02 M NaCl and 0.5%
Triton X-100, pH 7.8) and protease inhibitor cocktail (Sigma-Aldrich,
St. Louis, MO). The ground cockroach was centrifuged at 15,000 rpm
for 15 min, and the crude protein was collected from the ground
mixture. All procedures to extract the crude protein were performed
under 4 °C. The AChE activity was measured using the modified
Ellman method.15 All chemicals tested were diluted to 100 mg/mL in
acetone (carvacrol and thymol were diluted to 50 mg/mL). Then, 2
μL of the chemicals (final concentration was 0.5 mg/mL or 1 mg/mL)
and 30 μL of crude protein were mixed in a 96-well microplate
containing 148 μL of protein extraction buffer. Next, the mixture was
incubated for 10 min at room temperature and then acetylthiocholine
iodide (final concentration, 1 mM) and 5,5′-dithiobis(2-nitrobenzoic
acid) (final concentration, 0.4 mM) were added. The control was
treated by adding acetone without other chemicals. The enzyme
activity was measured for 30 min at 1 min intervals at 405 nm and rt.
The inhibition rate of the treatment against control was calculated in
percentage by using the following formula:

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

(เส้นผ่าศูนย์กลาง 9.5 ซม สูง ซม. 2) การตายถูกกำหนด h 48 หลังการรักษา ทดสอบแต่ละที่ดำเนินการ 5 ครั้งToxicities เปรียบเทียบ การกำหนดสัดส่วนของแต่ละวิภาคการ toxicity fumigant หรือติดต่อกับเยอรมันแมลงสาบ เราเตรียมผสม constituents ทั้งหมดสำหรับการใช้งานน้ำมัน 4ที่ mimicked น้ำมันธรรมชาติ เราเตรียมไว้จำนวนผสมละขาดวิภาค 1 (ตัวเลข 1 และ 2) ผสมได้ตามองค์ประกอบธรรมชาติของน้ำมันงาน 4 ระบุโดย GC-FID(ตาราง 4) ในทดสอบ fumigant ความเป็นพิษ ความเข้มข้นของผักชีฝรั่ง และน้ำมัน carvi 20 mg/กรอง กระดาษได้ ความเข้มข้นของเต็มผสมผักชีลาวและ carvi น้ำมันถูก 15.82 มิลลิกรัม/และ 16.78 มิลลิกรัม /กรอง กระดาษตามลำดับ ความเข้มข้นของน้ำมันผงยี่หร่าและเต็มส่วนผสมได้ 