2. Materials and methods
2.1. Sample preparation
Pineapple Fruits (A. comosus) of the Smooth Cayenne variety were purchased from the local market. Fruits, in the range11.2–12.8◦ Brix, were manually peeled, cored and cut into half rings (slices) of 6.0 ± 0.5 mm thick and 115 ± 5 mm in diameter.Because there is a great variation in the nutrients contentbetween the base and the top of the fruit (Miller and Hall, 1953;Ramallo and Mascheroni, 2004), only the central zone of each
pineapple fruit was used in experiments.
2.2. Drying process
Drying experiments were performed in a convective cross flow pilot dryer at 45, 60 and 75 ◦C, by triplicate. Air velocity was fixed at 1.5 m/s. The pineapple slices were put in an aluminum basket avoiding the contact between fruit pieces. At pre-established times, three samples were removed (at random) from the dryer; in order to measure the color and determine moisture and ascorbic acid content. Moisture content was determined gravimetrically by oven drying at 75 ◦C until constant weight (48 h approximately).
2.3. l-Ascorbic acid determination
2.3.1. Extraction process
All analyses were carried out by duplicate on vegetable tissue. Each sample (7–9 g) was weighed and crushed in porcelain mortar for 5 min, with gradual addition of 50 mL of buffer solution (pH 2.5). Buffer solution used in this step is the same of mobile phase. This mixture was transferred to a dark flask, sonicated for 10 min and then filtered though filter paper.Portions of the extract (10 L) were injected into the HPLC chromatograph. All procedures were carried out carefully without much exposure to light.
2.3.2. Quantitative determination
l-Ascorbic acid was determined by high performance liquid chromatography (HPLC), in isocratic conditions with an Alltima C-18 column (250 mm×4.6 mm, 5 mm particle size). A
mobile phase of buffer (potassium phosphate 0.02 M, pH = 2.5 by phosphoric acid):acetonitrile (98:2, v/v) was used at a flow
rate of 1.0 mL/min. Detection of l-ascorbic acid was carried out
at = 254 nm. Identification and quantification were carried
out by comparison of the retention time and the peak area
of the sample with those of a standard reference. Standard
solution of l-ascorbic acid was prepared by diluting 100 mg
l-ascorbic acid (A-0278, Sigma) in 100 mL buffer; then this
solution was diluted (1/10, 1/50 and 1/100). The reference peak
area was obtained by injecting 10 L of solution with standard
concentration of 0.02 mg/mL (external standard procedure). During the assay, the reference chromatogram was done every 2 h.
2.3.3. l-Ascorbic acid variation in fresh fruit
Variation of l-ascorbic acid content in fresh fruit as a function of position from the bottom towards the top was studied.Fruits were peeled, cored and cut into slices of 13 ±1 mm thickness; these slices were classified according to the position (number 1 is the top); 8–9 slices of each fruit were obtained.The l-ascorbic acid content in each piece was evaluated. Thisexperiment was carried out by triplicate.
