Metabolic activity assays. Granular sludge was collected under anaerobic conditions by using nitrogen gas. To remove any nongranular biomass, the sludge was washed three times with an anaerobic salts solution consisting of (in grams per liter) Na2HPO4- 7H20, 10.185; K2HPO4, 8.01;
NaH2 P04. H20, 2.21; cysteine hydrochloride, 0.125; Na2S * 9H20, 0.125; and resazurin, 0.001 (final pH, 7.2 + 0.1). The granular sludge was suspended to its original volume in the fixation was completed overnight at 4°C. The granules were enrobed in 4% agar, washed five times with cacodylate buffer containing 0.05% ruthenium red, and postfixed for 2 h in 2% osmium tetroxide. Samples were washed five times in cacodylate buffer, dehydrated in a water-acetone series, and
given two exposures of propylene oxide for 10 min. The samples were then infiltrated with 3:1 propylene oxide-Spurr resin (J. B. EM Services Inc., Dorval, Quebec, Canada) overnight and then given an additional 6 h of exposure to fresh propylene oxide-Spurr resin (3:1). The granules were placed in fresh resin overnight and then embedded in resin for 18 h at 60°C. Thin sections were cut with a glass knife, placed on 200-mesh copper grids, and stained with 1% uranyl acetate (pH 5.0) and lead citrate as described by Reynolds. Preparations were examined with a Hitachi 601 transmission electron microscope operating at an accelerating voltage of 50 kV.
กิจกรรมเผาผลาญ assays Granular ตะกอนถูกรวบรวมภายใต้เงื่อนไขที่ไม่ใช้ออกซิเจน โดยใช้ก๊าซไนโตรเจน เอาชีวมวลใด ๆ nongranular ตะกอนถูกล้างสามครั้ง ด้วยโซลูชันไม่ใช้เกลือประกอบด้วย (ในหน่วยกรัมต่อลิตร) Na2HPO4 - 7H 20, 10.185 K2HPO4, 8.01NaH2 P04 เอท 20, 2.21 ไฮโดรคลอไรด์ cysteine, 0.125 Na2S * 9H 20, 0.125 และ resazurin, 0.001 (สุดท้าย pH, 7.2 + 0.1) ตะกอน granular ถูกระงับการเดิมวอลุ่มการเบีเสร็จค้างคืนที่ 4 องศาเซลเซียส เม็ดถูก enrobed ใน agar 4% ล้างห้าครั้ง ด้วยบัฟเฟอร์ cacodylate ประกอบด้วยสีแดงรูทีเนียม 0.05% และ postfixed สำหรับ h 2 ใน 2% ออสเมียมเทโตรไซด์ ตัวอย่างที่ถูกล้างห้าครั้งใน cacodylate บัฟเฟอร์ อบแห้งในชุดน้ำอะซิโตน และรับถ่ายภาพสองของโพรพิลีนออกไซด์สำหรับ 10 นาที ตัวอย่างได้แล้วถูกแทรกซึม ด้วย 3:1 โพรพิลีนออกไซด์ Spurr เรซิน (J. B. EM Services Inc. ล ควิเบก แคนาดา) ค้างคืน แล้ว ให้ h 6 การเพิ่มเติมของการสัมผัสกับยางสดโพรพิลีนออกไซด์-Spurr (3:1) เม็ดที่อยู่ในยางสดข้ามคืนแล้ว ฝังอยู่ในยางสำหรับ h 18 ที่ 60 องศาเซลเซียส บางส่วนถูกตัด ด้วยมีดแก้ว วางบนตาข่ายกริดทองแดง และสี 1% uranyl acetate (pH 5.0) และซิเตรอตามที่อธิบายไว้ โดยเรย์โนลด์ส เตรียมถูกตรวจสอบ ด้วยกล้องจุลทรรศน์อิเล็กตรอนส่งฮิตาชิ 601 การดำเนินงานที่มีแรงดันไฟฟ้าปัจจุบัน 50 kV
การแปล กรุณารอสักครู่..

การวิเคราะห์กิจกรรมการเผาผลาญ กากตะกอนเม็ดเก็บภายใต้เงื่อนไขที่ไม่ใช้ออกซิเจนโดยใช้ก๊าซไนโตรเจน ในการลบชีวมวลใด ๆ nongranular ตะกอนที่ถูกล้างสามครั้งด้วยโซลูชั่นเกลือแบบไม่ใช้ออกซิเจนซึ่งประกอบด้วย (กรัมต่อลิตร) Na2HPO4- 7H20, 10.185; K2HPO4, 8.01;
NaH2 P04 H20, 2.21; ไฮโดรคลอไร cysteine, 0.125; Na2S * 9H20, 0.125; และ resazurin, 0.001 (pH สุดท้าย 7.2 + 0.1) กากตะกอนเม็ดถูกระงับปริมาณเดิมในการตรึงเสร็จสมบูรณ์ในชั่วข้ามคืนที่ 4 ° C เม็ดถูก enrobed ในอาหารเลี้ยงเชื้อ 4% ล้างห้าครั้งด้วยบัฟเฟอร์ cacodylate ที่มีสีแดงรูทีเนียม 0.05% และหลังค่าเงินเป็นเวลา 2 ชั่วโมงใน 2% ออสเมียม tetroxide ตัวอย่างถูกล้างห้าครั้งในบัฟเฟอร์ cacodylate
แห้งในชุดน้ำอะซิโตนและได้รับสองเสี่ยงโพรพิลีนออกไซด์เป็นเวลา10 นาที กลุ่มตัวอย่างที่ได้รับการแทรกซึมเข้าไปแล้วกับ 3: 1 โพรพิลีนออกไซด์ Spurr เรซิน (JB EM บริการอิงค์, ดอร์, ควิเบกแคนาดา) ในชั่วข้ามคืนแล้วรับเพิ่มอีก 6 ชั่วโมงจากการสัมผัสกับโพรพิลีนออกไซด์สด Spurr เรซิน (3: 1) เม็ดถูกวางไว้ในยางสดในชั่วข้ามคืนแล้วฝังตัวอยู่ในเรซิน 18 ชั่วโมงที่ 60 องศาเซลเซียส บางส่วนถูกตัดด้วยมีดแก้ววางอยู่บนทองแดง 200 ตาข่ายกริดและย้อมด้วยสีอะซิเตท uranyl 1% (pH 5.0) และนำไปสู่ซิเตรตตามที่อธิบายไว้โดยนาดส์ การเตรียมการถูกตรวจสอบด้วยกล้องจุลทรรศน์อิเล็กตรอนส่งฮิตาชิ 601 การดำเนินงานที่แรงดันไฟฟ้าเร่ง 50 กิโลโวลต์
การแปล กรุณารอสักครู่..