5 mg/และ กระดาษกรอง 3.82 มิลลิกรัม ตามลำดับความเข้มข้นของผสมอื่น ๆ ที่กำหนด โดยการเอาวิภาคละเท่ากับอัตราส่วนที่ระบุในผักชีฝรั่ง carvi และผงยี่หร่าน้ำมัน ในการทดสอบความเป็นพิษติดต่อ ความเข้มข้นของผักชีลาว carviและ ajowan น้ำมันถูก♀ 2 มิลลิกรัม ความเข้มข้นของผงยี่หร่าน้ำมันถูก 1มิลลิกรัม/♀ ความเข้มข้นของน้ำยาผสมเทียมของผักชีลาว carvi และajowan น้ำมัน 1.58, 1.66 และ 1.96 mg/♀ ตามลำดับ ที่ความเข้มข้นของน้ำยาผสมเทียมผงยี่หร่าน้ำมันถูก 0.76 มิลลิกรัม / ♀ความเข้มข้นของผสมอื่น ๆ ที่กำหนด โดยเอาแต่ละเทียบเท่ากับอัตราส่วนที่ระบุในผักชีฝรั่ง carvi ผง ยี่หร่า วิภาค และajowan น้ำมัน นอกจากนี้เรายังเทียบ toxicities ของสมบูรณ์ และผสมไม่สมบูรณ์กับน้ำมันใช้งานอยู่ 4 บริสุทธิ์หลักปวดยับยั้งการวิเคราะห์และประเมิน IC50 ถึงสารสกัดจากโปรตีนหยาบ แมลงสาบตัวผู้ใหญ่ถูกพื้นดินใช้แก้วเนื้อเยื่อเครื่องบด (Wheaton จิง Millville, NJ) ในโปรตีนแยกบัฟเฟอร์ (0.1 ทริสเรทติ้ง M-0.02 M NaCl และ 0.5% HClไตรตั้น X 100 ค่า pH 7.8) และรติเอสเตอร์ค็อกเทล (ซิก-AldrichSt. Louis, MO) แมลงสาบดินถูก centrifuged ที่ 15000 รอบต่อนาทีสำหรับ 15 นาที และโปรตีนหยาบรวบรวมจากพื้นดินส่วนผสมของ ดำเนินตามขั้นตอนทั้งหมดเพื่อแยกโปรตีนหยาบต่ำกว่า 4 องศาเซลเซียส กิจกรรมปวดถูกวัดโดยใช้การปรับเปลี่ยนMethod.15 Ellman ทดสอบสารเคมีทั้งหมดถูกทำให้เจือจางให้ 100 mg/mL ในอะซีโตน (คาร์วาครอลและ thymol ถูกทำให้เจือจางให้ 50 mg/mL) แล้ว 2ΜL ของสารเคมี (ความเข้มข้นสุดท้ายเป็น 0.5 mg/mL หรือ 1 mg/mL)และมีผสม μL 30 ของโปรตีนหยาบใน microplate 96 ดีประกอบด้วย μL 148 บัฟเฟอร์โปรตีนสกัด ถัดไป ส่วนผสมได้incubated ใน 10 นาทีที่อุณหภูมิห้อง แล้ว acetylthiocholineไอโอไดด์ (ความเข้มข้นสุดท้าย 1 mM) และ 5, 5′-dithiobis(2-nitrobenzoicกรด) (ความเข้มข้นสุดท้าย 0.4 mM) เพิ่มขึ้น ตัวควบคุมไม่รักษา โดยการเพิ่มอะซีโตน โดยไม่มีสารเคมีอื่น ๆ เอนไซม์นี้กิจกรรมที่วัดใน 30 นาทีในช่วงเวลา 1 นาทีที่ 405 nm และ rtมีคำนวณอัตราการรักษากับควบคุมยับยั้งในเปอร์เซ็นต์ โดยใช้สูตรต่อไปนี้:

