total RNA extracted from DV, DA, AA

total RNA extracted from DV, DA, AA and BM were subjected to northern blotting analysis. Similarly, to investigate whether transcription of DVHRF was developmentally regulated, total RNA of immature ticks (larvae and nymph) were also subjected to northern blotting analysis. Samples (3–7.5 lg total RNA per lane) treatment, electrophoresis and transfer to Hybond N + membranes were done as described in Northern-Max protocol (Ambion, Austin, TX). Following transfer, processing of the
RNA blots was done as previously described (Mulenga et al. 2003b). The
membranes were washed to a final stringency of 0.1· SSC plus 0.1 % SDS
at 65 C twice for 15 min each and subsequently exposed to an X-ray film
for 40 min at 80 C.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

อาร์เอ็นเอรวมสกัดจาก DV, DA, AA และ BM ถูกต้องเหนือ blotting วิธีวิเคราะห์ ในทำนองเดียวกัน การตรวจสอบว่า transcription ของ DVHRF เป็น developmentally ควบคุม รวม อาร์เอ็นเอเครื่องหมายขีด immature (ตัวอ่อนและนาง) ถูกยังต้องเหนือ blotting วิธีวิเคราะห์ รักษาตัวอย่าง (3 – 7.5 lg รวมอาร์เอ็นเอต่อเลน) electrophoresis และโอนย้ายไปที่ Hybond N + เข้าได้ทำตามที่อธิบายไว้ในโพรโทคอลสูงสุดเหนือ (Ambion, Austin, TX) โอนย้ายต่อไปนี้ การประมวลผลเสร็จกันบล็อทอาร์เอ็นเอเป็นอธิบายไว้ก่อนหน้านี้ (Mulenga et al. 2003b) ที่เยื่อหุ้มถูกล้างไป stringency final ของ 0.1· SSC บวก 0.1% SDSที่ C 65 ครั้งใน 15 นาที และมาสัมผัสกับการเอ็กซ์เรย์ filmใน 40 นาทีที่ 80 c

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

อาร์เอ็นเอรวมสกัดจาก DV, DA, AA และ BM ถูกยัดเยียดให้การวิเคราะห์ซับภาคเหนือ ในทำนองเดียวกันในการตรวจสอบว่าการถอดความจาก DVHRF ถูกควบคุมการพัฒนา, RNA รวมของเห็บที่ยังไม่บรรลุนิติภาวะ (ตัวอ่อนและผี) ถูกยัดเยียดยังวิเคราะห์ซับภาคเหนือ ตัวอย่าง (3-7.5 จีอาร์เอ็นเอรวมต่อเลน) การรักษา electrophoresis และโอนไปยัง Hybond N + เมมเบรนได้ทำตามที่อธิบายไว้ในโปรโตคอลภาคเหนือ-Max (Ambion, ออสติน, เท็กซัส) ต่อไปนี้การถ่ายโอนการประมวลผลของ
blots อาร์เอ็นเอที่ได้กระทำตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ (Mulenga et al. 2003b)
เยื่อถูกล้างไปเข้มงวดสาย NAL 0.1 · SSC บวก 0.1% SDS
ที่ 65? C ละสองครั้งเป็นเวลา 15 นาทีในแต่ละครั้งและสัมผัสต่อมาสาย X-ray LM
40 นาทีที่? 80? C

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

อาร์เอ็นเอทั้งหมดสกัดจาก DV , ดา , AA และ BM ถูกทางตอนเหนือของวิธีวิเคราะห์ ในทำนองเดียวกัน เพื่อตรวจสอบว่า การถอดความของ dvhrf คือได้รับการควบคุมอาร์เอ็นเอทั้งหมดของเด็ก ๆ ( ตัวอ่อนและตัวอ่อน ) นอกจากนี้ยังต้องของวิธีวิเคราะห์ ตัวอย่าง ( 1 ) 7.5 LG รวม RNA ต่อเลน ) การรักษาวิธีโอน hybond N เยื่อ ทำไปตามที่อธิบายไว้ในภาคเหนือของแม็กซ์ โปรโตคอล ( ambion , ออสติน , เท็กซัส ) ต่อไปนี้การโอน , การประมวลผลของ
rna กีดกันกระทำตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ ( mulenga et al . 2003b )
+ ถูกล้างไป นาล จึง stringency 0.1 ด้วย SSC บวก 0.1% SDS
65  องศาเซลเซียส 15 นาทีในแต่ละครั้งและต่อมาถูกเอ็กซเรย์จึง LM
สำหรับ 40 นาทีที่  80  C