A process for the primary recovery

A process for the primary recovery of B-phycoerythrin from Porphyridium cruentum exploiting aqueous two-phase systems (ATPS) was developed in order to reduce the number of unit operations and benefit from an increased yield of the protein product. The evaluation of system parameters such as poly(ethylene glycol) (PEG) molecular mass, concentration of PEG as well as salt, system pH and volume ratio was carried out to determine under which conditions the B-phycoerythrin and contaminants concentrate to opposite phases. PEG 1450-phosphate ATPS proved to be suitable for the recovery of B-phycoerythrin because the target protein concentrated to the top phase whilst the protein contaminants and cell debris concentrated in the bottom phase. An extraction ATPS stage comprising volume ratio (Vr) equal to 1.0, PEG 1450 24.9% (w/w), phosphate 12.6% (w/w) and system pH of 8.0 allowed B-phycoerythrin recovery with a purity of 2.9 (estimated as the relation of the 545–280 nm absorbances). The use of ATPS resulted in a primary recovery process that produced a protein purity of 2.9±0.2 and an overall product yield of 77.0% (w/w). The results reported demonstrated the practical implementation of ATPS for the design of a primary recovery process as a first step for the commercial purification of B-phycoerythrin produced by P. cruentum.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

กระบวนการกู้คืนข้อมูลหลักของ B-phycoerythrin จาก Porphyridium cruentum exploiting อควี two-phase ระบบ (ATPS) ได้รับการพัฒนาเพื่อลดจำนวนของการดำเนินงานของหน่วย และได้รับประโยชน์จากผลผลิตเพิ่มขึ้นของผลิตภัณฑ์โปรตีน การประเมินของพารามิเตอร์ของระบบเช่น poly(ethylene glycol) (PEG) มวลโมเลกุล ความเข้มข้นของ PEG เป็นเกลือ อัตราค่า pH และปริมาตรของระบบถูกดำเนินกำหนดภายใต้เงื่อนไขที่ B-phycoerythrin และสารปนเปื้อนเข้มข้นเพื่อข้ามขั้นตอน ตรึงฟอสเฟต 1450 ATPS พิสูจน์ให้เหมาะสมกับการฟื้นตัวของ B-phycoerythrin เนื่องจากเข้มข้นโปรตีนเป้าหมายระยะด้านบนในขณะที่โปรตีนสารปนเปื้อนและเศษเซลล์เข้มข้นในระยะด้านล่าง การสกัด ATPS ขั้นตอนประกอบด้วยปริมาตรอัตราส่วน (Vr) เท่ากับ 1.0, PEG 1450 24.9% (w/w), ฟอสเฟต 12.6% (w/w) และ pH 8.0 ระบบได้กู้คืน B phycoerythrin มีความบริสุทธิ์ (ประเมินตามความสัมพันธ์ของ absorbances nm 545 – 280) 2.9 ผลการใช้ ATPS ในกระบวนการกู้คืนหลักที่ผลิตความบริสุทธิ์โปรตีน 2.9±0.2 และมีผลผลิตผลิตภัณฑ์โดยรวมของ 77.0% (w/w) ผลการรายงานแสดงนำปฏิบัติของ ATPS สำหรับการออกแบบของกระบวนการกู้คืนหลักเป็นขั้นตอนแรกสำหรับฟอกค้าของ B-phycoerythrin ผลิต โดย P. cruentum