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

(เส้นผ่าศูนย์กลาง 9.5 ซมความสูง 2 ซม.) ตายถูกกำหนดเวลา 48 ชั่วโมงหลังจาก
การรักษา การทดสอบแต่ละคนได้ดำเนินการ 5 ครั้ง.
เปรียบเทียบพิษ การตรวจสอบการมีส่วนร่วมของแต่ละ
องค์ประกอบจะ fumigant หรือติดต่อพิษกับเยอรมัน
แมลงสาบเราจัดเตรียมการผสมขององค์ประกอบทั้งหมด 4 น้ำมันที่ใช้งาน
ที่เลียนแบบน้ำมันตามธรรมชาติ นอกจากนี้เรายังจัดทำจำนวนผสม
แต่ละขาด 1 ส่วนประกอบ (1 ตัวเลขและ 2) ผสมขึ้นอยู่กับ
องค์ประกอบทางธรรมชาติของ 4 น้ำมันที่ใช้งานตามที่ระบุโดย GC-FID
(ตารางที่ 4) ในการทดสอบความเป็นพิษรมเข้มข้นของผักชีฝรั่งและ
น้ำมัน Carvi 20 mg / กระดาษกรอง เข้มข้นเต็ม
ส่วนผสมของผักชีฝรั่งและน้ำมัน Carvi เป็น 15.82 mg / กระดาษกรองและ 16.78 mg /
กระดาษกรองตามลำดับ ความเข้มข้นของน้ำมันยี่หร่าและเต็มรูปแบบ
ผสมจำนวน 5 mg / กระดาษกรองและ 3.82 mg / กระดาษกรองตามลำดับ.
เข้มข้นผสมอื่น ๆ ที่ได้รับการพิจารณาโดยการเอา
แต่ละส่วนประกอบเทียบเท่าอัตราส่วนที่ระบุไว้ในผักชีฝรั่ง, Carvi และ
น้ำมันหอมยี่หร่า ในการทดสอบความเป็นพิษติดต่อเข้มข้นของผักชีฝรั่ง, Carvi,
และน้ำมัน ajowan 2 mg / ♀ ความเข้มข้นของน้ำมันหอมยี่หร่าคือ 1
มิลลิกรัม / ♀ ความเข้มข้นของสารผสมเทียมของผักชีฝรั่ง, Carvi และ
น้ำมัน ajowan เป็น 1.58, 1.66 และ 1.96 mg / ♀ตามลำดับ
ความเข้มข้นของสารผสมเทียมของน้ำมันยี่หร่าเป็น 0.76 mg / ♀
ความเข้มข้นของส่วนผสมอื่น ๆ ที่ได้รับการพิจารณาโดยการเอาแต่ละ
ส่วนประกอบเทียบเท่าอัตราส่วนที่ระบุไว้ในผักชีฝรั่ง, Carvi ยี่หร่าและ
น้ำมัน ajowan นอกจากนี้เรายังเปรียบเทียบความเป็นพิษของสมบูรณ์และ
ไม่สมบูรณ์ผสมกับผู้บริสุทธิ์ 4 น้ำมันที่ใช้งาน.
ประถมเจ็บยับยั้ง Assay และ IC50 ประมาณ ในการ
สกัดโปรตีนแมลงสาบผู้ใหญ่เป็นพื้นดินโดยใช้แก้ว
เนื้อเยื่อบด (Wheaton อุตสาหกรรมอิงค์ Millville, นิวเจอร์ซีย์) ในโปรตีน
สารสกัด (0.1 M Tris-HCl ที่มีโซเดียมคลอไรด์ 0.02 M และ 0.5%
Triton X-100, พีเอช 7.8 ) และยับยั้งเอนไซม์โปรติเอค๊อกเทล (Sigma-Aldrich,
เซนต์หลุยส์) แมลงสาบพื้นดินได้รับการหมุนเหวี่ยงที่ 15,000 รอบต่อนาที
เป็นเวลา 15 นาทีและโปรตีนที่ถูกเก็บรวบรวมมาจากพื้นดิน
ผสม ขั้นตอนทั้งหมดในการสกัดโปรตีนได้ดำเนินการ
ภายใต้ 4 ° C กิจกรรมเจ็บถูกวัดโดยใช้การแก้ไข
Ellman method.15 สารเคมีทั้งหมดผ่านการทดสอบถูกเจือจางถึง 100 มิลลิกรัม / มิลลิลิตรใน
อะซิโตน (carvacrol และไทมอลถูกเจือจางถึง 50 มิลลิกรัม / มิลลิลิตร) จากนั้น 2
ไมโครลิตรของสารเคมี (ความเข้มข้นสุดท้ายคือ 0.5 มิลลิกรัม / มิลลิลิตรหรือ 1 มิลลิกรัม / มิลลิลิตร)
และ 30 ไมโครลิตรของโปรตีนที่ถูกผสมใน microplate 96 หลุม
ที่มี 148 ไมโครลิตรของโปรตีนสารสกัด ถัดไปส่วนผสมที่ถูก
บ่มเป็นเวลา 10 นาทีที่อุณหภูมิห้องแล้ว acetylthiocholine
ไอโอไดด์ (ความเข้มข้นสุดท้าย, 1 มิลลิเมตร) 5,5'-Dithiobis (2-nitrobenzoic
กรด) (ความเข้มข้นสุดท้าย, 0.4 มิลลิ) ถูกเพิ่ม ควบคุมได้
รับการรักษาโดยการเพิ่มอะซิโตนโดยไม่ต้องสารเคมีอื่น ๆ เอนไซม์
กิจกรรมวัดเป็นเวลา 30 นาทีวันที่ 1 ช่วงเวลานาทีที่ 405 นาโนเมตรและ RT.
อัตราการยับยั้งการรักษากับการควบคุมที่คำนวณได้ใน
อัตราร้อยละโดยใช้สูตรต่อไปนี้:

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

( เส้นผ่าศูนย์กลาง 9.5 ซม. สูง 2 ซม. ) ปี 48 ชั่วโมงหลังจาก
ตั้งใจรักษา แต่ละวิธีทำ 5 ครั้ง
ความเป็นพิษโดยเปรียบเทียบ ตรวจสอบผลงานของแต่ละองค์ประกอบในกระดองหุ้มตัวสัตว์ หรือความเป็นพิษ

