Cell cycle analysis. Cells were rin

Cell cycle analysis. Cells were rinsed briefly with calcium- and magnesium-free phosphate-buffered saline (PBS) and detached from cell culture flasks with trypsin at 37˚C. The cells were washed twice with PBS 1×106cells were resuspended in 1.0 ml of ice-cold VindeLov solution containing 0.1% Triton X-100, 0.1% citrate buffer 0.1 mg/ml RNase and 50 μg/ml propidium iodide (Sigma Chemical Co.). After 15 min incubation, DNA content was measured by flow cytometry using a FACSCalibur flow cytometer (Becton Dickinson, Mountain View, CA, USA). The relative proportions of cells with diploid DNA content G0-G1(2n), S phase (>2n but

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

การวิเคราะห์วงจร เซลล์ล้างสั้น ๆ กับเกลือฟอสเฟตบัฟเฟอร์ฟรีแคลเซียม และแมกนีเซียม (PBS) และแยกออกจากขวดวัฒนธรรมเซลล์กับทริปซินที่ 37˚C เซลล์ถูกล้าง ด้วย PBS สอง 1 × 106cells ได้ resuspended ใน 1.0 ml ของเย็น VindeLov โซลูชันที่ประกอบด้วย 0.1% Triton X-100, 0.1% ซิเตรตบัฟเฟอร์ 0.1 mg/ml RNase และไอโอไดด์ 50 ไมโครกรัม/มล. propidium (Sigma บริษัทเคมี) หลังจากบ่ม 15 นาที มีวัดเนื้อหาดีเอ็นเอ โดยการตรวจวิเคราะห์เซลล์ไหลใช้ cytometer การไหล FACSCalibur (Becton ดิกคินสัน วิวภูเขา CA สหรัฐอเมริกา) สัดส่วนสัมพัทธ์ของเซลล์ที่มี DNA เนื้อหาพฤติกรรมมัก G0-G1(2n) เฟส S (> 2n แต่ < 4n), และระยะ G2/M (4n) ได้รับมา และวิเคราะห์โดยใช้ CellQuest และ WinMDI 2.9 ซอฟต์แวร์ ตามลำดับ เปอร์เซ็นต์ของประชากรเซลล์ที่ระยะเฉพาะที่ประมาณการกับซอฟต์แวร์วิเคราะห์ EXPO32 V1.2 (Beckman Coulter, Inc. ระบายอ CA, USA) การ dissociation เซลล์ไม่มีผลต่อสารเรืองแสงภายใต้เงื่อนไขการทดลองที่ใช้ในการศึกษานี้

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

การวิเคราะห์วงจรมือถือ เซลล์ที่ถูกล้างในเวลาสั้น ๆ กับ calcium- และแมกนีเซียมฟรีน้ำเกลือฟอสเฟตบัฟเฟอร์ (พีบีเอส) และถอดออกจากขวดเพาะเลี้ยงเซลล์ที่มี trypsin ที่ 37C เซลล์ที่ถูกล้างครั้งที่สองกับพีบีเอส 1 × 106cells ถูก resuspended ใน 1.0 มล. ของการแก้ปัญหา VindeLov เย็นที่มี 0.1% Triton X-100 0.1% บัฟเฟอร์ซิเตรต 0.1 mg / ml RNase และ 50 ไมโครกรัม / มิลลิลิตร propidium ไอโอไดด์ (Sigma เคมี จำกัด ) หลังจาก 15 นาทีบ่มปริมาณดีเอ็นเอโดยวัดจากการไหลของภูมิคุ้มกันโดยใช้การไหล cytometer FACSCalibur (Becton Dickinson Mountain View, CA, USA) สัดส่วนที่สัมพันธ์กันของเซลล์ที่มีปริมาณดีเอ็นเอซ้ำ G0-G1 (2n), S เฟส (> 2n แต่ <4n) และระยะ G2 / M (4n) ที่ได้มาวิเคราะห์และใช้ CellQuest และ WinMDI 2.9, ซอฟแวร์ตามลำดับ ร้อยละของประชากรเซลล์ที่ขั้นตอนโดยเฉพาะอย่างยิ่งเป็นที่คาดกันกับซอฟต์แวร์ EXPO32 V1.2 วิเคราะห์ (Beckman Coulter, Inc เบรีย, CA, USA) ขั้นตอนการแยกตัวออกมือถือไม่ได้ส่งผลกระทบต่อการเรืองแสงภายใต้เงื่อนไขการทดลองที่ถูกนำมาใช้ในการศึกษานี้