Tissue-specific distributions were

Tissue-specific distributions were carried out in a Light-
Cycler Real-time PCR detection system (Roche, USA).
For this purpose, the aforementioned tissues were taken
from three fish (n ¼3 biological replicates) and pooled.
First strand cDNA was synthesized from DNAseI treated
RNA (5 µg) using Revert Aid reverse transcriptase First
Strand cDNA Synthesis kit (Thermo Scientific, USA) as
per the manufacturer’s instructions. The 25-µL reaction
mix volume was prepared containing 12.5 µl of Maxima
SYBR Green qPCR master mix (Thermo Scientific,
USA), 0.5 µL of (10 pM) each gene-specific primer,
and 2 µL (20 ng) of cDNA. The default thermal profile
was used for PCR amplification and it consisted of an
initial denaturation at 95°C-10 min, followed by
40 cycles of denaturation at 95°C/15 sec and annealing
and extension at 60°C/1 min. Among three

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

การกระจายของเนื้อเยื่อเฉพาะดำเนินการในแสง-Cycler แบบ Real-time PCR ตรวจหาระบบ (โรช สหรัฐอเมริกา) สำหรับวัตถุประสงค์นี้ ถ่ายเนื้อเยื่อดังกล่าว จากสามปลา (n ¼3 ชีวภาพ replicates) และรวมกัน แรก cDNA สแตรนด์ถูกสังเคราะห์จาก DNAseI ถือ อาร์เอ็นเอ (5 µg) ใช้ช่วยกลับปเทครั้งแรก สแตรนชุดสังเคราะห์ cDNA (เทอร์โมวิทยาศาสตร์ สหรัฐอเมริกา) เป็น ต่อคำแนะนำของผู้ผลิต ปฏิกิริยา 25 µL ผสมเสียงจัดทำที่มี 12.5 µl ของ Maxima หลัก qPCR SYBR Green ผสม (เทอร์โมวิทยาศาสตร์ สหรัฐอเมริกา), 0.5 µL ของ (10 pM) แต่ละยีนเฉพาะสีรองพื้น และ 2 µL (20 ฉบับ) ของ cDNA ระบายความร้อนโปรไฟล์เริ่มต้น ใช้สำหรับ PCR ขยายและประกอบด้วยการ เริ่มแปรสภาพที่ 95° C - 10 นาที ตามด้วย รอบ 40 ของการแปรสภาพที่ 95° C/15 วินาทีและการหลอม และนามสกุลที่ 60° C/1 นาที หนึ่งในสาม

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

กระจายเนื้อเยื่อเฉพาะได้ดำเนินการในแสง
Cycler แบบ Real-time PCR ระบบตรวจจับ (Roche, สหรัฐอเมริกา).
เพื่อจุดประสงค์นี้เนื้อเยื่อดังกล่าวถูกนำมา
จากสามปลา (n ¼3ซ้ำชีวภาพ) และรวบรวม.
cDNA Strand แรกถูกสังเคราะห์ จากการได้รับการรักษา DNAseI
อาร์เอ็นเอ (5 ไมโครกรัม) โดยใช้เปลี่ยนกลับช่วยเหลือ reverse transcriptase แรก
Strand ยีนสังเคราะห์ Kit (Thermo Scientific, สหรัฐอเมริกา) เป็น
ตามคำแนะนำของผู้ผลิต 25 ไมโครลิตรปฏิกิริยา
ปริมาณผสมถูกจัดทำขึ้นมี 12.5 ไมโครลิตรของ Maxima
ผสมต้นแบบสีเขียว SYBR qPCR (Thermo Scientific,
USA), 0.5 ไมโครลิตรของ (10:00) แต่ละไพรเมอร์ยีนเฉพาะ
และ 2 ไมโครลิตร (20 NG) ของยีน รายละเอียดการระบายความร้อนเริ่มต้น
ที่ใช้สำหรับการขยาย PCR และมันประกอบไปด้วย
denaturation เริ่มต้นที่ 95 ° C-10 นาทีตามด้วย
40 รอบของการสูญเสียสภาพธรรมชาติที่ 95 ° C / 15 วินาทีและการอบ
และการขยายที่ 60 ° C / 1 นาที ในบรรดาสาม