2. วัสดุและวิธีการ2.1. ตัวอย่างสับปะรดผลไม้ (A. comosus) หลากหลายเรียบป่นซื้อจากท้องตลาด ผลไม้ range11.2 – 12.8◦ Brix ด้วยตนเองปอกเปลือก cored และตัดเป็นครึ่งวงแหวน (ชิ้น) ของ 6.0 ± 0.5 mm หนา และ 115 ± 5 มม.เส้นผ่านศูนย์กลางเนื่องจากมีการเปลี่ยนแปลงที่ดีใน contentbetween สารอาหาร ฐานและด้านบนของผลไม้ (มิลเลอร์และฮอลล์ 1953Ramallo และ Mascheroni, 2004), เฉพาะพื้นที่ส่วนกลางของแต่ละสับปะรดผลไม้ถูกใช้ในการทดลอง2.2. กระบวนการอบแห้งทดลองอบแห้งได้ดำเนินการในการนำร่องด้วยการพาข้ามกระแสเป่าที่ 45, 60 และ 75 ◦C โดย triplicate ความเร็วอากาศที่คงที่ 1.5 m/s ใส่ชิ้นสับปะรดในตะกร้าอลูมิเนียมการหลีกเลี่ยงการสัมผัสระหว่างชิ้นผลไม้ ที่ก่อตั้งก่อนเวลา ตัวอย่างสามออก (สุ่ม) จากเครื่องเป่า วัดสี และกำหนดเนื้อหาของความชื้นและกรดแอสคอร์บิค ชื้นถูกตาม gravimetrically เตาอบแห้งจนน้ำหนักคงที่ที่ 75 ◦C (48 h ประมาณ)2.3 การกำหนดกรดแอสคอร์บิค l2.3.1 การแยกกระบวนการวิเคราะห์ทั้งหมดถูกดำเนิน โดยซ้ำบนเนื้อเยื่อผัก แต่ละตัวอย่าง (7-9 กรัม) น้ำหนัก และบดในครกเครื่องเคลือบดินเผาสำหรับ 5 นาที มี 50 mL ของบัฟเฟอร์ (pH 2.5) เพิ่มขึ้น โซลูชันการบัฟเฟอร์ที่ใช้ในขั้นตอนนี้จะเหมือนกับของเฟสเคลื่อนที่ ส่วนผสมนี้ถูกโอนย้ายไปหนาวมืด sonicated สำหรับ 10 นาทีแล้ว กระดาษกรองกรองแม้ว่าส่วนการดึงข้อมูล (10 L) ถูกฉีดเข้าไปใน HPLC chromatograph ขั้นตอนทั้งหมดได้ดำเนินการอย่างรอบคอบโดยไม่เปิดรับแสงมากแสง2.3.2 การกำหนดเชิงปริมาณกรดแอสคอร์บิค l กำหนด โดยหลอมเหลว chromatography (HPLC), ในเงื่อนไข isocratic คิดกับคอลัมน์ Alltima C-18 ตัว (250 มม. × 4.6 mm, 5 mm ขนาดอนุภาค) Aระยะเคลื่อนที่ของบัฟเฟอร์ (โพแทสเซียมฟอสเฟต 0.02 M, pH = 2.5 ด้วยกรดฟอสฟอริก): ใช้ acetonitrile (98:2, v/v) ในขั้นตอนการอัตรา 1.0 มิลลิลิตร/นาทีตรวจพบกรดแอสคอร์บิค l ถูกดำเนินการที่ = 254 nm ทำรหัสและนับออก โดยเปรียบเทียบเวลาเก็บข้อมูลและพื้นที่สูงสุดของตัวอย่างกับการอ้างอิงมาตรฐาน มาตรฐานของกรดแอสคอร์บิค l ถูกเตรียม โดย diluting 100 มิลลิกรัมกรดแอสคอร์บิค l (A-0278 ซิก) ในบัฟเฟอร์ 100 mL แล้วนี้โซลูชันที่ถูกทำให้เจือจาง (1/10, 1/50 และ 1/100) สูงสุดอ้างอิงตั้งกล่าว โดย injecting L 10 ของโซลูชันมาตรฐานความเข้มข้น 0.02 mg/mL (ขั้นตอนมาตรฐานภายนอก) ในระหว่างการทดสอบ chromatogram อ้างอิงถูกทำทุก h 22.3.3. l แอสคอร์บิคปรับกรดในผลไม้สดการเปลี่ยนแปลงของกรดแอสคอร์บิค l เนื้อหาในผลไม้เป็นฟังก์ชันของตำแหน่งจากด้านล่างสู่ด้านบนได้ศึกษาผลไม้ปอกเปลือก cored และตัดเป็นชิ้นความหนา 13 ±1 มม. ชิ้นนี้ถูกแบ่งตามตำแหน่ง (หมายเลข 1 คือ ด้านบน); 8 – 9 ชิ้นของผลไม้แต่ละได้รับมีประเมินเนื้อหากรดแอสคอร์บิค l ในแต่ละชิ้น Thisexperiment ถูกดำเนิน โดย triplicate
การแปล กรุณารอสักครู่..
![](//thimg.ilovetranslation.com/pic/loading_3.gif?v=b9814dd30c1d7c59_8619)
2. วัสดุและวิธีการ
2.1 การเตรียมสารตัวอย่าง
ผลไม้สับปะรด (A. comosus) ของความหลากหลาย Cayenne เรียบที่ซื้อมาจากตลาดในประเทศ ผลไม้ในrange11.2-12.8◦ Brix ถูกปอกเปลือกด้วยตนเอง cored และหั่นเป็นแหวนครึ่งหนึ่ง (ชิ้น) 6.0 ± 0.5 มมหนาและ 115 ± 5 มม diameter.Because มีการเปลี่ยนแปลงอย่างมากในสารอาหาร contentbetween ฐานและด้านบนของผลไม้ (มิลเลอร์และฮอลล์ 1953; Ramallo และ Mascheroni, 2004) เพียงเขตภาคกลางของแต่ละ
ผลสับปะรดที่ใช้ในการทดลอง.
2.2 กระบวนการอบแห้ง
ทดลองการอบแห้งได้ดำเนินการในการไหลเวียนข้ามเครื่องเป่านักบินที่ 45, 60 และ 75 ◦Cโดยเพิ่มขึ้นสามเท่า ความเร็วลมคงที่ 1.5 เมตร / วินาที ชิ้นสับปะรดวางอยู่ในตะกร้าอลูมิเนียมหลีกเลี่ยงการติดต่อระหว่างชิ้นผลไม้ ในช่วงเวลาก่อนขึ้นสามตัวอย่างที่ถูกถอดออก (ที่สุ่ม) จากเครื่องเป่า; เพื่อวัดสีและตรวจสอบความชื้นและปริมาณกรดแอสคอบิ ความชื้นถูกกำหนด gravimetrically โดยการอบแห้งเตาอบที่อุณหภูมิ 75 ◦Cจนน้ำหนักคงที่ (48 ชั่วโมงโดยประมาณ).
