Oxidative stress has been known to

Oxidative stress has been known to be involved in pathogenesis of dry eye disease. However, few studies have comprehensively investigated the relationship between hyperosmolarity and oxidative damage in human ocular surface. This study was to explore whether and how hyperosmolarity induces oxidative stress markers in primary human corneal epithelial cells (HCECs). Primary HCECs were established from donor limbal explants. The hyperosmolarity model was made in HCECs cultured in isosmolar (312 mOsM) or hyperosmotic (350, 400, 450 mOsM) media. Production of reactive oxygen species (ROS), oxidative damage markers, oxygenases and anti-oxidative enzymes were analyzed by DCFDA kit, RT-qPCR, immunofluorescent and immunohistochemical staining and Western blotting. Compared to isosmolar medium, ROS production significantly increased at time- and osmolarity-dependent manner in HCECs exposed to media with increasing osmolarities (350-450 mOsM). Hyperosmolarity significantly induced oxidative damage markers in cell membrane with increased toxic products of lipid peroxidation, 4-hydroxynonenal (4-HNE) and malondialdehyde (MDA), and in nuclear and mitochondria DNA with increased aconitase-2 and 8-OHdG. Hyperosmotic stress also increased the mRNA expression and protein production of heme oxygenase-1 (HMOX1) and cyclooxygenase-2 (COX2), but reduced the levels of antioxidant enzymes, superoxide dismutase-1 (SOD1), and glutathione peroxidase-1 (GPX1). In conclusion, our comprehensive findings demonstrate that hyperosmolarity induces oxidative stress in HCECs by stimulating ROS production and disrupting the balance of oxygenases and antioxidant enzymes, which in turn cause cell damage with increased oxidative markers in membrane lipid peroxidation and mitochondrial DNA damage.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

รู้จักความเครียด oxidative จะเกี่ยวข้องกับพยาธิกำเนิดของโรคตาแห้ง อย่างไรก็ตาม ศึกษาน้อยมีสาธารณชนตรวจสอบความสัมพันธ์ระหว่าง hyperosmolarity และเสียหายแก่พื้นผิวแนวมนุษย์ oxidative การศึกษานี้ได้สำรวจ วิธี hyperosmolarity ก่อให้เกิดความเครียด oxidative เครื่องหมายหลักมนุษย์กระจกตา epithelial เซลล์ (HCECs) และ หลัก HCECs ก่อตั้งขึ้นจากผู้บริจาค limbal explants รุ่น hyperosmolarity ทำในอ่างใน isosmolar (312 mOsM) หรือ hyperosmotic HCECs (350, 400, 450 mOsM) สื่อการ ผลิตชนิดปฏิกิริยาออกซิเจน (ROS), เครื่องหมายเสีย oxidative, oxygenases และเอนไซม์ต้าน oxidative ถูกวิเคราะห์ โดย DCFDA ชุด RT-qPCR, immunofluorescent และการย้อมสี immunohistochemical และการ blotting วิธีเวสเทิร์น เมื่อเทียบกับ isosmolar กลาง ผลิต ROS เพิ่มในลักษณะเวลา และ osmolarity-ขึ้นอยู่กับสัมผัสกับสื่อเพิ่ม osmolarities (350-450 mOsM) HCECs Hyperosmolarity อย่างมีนัยสำคัญทำให้เกิดเครื่องหมายเสีย oxidative ในเซลล์เมมเบรนกับผลิตภัณฑ์เพิ่มพิษของไขมัน peroxidation, 4-hydroxynonenal (4-HNE) และ malondialdehyde (MDA), และ ในนิวเคลียร์ และ mitochondria DNA เพิ่ม aconitase-2 และ 8-OHdG. Hyperosmotic ความเครียดยังเพิ่มนิพจน์ mRNA และโปรตีนผลิตของ heme oxygenase-1 (HMOX1) และ cyclooxygenase-2 (COX2), แต่ลดระดับของสารต้านอนุมูลอิสระเอนไซม์ ซูเปอร์ออกไซด์ dismutase-1 (SOD1) กลูตาไธโอน peroxidase- 1 (GPX1) เบียดเบียน ค้นพบของเราครอบคลุมแสดงว่า hyperosmolarity ก่อให้เกิดความเครียด oxidative ใน HCECs โดยผลิต ROS กระตุ้น และอาจรบกวนสมดุลของเอนไซม์ต้านอนุมูลอิสระและ oxygenases ซึ่งจะทำให้เซลล์เกิดความเสียหายกับเพิ่มเครื่องหมาย oxidative peroxidation ของไขมันเยื่อและ mitochondrial DNA เสียหาย

