acidified to pH 4.0 by adding 12 N HCl. For low-salinity stress, the bacterial cells were collected by centrifugation, washed, and resuspended in 50 ml of 0.2% NaCl (26). After shifting to different stress conditions, the numbers of surviving
cells were determined at various intervals by the dilution plate count method. Decimal dilutions were prepared in 0.1% peptone–3% NaCl, and the diluted cultures were plated on tryptic soy agar–3% NaCl and incubated at 37°C overnight.
Triplicate determinations were performed for each dilution. Finally, the D values (the time required to cause a 90% reduction in the count of viable cells) for 50°C, pH 4, and low salinity were calculated by the curve-fit function of Slide
Write Plus software, version 1.10 (Advanced Graphic Software, Inc., Carlsbad, Calif.). The percent survival was also determined for each strain at 4°C for 6 days when a significant decrease of survivors was observed.
Statistical analysis. The size of each band resolved in PFGE was determined by Stratascan 7000 densitometry with one-dimensional analysis software (Stratagene,La Jolla, Calif.). Data were coded as 0 (negative) or 1 (positive). Hierarchical
cluster analysis was performed using the average linkage method with the squared Euclidean distance measure (15). The dendrogram was produced with the SPSS for Windows Release 6.0 program (SPSS, Inc., Chicago, Ill.). The
susceptibilities to environmental stresses for different categories of V. parahaemolyticus strains were examined by analysis of variance with Duncan’s multiple range test at P , 0.05.
กรดค่าพีเอช 4.0 โดยการเพิ่ม 12 N HCl สำหรับความเครียดความเค็มต่ำเซลล์แบคทีเรียได้จากการปั่นล้างและ resuspended ใน 50 มล 0.2% โซเดียมคลอไรด์ (26) หลังจากที่ขยับไปเงื่อนไขของปัญหาที่แตกต่างกันจำนวนที่รอดตาย
เซลล์ได้รับการพิจารณาในช่วงเวลาต่างๆโดยการลดสัดส่วนจานวิธีการนับ เจือจางทศนิยมได้จัดทำขึ้น 0.1% เปปโตน-3% NaCl และวัฒนธรรมเจือจางถูกชุบในทริปซิถั่วเหลืองวุ้น 3% NaCl และบ่มที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียสในชั่วข้ามคืน.
หาความ Triplicate ได้ดำเนินการสำหรับแต่ละเจือจาง สุดท้ายค่า D (เวลาที่ต้องใช้ในการก่อให้เกิดการลดลง 90% ในการนับของเซลล์ที่ทำงานได้) สำหรับ 50 ° C ค่า pH 4 และความเค็มต่ำจะถูกคำนวณโดยฟังก์ชันโค้งพอดีสไลด์
เขียนพลัสซอฟต์แวร์เวอร์ชั่น 1.10 ( ซอฟท์แวกราฟฟิคขั้นสูง, Inc, คาร์ลส, Calif.) การอยู่รอดร้อยละยังถูกกำหนดสำหรับแต่ละสายพันธุ์ที่ 4 ° C เป็นเวลา 6 วันเมื่อมีการลดลงอย่างมีนัยสำคัญของผู้รอดชีวิตก็สังเกตเห็น.
การวิเคราะห์ทางสถิติ ขนาดของวงดนตรีแต่ละแก้ไขใน PFGE ถูกกำหนดโดย Stratascan 7000 densitometry กับหนึ่งมิติซอฟต์แวร์การวิเคราะห์ (Stratagene, La Jolla, Calif.) ข้อมูลที่ถูกเข้ารหัสเป็น 0 (ลบ) หรือ 1 (บวก) ลำดับชั้น
การวิเคราะห์กลุ่มได้ดำเนินการโดยใช้วิธีการเชื่อมโยงกับค่าเฉลี่ยของการวัดระยะทางแบบยุคลิดสแควร์ (15) dendrogram ถูกผลิตด้วยโปรแกรม SPSS for Windows โปรแกรมที่วางจำหน่าย 6.0 (SPSS, Inc, ชิคาโก, อิลลินอยส์.)
ไวต่อความเครียดสิ่งแวดล้อมสำหรับประเภทที่แตกต่างกันของ V. parahaemolyticus สายพันธุ์ที่ได้รับการตรวจสอบโดยการวิเคราะห์ความแปรปรวนกับการทดสอบช่วงหลายดันแคนที่ P, 0.05
การแปล กรุณารอสักครู่..

ปรับ pH 4.0 โดยการเพิ่ม 12 N HCl . ความเค็มต่ำความเครียด เซลล์แบคทีเรียมีจำนวน 3 , ล้าง , และ resuspended 50 ml ของ 0.2 % NaCl ( 26 ) หลังจากเปลี่ยนสภาวะความเครียดที่แตกต่างกันตัวเลขของการอยู่รอดเซลล์มีการกำหนดในช่วงเวลาต่าง ๆ โดยวิธี dilution plate นับ . วิธีการทศนิยมเป็นการเตรียม 0.1% เปปโตน– 3% NaCl เจือจางอยู่ในวัฒนธรรมและอาหารชุบวุ้นถั่วเหลือง– 3% NaCl บ่มที่ 37 ° C ในชั่วข้ามคืนทำสำเนาสามฉบับข้างต้นแสดงสำหรับแต่ละเจือจาง ในที่สุด , D ค่า ( เวลาที่ใช้ในการก่อให้เกิดการลดลง 90% นับได้เซลล์ ) 50 °องศาเซลเซียส , pH 4 และความเค็มต่ำได้โดยฟังก์ชั่นสไลด์โค้งพอดีเขียนและซอฟต์แวร์ , รุ่น 1.10 ( ขั้นสูงซอฟต์แวร์กราฟิกสำหรับคาร์ลสแบด รัฐแคลิฟอร์เนีย ) เปอร์เซ็นต์การอยู่รอดยังกำหนดให้แต่ละสายพันธุ์ที่ 4 ° C เป็นเวลา 6 วัน เมื่อพบผู้รอดชีวิตถูกสังเกตสถิติที่ใช้ในการวิเคราะห์ข้อมูล ขนาดของแต่ละวงได้รับการแก้ไขใน PFGE โดยการวัด stratascan 7000 densitometry กับซอฟต์แวร์การวิเคราะห์มิติ ( stratagene , La Jolla , เยอรมนี ) ข้อมูลรหัส 0 ( ลบ ) หรือ 1 ( บวก ) ลำดับชั้นการวิเคราะห์กลุ่ม มีการใช้วิธีการเชื่อมต่อกับกำลังสองเฉลี่ยการวัดระยะทางแบบยุคลิด ( 15 ) พันธุกรรม คือ ผลิต ด้วยโปรแกรมสำเร็จรูป SPSS for Windows Release 6.0 โปรแกรม SPSS , อิงค์ , ชิคาโก , ป่วย ) ที่ซึ่งจะเน้นด้านสิ่งแวดล้อมสำหรับประเภทที่แตกต่างกันของสายพันธุ์ tdh ตรวจสอบโดยการวิเคราะห์ความแปรปรวนด้วย Duncan " s Multiple Range Test ที่ระดับ 0.05
การแปล กรุณารอสักครู่..