2.3 L-Ascorbic มุ่งมั่นกรด
2.3.1 กระบวนการสกัด
การวิเคราะห์ทั้งหมดถูกดำเนินการโดยที่ซ้ำกันในเนื้อเยื่อพืช แต่ละตัวอย่าง (7-9 กรัม) ได้รับการชั่งน้ำหนักและบดในครกพอร์ซเลนเป็นเวลา 5 นาทีด้วยนอกเหนือค่อยๆ 50 มิลลิลิตรสารละลายบัฟเฟอร์ (pH 2.5) สารละลายบัฟเฟอร์ใช้ในขั้นตอนนี้เป็นขั้นตอนเดียวกันของมือถือ ส่วนผสมนี้ถูกถ่ายโอนไปยังขวดมืด sonicated เป็นเวลา 10 นาทีแล้วกรองแม้ว่ากรอง paper.Portions ของสารสกัด (10? L) ได้รับการฉีดเข้าไปใน Chromatograph HPLC ขั้นตอนทั้งหมดถูกดำเนินการอย่างรอบคอบโดยไม่ต้องสัมผัสกับแสงมาก.
2.3.2 การกำหนดปริมาณ
L-ascorbic acid ถูกกำหนดโดยประสิทธิภาพสูงของเหลว chromatography (HPLC) ในสภาพ Isocratic กับ Alltima C-18 คอลัมน์ (250 มิลลิเมตร× 4.6 มิลลิเมตร, 5 มมขนาดอนุภาค)
เฟสเคลื่อนที่ของบัฟเฟอร์ (ฟอสเฟตโพแทสเซียม 0.02 M, ค่า pH = 2.5 ด้วยกรดฟอสฟ): acetonitrile (98: 2, v / v) ถูกนำมาใช้ในการไหล
อัตรา 1.0 มิลลิลิตร / นาที การตรวจสอบของ L-ascorbic acid ได้รับการดำเนินการ
ที่? = 254 นาโนเมตร การจำแนกชนิดและปริมาณที่ถูกดำเนิน
การโดยการเปรียบเทียบเวลาการเก็บรักษาและบริเวณจุดสูงสุด
ของกลุ่มตัวอย่างที่มีผู้อ้างอิงมาตรฐาน มาตรฐาน
การแก้ปัญหาของ L-ascorbic acid เตรียมโดยเจือจาง 100 mg
L-ascorbic acid (A-0278, Sigma) ใน 100 มิลลิลิตรบัฟเฟอร์; แล้วนี้
การแก้ปัญหาถูกเจือจาง (1/10, 1/50 และ 1/100) ยอดการอ้างอิง
ในพื้นที่ที่ได้รับโดยการฉีด 10? L ของการแก้ปัญหาที่มีมาตรฐาน
ความเข้มข้นของ 0.02 mg / ml (ขั้นตอนมาตรฐานภายนอก) ในระหว่างการทดสอบ, chromatogram อ้างอิงได้ทำทุก 2 ชั่วโมง.
2.3.3 L-Ascorbic เปลี่ยนแปลงกรดผลไม้สดใน
รูปแบบที่หลากหลายของเนื้อหา L-ascorbic acid ในผลไม้สดเป็นหน้าที่ของตำแหน่งจากด้านล่างไปทางด้านบนถูก studied.Fruits ถูกปอกเปลือกคว้านเมล็ดและหั่นเป็นชิ้นหนา 13 ± 1 มม ชิ้นเหล่านี้ถูกจัดตามตำแหน่ง (จำนวน 1 อยู่ด้านบน); 8-9 ชิ้นของผลไม้แต่ละ obtained.The มีเนื้อหา L-ascorbic acid ในแต่ละชิ้นถูกประเมิน Thisexperiment ได้ดำเนินการโดยเพิ่มขึ้นสามเท่า
การแปล กรุณารอสักครู่..