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ความเครียดออกซิเดชันได้รับทราบเพื่อมีส่วนร่วมในการเกิดโรคของโรคตาแห้ง อย่างไรก็ตามการศึกษาไม่กี่มีการสอบสวนครอบคลุมความสัมพันธ์ระหว่าง hyperosmolarity และความเสียหายออกซิเดชันในพื้นผิวที่ตาของมนุษย์ การศึกษาครั้งนี้คือการสำรวจว่าและวิธีการที่ก่อให้เกิดการ hyperosmolarity เครื่องหมายความเครียดออกซิเดชันในเซลล์เยื่อบุผิวกระจกตาของมนุษย์หลัก (HCECs) HCECs ประถมศึกษาเป็นที่ยอมรับจากผู้บริจาค limbal ชิ้น รูปแบบ hyperosmolarity ได้ทำใน HCECs เลี้ยงใน isosmolar (312 mOsm) หรือ hyperosmotic (350, 400, 450 mOsm) สื่อ การผลิตออกซิเจน (ROS) เครื่องหมายความเสียหายออกซิเดชัน, oxygenases และเอนไซม์ต้านออกซิเดชันวิเคราะห์ชุด DCFDA, RT-qPCR, immunofluorescent และเทคนิค immunohistochemistry และซับตะวันตก เมื่อเทียบกับสื่อ isosmolar ผลิต ROS เพิ่มขึ้นอย่างมากในลักษณะที่เวลาและ osmolarity ขึ้นอยู่กับใน HCECs สัมผัสกับสื่อที่มีเพิ่มขึ้น osmolarities (350-450 mOsm) อย่างมีนัยสำคัญ hyperosmolarity เหนี่ยวนำให้เกิดความเสียหายออกซิเดชันเครื่องหมายในเยื่อหุ้มเซลล์ที่มีผลิตภัณฑ์ที่เป็นพิษเพิ่มขึ้นของการเกิด lipid peroxidation 4 hydroxynonenal (4 hne) และ Malondialdehyde (MDA) และในดีเอ็นเอนิวเคลียร์และ mitochondria ที่มีเพิ่มขึ้น aconitase-2 และ 8-OHdG ความเครียด Hyperosmotic ยังเพิ่มการแสดงออกของยีนและการผลิตโปรตีนของ heme oxygenase-1 (HMOX1) และ cyclooxygenase-2 (COX2) แต่ลดระดับของเอนไซม์ต้านอนุมูลอิสระ, superoxide dismutase-1 (SOD1) และกลูตาไธโอนเปอร์ออกซิเด-1 (GPX1) . ในการสรุปผลการวิจัยที่ครอบคลุมของเราแสดงให้เห็นว่า hyperosmolarity ก่อให้เกิดความเครียดออกซิเดชันใน HCECs โดยการกระตุ้นการผลิตและ ROS รบกวนสมดุลของ oxygenases และเอนไซม์ต้านอนุมูลอิสระซึ่งจะก่อให้เกิดความเสียหายของเซลล์ที่มีเครื่องหมายออกซิเดชันที่เพิ่มขึ้นในเยื่อหุ้มเซลล์ไขมัน peroxidation และความเสียหายยลดีเอ็นเอ

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ความเครียดออกซิเดชันได้ทราบว่าจะเกี่ยวข้องกับพยาธิกำเนิดของโรคตาแห้ง อย่างไรก็ตาม มีการศึกษาน้อยอย่างทั่วถึงและศึกษาความสัมพันธ์ hyperosmolarity เกิดความเสียหายในพื้นผิวจักษุของมนุษย์ การศึกษานี้เพื่อสำรวจว่าและวิธีการ hyperosmolarity ก่อให้เกิดเครื่องหมายภาวะเครียดออกซิเดชันในหลักของมนุษย์เซลล์เยื่อกระจกตา ( hcecs )hcecs หลักขึ้นจาก limbal ผู้บริจาคเนื้อเยื่อ . การ hyperosmolarity รุ่นผลิตใน hcecs เลี้ยงใน isosmolar ( 312 mOsm ) หรือการแช่ในวัคซีน ( 350 , 400 , 450 mOsm ) สื่อ การผลิตของชนิดออกซิเจนปฏิกิริยา ( ROS ) เกิดความเสียหายและเอนไซม์ต้านออกซิเดชันเครื่องหมาย oxygenases วิเคราะห์โดย dcfda ชุด qpcr RT , และ immunofluorescent สำหรับ staining และ Western blotting .เมื่อเทียบกับ isosmolar ขนาดกลางการผลิตผลตอบแทนสูงขึ้นเวลา - ขึ้นอยู่กับลักษณะ hcecs ำและเปิดรับสื่อกับการเพิ่ม osmolarities ( 350-450 mOsm ) สถิติการเกิดความเสียหาย hyperosmolarity เครื่องหมายในเยื่อหุ้มเซลล์ lipid peroxidation ผลิตภัณฑ์เพิ่มขึ้น พิษของ 4-hydroxynonenal , ( 4-hne ) และมาลอนไดอัลดีไฮด์ ( MDA )และในไมโตคอนเดรียดีเอ็นเอนิวเคลียร์และเพิ่มขึ้นและ aconitase-2 8-ohdg . ความเครียด การแช่ในวัคซีนเพิ่มขึ้นของการแสดงออกและการผลิตโปรตีนฮีม oxygenase-1 ( hmox1 ) และ cyclooxygenase-2 ( cox2 ) แต่ลดระดับของสารต้านอนุมูลอิสระเอนไซม์ Superoxide dismutase-1 ( sod1 ) และกลูต้าไธโอน peroxidase-1 ( gpx1 ) สรุปข้อมูลที่ครอบคลุมของเราแสดงให้เห็นว่า hyperosmolarity ก่อให้เกิดภาวะเครียดออกซิเดชันใน hcecs โดยการกระตุ้นการผลิต ROS และกระทบกับความสมดุลของ oxygenases สารต้านอนุมูลอิสระและเอนไซม์ซึ่งจะทำให้เซลล์เกิดความเสียหายกับการเพิ่มขึ้นเครื่องหมายใน lipid peroxidation เยื่อเซลล์และดีเอ็นเอที่เสียหาย