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

กระบวนการในการกู้คืนหลักของ B-phycoerythrin จาก Porphyridium cruentum การใช้ประโยชน์จากระบบสารละลายน้ำสองเฟส (Atps) ได้รับการพัฒนาเพื่อที่จะลดจำนวนของหน่วยปฏิบัติการและได้รับประโยชน์จากผลตอบแทนที่เพิ่มขึ้นของผลิตภัณฑ์โปรตีน การประเมินผลของพารามิเตอร์ของระบบเช่นโพลี (เอทิลีนไกลคอล) (PEG) มวลโมเลกุลความเข้มข้นของ PEG เช่นเดียวกับเกลือค่า pH ของระบบและอัตราส่วนปริมาณได้ดำเนินการเพื่อตรวจสอบภายใต้เงื่อนไขที่ B-phycoerythrin และสารปนเปื้อนที่จะมีสมาธิขั้นตอนตรงข้าม PEG Atps 1450 ฟอสเฟตพิสูจน์ให้เห็นว่ามีความเหมาะสมกับการฟื้นตัวของ B-phycoerythrin เพราะโปรตีนเป้าหมายเข้มข้นถึงขั้นตอนด้านบนในขณะที่โปรตีนและสารปนเปื้อนเศษเซลล์เข้มข้นในขั้นตอนด้านล่าง สกัดเวทีประกอบด้วยอัตราส่วน Atps (VR) เท่ากับ 1.0, PEG 1450 24.9% (w / W), ฟอสเฟต 12.6% (w / W) และระบบการวัดค่า pH 8.0 ได้รับอนุญาตการกู้คืน B-phycoerythrin ที่มีความบริสุทธิ์ 2.9 (ประมาณเป็น ความสัมพันธ์ของ 545-280 นาโนเมตร absorbances) ใช้ Atps ผลในกระบวนการกู้คืนหลักที่ผลิตมีความบริสุทธิ์ของโปรตีน 2.9 ± 0.2 และผลผลิตโดยรวมของ 77.0% (w / W) รายงานผลการดำเนินงานที่แสดงให้เห็นถึงการปฏิบัติของ Atps สำหรับการออกแบบของกระบวนการกู้คืนหลักเป็นขั้นตอนแรกสำหรับการทำให้บริสุทธิ์ในเชิงพาณิชย์ของ B-phycoerythrin ผลิตโดย P. cruentum

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

กระบวนการในการกู้คืนจากการ b-phycoerythrin porphyridium ครูเอนทั่ม ใช้น้ำ 2 ระบบ ( atps ) ถูกพัฒนาขึ้นเพื่อลดจำนวนของหน่วยปฏิบัติการและได้รับประโยชน์จากผลผลิตที่เพิ่มขึ้นของผลิตภัณฑ์โปรตีน การประเมินค่าพารามิเตอร์ของระบบ เช่น พอลิเอธิลีนไกลคอล ( PEG ) มวลโมเลกุล และความเข้มข้นของตัว รวมทั้ง เกลือพีเอชและปริมาณอัตราส่วนของระบบมีวัตถุประสงค์เพื่อกำหนดภายใต้เงื่อนไขที่ b-phycoerythrin และสารปนเปื้อนมุ่งไปยังขั้นตอนที่ตรงข้าม ตรึง 1450 ฟอสเฟต atps พิสูจน์แล้วว่าเหมาะสำหรับการกู้คืนของ b-phycoerythrin เพราะโปรตีนเป้าหมายเข้มข้นขั้นตอนด้านบนในขณะที่โปรตีนสารปนเปื้อนและเศษเซลล์ความเข้มข้นในขั้นตอนด้านล่างการ atps การสกัดขั้นประกอบด้วยปริมาตร ( VR ) เท่ากับ 1.0 , PEG 1450 24.9 % ( w / w ) , ฟอสเฟต 12.6 % ( w / w ) และระบบพีเอช 8.0 อนุญาต b-phycoerythrin กับการกู้คืนความบริสุทธิ์ ( ประมาณ 2.9 ขณะที่ความสัมพันธ์ของ 545 – 280 nm absorbances ) การใช้ atps ผลในหลักกระบวนการกู้คืนที่ผลิตโปรตีนบริสุทธิ์ที่ 2.9 ± 0.2 และผลผลิตโดยรวมของต่างประเทศ % ( w / w )รายงานแสดงผลการดำเนินการในทางปฏิบัติของ atps สำหรับการออกแบบกระบวนการกู้คืนหลักเป็นขั้นตอนแรกเพื่อผลิตเชิงพาณิชย์ของ b-phycoerythrin ผลิตโดย ครูเอนทั่ม .