![](//thimg.ilovetranslation.com/pic/loading_3.gif?v=b9814dd30c1d7c59_8619)
2 . วัสดุและวิธีการ
2.1 . ตัวอย่างการเตรียม
สับปะรดผลไม้ ( อ. 1 ) ของความหลากหลาย Cayenne เรียบ ซื้อมาจากตลาดในประเทศ ผลไม้ใน range11.2 – 12 ◦ Brix , ตนเองปอกเปลือก , cored และหั่นครึ่งวง ( 6 ชิ้น ) ± 0.5 มม. หนาและ 115 ± 5 มม.เนื่องจากมีการเปลี่ยนแปลงมากในรัง นฐานและด้านบนของผลไม้ ( มิลเลอร์และฮอลล์ 2496 ; ramallo และ mascheroni , 2004 ) เฉพาะพื้นที่ส่วนกลางของแต่ละ
สับปะรดผลไม้ที่ใช้ในการทดลอง
2.2 . การทดลองอบแห้ง
ได้ในอัตราการไหลโดยนักบินเครื่องเป่าที่ 45 , 60 และ 75 ◦ C โดยทำสำเนาสามฉบับ . ความเร็วลมอยู่ที่ 1.5 M / Sสับปะรดชิ้นวางอยู่ในตะกร้าอลูมิเนียมและหลีกเลี่ยงการติดต่อระหว่างชิ้นผลไม้ ก่อนก่อตั้งครั้ง สามตัวอย่างถูกเอาออก ( สุ่ม ) จากเครื่องเป่า เพื่อวัดสีและการตรวจสอบความชื้น และปริมาณวิตามินซี . ความชื้น ตั้งใจ gravimetrically โดยตู้อบลมร้อนที่ 75 ◦ C จนน้ำหนักคงที่ ( 48 ชม. โดยประมาณ ) .
2.3L-Ascorbic Acid ปริมาณ
2.3.1 . กระบวนการวิเคราะห์ข้อมูล
ทั้งหมดดำเนินการโดยซ้ำบนเนื้อเยื่อพืช แต่ละตัวอย่าง ( 7 – 9 g ) หนักและบด ในเครื่องลายครามปูน 5 นาทียังค่อยเป็นค่อยไปของ 50 มิลลิลิตร สารละลายบัฟเฟอร์ pH 2.5 ) สารละลายบัฟเฟอร์ที่ใช้ในขั้นตอนนี้เป็นเดียวกันของเฟสเคลื่อนที่ . ส่วนผสมนี้ถูกโอนไปยังขวดแก้วเข้มsonicated 10 นาที แล้วกรองแต่กระดาษกรอง ส่วนสารสกัด ( 10 L ) ถูกฉีดเข้าไปใน HPLC โครมาโตกราฟ . ขั้นตอนทั้งหมด ได้ดำเนินการอย่างรอบคอบ โดยเปิดรับแสงมากแสง .
2.3.2 . การหาปริมาณ
L-Ascorbic Acid ถูกกำหนดโดยวิธีโครมาโทกราฟีของเหลวสมรรถนะสูง ( HPLC ) ในเงื่อนไข Isocratic กับ alltima - คอลัมน์ ( 250 มม. × 4.5 มม.อนุภาคขนาด 5 มิลลิเมตร ) a
เฟสเคลื่อนที่ของบัฟเฟอร์ ( โพแทสเซียมฟอสเฟต 0.02 M pH = 2.5 โดยกรดฟอสฟอริก ) : ไน ( 98:2 , V / V ) คือ ใช้ในอัตราการไหล
1.0 มล. / นาที การตรวจหา L-Ascorbic Acid ครั้งนี้
ที่ = 254 นาโนเมตร การจำแนกชนิดและปริมาณอะมิโน
โดยเปรียบเทียบในเวลาและพื้นที่สูงสุด
ของตัวอย่างกับผู้ที่อ้างอิงมาตรฐาน มาตรฐาน
โซลูชั่นของ L-Ascorbic Acid เตรียมโดยละลาย 100 mg L-Ascorbic Acid (
a-0278 , Sigma ) 100 มิลลิลิตร บัฟเฟอร์ แล้ว โซลูชั่นนี้
เจือจาง ( 1 / 10 1 / 50 หรือ 1 / 100 ) การอ้างอิงสูงสุด
พื้นที่ได้โดยการฉีดสารละลายที่มีความเข้มข้น 10 ลิตรมาตรฐาน
0.02 mg / ml ( ภายนอกขั้นตอนมาตรฐาน ) ในระหว่างการตรวจสอบการอ้างอิงโครมาาทุก 2 H .
2.3.3 .L-Ascorbic Acid ความผันแปรในการแปรผล
สดของกรดในผลไม้สดโมเลกุลเกาะติดของโฮสต์ที่เป็นฟังก์ชันของตำแหน่งจากด้านล่างสู่ด้านบนได้ศึกษาผล ปอกเปลือก , cored และหั่นเป็นชิ้นหนา 1 มม. 13 ± ชิ้นเหล่านี้ จำแนกตามตำแหน่ง ( หมายเลข 1 คือด้านบน ) ; 8 – 9 ชิ้นของผลไม้แต่ละที่ได้รับ
การแปล กรุณารอสักครู่..
![](//thimg.ilovetranslation.com/pic/loading_3.gif?v=b9814dd30c1d7c59_8619)