ติดต่อกับแมลงสาบเยอรมัน เราเตรียมผสมทุกองค์ประกอบ 4 ปราดเปรียวขับ
ที่ mimicked น้ำมันตามธรรมชาติ . เรายังเตรียมหมายเลขผสม ,
แต่ละคนขาด 1 องค์ประกอบ ( ตัวเลข 1 และ 2 ) ผสมตาม
องค์ประกอบที่เป็นธรรมชาติของตัวขับ 4 ปราดเปรียว , ตามที่ระบุโดย gc-fid
( ตารางที่ 4 ) ในการทดสอบความเป็นพิษของสารพิษพ่นฆ่าแมลงและหนู ความเข้มข้นของผักชีฝรั่งและ
ในน้ำมันคือ 20 มิลลิกรัม / ตัวกรองกระดาษ ความเข้มข้นของส่วนผสมเต็ม
ของผักชีฝรั่งและในน้ำมันถูก 15.82 มิลลิกรัม / ตัวกรองกระดาษ กรองกระดาษ
16.78 มิลลิกรัมต่อลิตร ตามลำดับความเข้มข้นของน้ำมันยี่หร่าผสมเต็ม
5 มิลลิกรัม / ตัวกรองกระดาษและ 3.82 มิลลิกรัม / ตัวกรองกระดาษ , ตามลำดับ .
ส่วนผสมอื่น ๆถูกกำหนดโดยการลบองค์ประกอบแต่ละ
เทียบเท่าอัตราส่วนที่ระบุไว้ใน ดิล ในและ
ยี่หร่าน้ำมัน ในการติดต่อ การทดสอบความเป็นพิษ พบในผักชีฝรั่ง , และน้ำมัน โจวาน
2 มก. / ♀ . ความเข้มข้นของน้ำมันยี่หร่า 1
มิลลิกรัม / ♀ . ความเข้มข้นของเทียมผสมผักชีลาว , ใน , และ
โจวานขับเป็น 1.58 , 1.66 และ 1.96 mg / ♀ตามลำดับ
ความเข้มข้นของส่วนผสมของน้ำมันยี่หร่าเทียมคือ 0.76 มก. / ♀ .
ส่วนผสมอื่น ๆถูกกำหนดโดยการลบองค์ประกอบแต่ละ
เทียบเท่าอัตราส่วนที่ระบุไว้ใน ดิล ในยี่หร่าและ
โจวานน้ำมันเราเปรียบเทียบความเป็นพิษของที่สมบูรณ์และไม่สมบูรณ์ ผสมกับ
ของบริสุทธิ์ 4 ใช้งานน้ำมัน การปวดในการยับยั้ง
ic50 .

สารสกัดโปรตีน เป็นแมลงสาบ ผู้ใหญ่คือพื้นดินใช้แก้ว
เยื่อบด ( Wheaton อุตสาหกรรมอิงค์ Millersburg , NJ ) ในบัฟเฟอร์การสกัดโปรตีน ( 0.1 M HCl ที่มีต่อ

0.02 M NaCl 0.5% Triton X-100 , pH 78 ) และตัวยับยั้งโปรเทล ( ซิกม่า Aldrich
St . Louis , MO ) พื้นดินแมลงสาบคือระดับที่ 15 , 000 รอบต่อนาที
15 นาที และโปรตีนที่ได้รวบรวมพื้น
ผสม ทุกขั้นตอนการแยกโปรตีนจำนวน
ภายใต้ 4 องศา ปวดกิจกรรมการวัดการ
เอลเมิ่น method.15 สารเคมีทั้งหมดทดสอบเพื่อลด 100 mg / ml ใน
( คาร์วาโครลไทมอลอะซิโตนและลดถึง 50 มิลลิกรัม / มิลลิลิตร ) แล้ว 2
μ L ของสารเคมี ( ความเข้มข้นสุดท้ายคือ 0.5 มก. / มล. หรือ 1 มก. / มล. และ 30 L )
μโปรตีนผสมในพื้นที่ภาคเหนือของประเทศไทยประกอบด้วย 148 96 ดี
μผมกันชน การสกัดโปรตีน ต่อไปส่วนผสม
บ่มเป็นเวลา 10 นาที ที่อุณหภูมิห้อง และ acetylthiocholine
ไอโอไดด์ ( ความเข้มข้นสุดท้าย 1 มม. ) และ 55 ’ - dithiobis ( 2-nitrobenzoic
acid ) ( ความเข้มข้นสุดท้าย 0.4 มม. ) มีการเพิ่ม การควบคุมคือ
ถือว่าเพิ่มอะซีโตน โดยไม่มีสารเคมีอื่น ๆ เอนไซม์
กิจกรรมวัด 30 นาทีที่ 1 นาทีช่วงเวลาที่ 405 nm และ RT .
ยับยั้งอัตราการคํานวณค่าต่อการควบคุม
โดยใช้สูตรต่อไปนี้ :