2. Materials and Methods A group of

2. Materials and Methods
A group of 30 healthy larvae of G. mellonella of approximately similar size was selected for each
treatment. Aspergillus strains (Table 1) were revived from silica gel preservation by growth on Aspergillus
complete agar medium [22] at 30 ºC. Inocula were prepared by harvesting the spores in saline Tween 80 and
the spore number was adjusted. Each larva was injected with 10
5
spores directly into the haemocoel through
the last pro-leg [23]. The spores of highly virulent strains were also injected after heating at 70 ºC for 45 min
(heat-killed spores). The number of colony forming units (CFU) was determined by plating out the known
dilution of spore suspension in triplicate. Inoculated larvae were incubated at 37 ºC in Petri dish. One group of
unmanipulated larvae and the other injected with 10 μl saline Tween 80 only were also incubated as controls.
Larvae were scored daily for their survival up to 168 h post-inoculation. Survival probabilities for larvae were
plotted by Kaplan-Meier method [23] and statistically analysed by Logrank test [24].

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2. วัสดุและวิธีการ เลือกสำหรับแต่ละกลุ่มของตัวอ่อนเพื่อสุขภาพ 30 ของ mellonella กรัมประมาณขนาดใกล้เคียงกัน การรักษา สายพันธุ์ aspergillus (ตารางที่ 1) ได้ฟื้นฟูจากซิลิก้าเจลรักษา โดยเติบโตบน Aspergillus สมบูรณ์ปานกลาง agar [22] ที่ 30 ºC Inocula ถูกจัดทำ โดยเก็บเกี่ยวเพาะเฟิร์นใน saline Tween 80 และ จำนวนสปอร์มีการปรับปรุง หนอนแต่ละถูกฉีด ด้วย 105 เพาะเฟิร์นลง haemocoel ผ่าน ตัวสุดท้ายขาสนับสนุน [23] เพาะเฟิร์นของสายพันธุ์สูง virulent ยังถูกฉีดหลังจากความร้อนที่ 70 ºC สำหรับ 45 นาที (ร้อนตายเพาะเฟิร์น) จำนวนโคโลนี (CFU) หน่วยขึ้นรูปถูกกำหนด โดยชุบออกรู้จักกัน การเจือจางการระงับสปอร์ใน triplicate ตัวอ่อน inoculated มี incubated ที่ 37 ºC ในจานเพาะเชื้อ กลุ่มหนึ่ง ตัวอ่อน unmanipulated และอื่น ๆ ที่ฉีด ด้วยน้ำเกลือ μl 10 Tween 80 เท่านั้นยัง incubated เป็นตัวควบคุม ตัวอ่อนมีคะแนนทุกวันเพื่อความอยู่รอดของพวกเขาขึ้นไป 168 h inoculation หลัง กิจกรรมการอยู่รอดในตัวอ่อนได้ พล็อต โดยมุนเช่น Kaplan วิธี [23] และ analysed ทางสถิติ โดยทดสอบ Logrank [24]

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2. วัสดุและวิธีการ
กลุ่ม 30 ตัวอ่อนที่ดีต่อสุขภาพของ G. mellonella ขนาดใกล้เคียงกันประมาณได้รับเลือกสำหรับแต่ละ
การรักษา สายพันธุ์ Aspergillus (ตารางที่ 1) ได้รับการฟื้นขึ้นมาจากซิลิกาเจลโดยการเก็บรักษาการเจริญเติบโตของเชื้อรา Aspergillus ใน
กลางวุ้นสมบูรณ์ [22] วันที่ 30 องศาเซลเซียส Inocula ถูกจัดทำขึ้นโดยการเก็บเกี่ยวสปอร์ในน้ำเกลือ Tween 80 และ
จำนวนสปอร์มีการปรับ ตัวอ่อนแต่ละคนได้ฉีดด้วย 10
5
สปอร์โดยตรงใน haemocoel ผ่าน
ขาโปรที่ผ่านมา [23] สปอร์ของสายพันธุ์รุนแรงสูงฉีดหลังจากความร้อนที่อุณหภูมิ 70 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 45 นาที
(สปอร์ความร้อนฆ่าตาย) จำนวนโคโลนีหน่วย (CFU) ถูกกำหนดโดยชุบออกที่รู้จักกันใน
การลดสัดส่วนของสปอร์แขวนลอยในเพิ่มขึ้นสามเท่า ตัวอ่อนของเชื้อไปบ่มที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียสในจานเลี้ยงเชื้อ หนึ่งในกลุ่มของ
ตัวอ่อน unmanipulated และอื่น ๆ ที่ฉีดด้วย 10 ไมโครลิตร 80 Tween น้ำเกลือเป็นเพียงบ่มยังเป็นตัวควบคุม.
ตัวอ่อนถูกยิงในชีวิตประจำวันเพื่อความอยู่รอดของพวกเขาได้ถึง 168 ชั่วโมงหลังการฉีดวัคซีน น่าจะอยู่รอดสำหรับตัวอ่อนได้รับการ
วางแผนโดย Kaplan-Meier method [23] และวิเคราะห์ทางสถิติโดยการทดสอบ Logrank [24]

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2 . วัสดุและวิธีการ : กลุ่ม 30 ตัวอ่อนมีสุขภาพดี . mellonella ประมาณขนาดเดียวกันได้รับเลือกสำหรับการรักษาแต่ละครั้ง

สายพันธุ์ Aspergillus ( ตารางที่ 1 ) ได้รับจากการรักษาของซิลิกาเจล โดย Aspergillus
[ 22 ] ที่สมบูรณ์ปานกลาง วุ้น 30 º C inocula เตรียมการเก็บสปอร์ในน้ำเกลือ Tween 80 และ
สปอร์ได้ปรับแต่ละตัวถูกฉีดด้วย 10
5
สปอร์โดยตรงในฮีโมซีลผ่าน
สุดท้ายโปรขา [ 23 ] สปอร์ของเชื้อรุนแรงมาก ยังฉีดหลังจากความร้อนที่ 70 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 45 นาทีº
( ความร้อนฆ่าสปอร์ ) จํานวนหน่วยสร้างอาณานิคม ( CFU ) ถูกกำหนดโดยชุบออกรู้จัก
2 ช่วงล่างสปอร์ทั้งสามใบ หนอนเป็นเชื้อบ่มที่ 37 º C ในจานเพาะเชื้อหนึ่งในกลุ่ม
unmanipulated ตัวอ่อนและอื่น ๆฉีด 10 μ L ( Tween 80 เท่านั้นก็บ่มเป็นตัวควบคุม
~ i ) ได้ทุกวัน เพื่ออยู่รอดของพวกเขาถึง 168 ชั่วโมงหลังการฉีดวัคซีน การอยู่รอดความน่าจะเป็น ~ i )
วางแผนโดย Kaplan Meier วิธี [ 23 ] และวิเคราะห์ทางสถิติ โดยการทดสอบที่ 1 [ 24 ]