quadricarinatus intersex juveniles [4], and altered the histological
structure of the female and male components of their reproductive
system [25]. However, to our knowledge no morphological or histological
characterization has ever been made of the effects of AG
ablation on the external sexual characters and reproductive system
of C. quadricarinatus males.
This freshwater crayfish is a gonochoristic species. The males
have a pair of testes connected in their middle portion to the vasa
deferentia, which open into the appendices masculinae at the base of
the fifth pair of walking legs [17,32]. The spermatophore of this
species is composed of two elements: (1) the spermatic cord,
which is a continuous structure consisting of a mass of spermatozoa
from the testes, surrounded in the proximal portion of the vas
deferens (VD) by a thin layer named ‘‘primary layer’’ of the spermatophore;
(2) the secondary layer of the spermatophore, which
is synthesized in the middle portion of the VD and surrounds the
primary layer. Two distinctive components are identified in the latter:
a high quantity of round cytoplasmatic droplets, and a homogeneous
matrix [32,33].
On the other hand, a possible effect of the AG on growth was also
studied in M. rosenbergii and C. quadricarinatus, whose males grow
faster and attain a larger size than females [11,13,20,24,48,50,
55,57]. In both species, the somatic growth was reduced by the ablation
and increased by the implantation of this gland [34,52]. It remains
unclear whether the effect of AG on growth is direct
through an androgen (still undiscovered in these species; [36]), indirect
through the inhibition of the energetic investment of females in
reproduction, or a combination of both [35].
In an attempt to gain a more in-depth insight of the role of the
AG in some aspects of C. quadricarinatus biology, this study provides
a long-term evaluation (300 days) of the effect of its ablation
at an early stage of development on the growth, structure of the
reproductive system and development of secondary sexual characters
of this species males.
2. Materials and methods
2.1. Animals
The juveniles used in the present study were obtained under
laboratory conditions, from a broodstock supplied by Farm Las
Golondrinas, Entre Ríos, Argentina. Ovigerous females were individually
placed in glass aquaria of 60  40  30 cm containing
20 L of dechlorinated tap water and under continuous aeration.
The temperature was held constant at 27 ± 1 C by ATMAN water
heaters (100 W, precision 1 C), and the photoperiod was 14:10
(L:D). Each aquarium was provided with a PVC tube (10 cm in
diameter and 25 cm long) as shelter [18]. Females were fed daily
ad libitum with Elodea sp. and commercial Tetradiskus granules
(approximate composition: min. crude protein 47.5%, min. crude
fat 6.5%, max. crude fiber 2.0%, max. moisture 6.0%, min. phosphorus
1.5% and min. ascorbic acid 100 mg kg1) according to Sánchez
de Bock and López Greco [58] and Tropea et al. [64]. When juveniles
became independent at stage III [31], they were separated
from their mothers. After reaching approximately 0.200 g, juvenile
males were identified by observation of genital openings at the
base of the fifth pair of walking legs [66]. These juveniles were
maintained under the same conditions of water quality, temperature,
photoperiod and feeding described for their mothers until
the beginning of the experiment.
2.2. Experimental design
Male juveniles weighing 1.85 ± 0.03 g (developmental stage II of
male reproductive system according to Vazquez and López Greco
[67]) were selected for the experiment, and randomly assigned to
one of the following treatments:
– Andrectomy (AGA): removal of both fifth walking legs together
with the AG by cutting through the articulation between the
coxa and the cephalothorax.
– Control (C): removal of both fifth walking legs by performing a
cut in the articulation between the coxa and the base of the
pereiopod.
In both treatments, after the removal of the pereiopods the cuts
were anesthetized with Xylocaine (containing 2.5% Lidocaine) and
electro-cauterized to avoid excessive loss of hemolymph, and to
ensure the complete removal of the AG tissue. As some juveniles
died during the week that followed the microsurgeries, the experiment
was initiated once the number of animals of each treatment
had stabilized. Organisms were maintained in 60  40  30 cm
glass aquaria filled with 20 L of dechlorinated tap water with continuous
aeration. PVC tubes (10 cm in diameter and 25 cm long)
and onion bag mesh were used as shelter. Each aquarium was a
replicate, and had 4/5 crayfish (16.7–20.8 animals/m2). Three replicates
were used for each experimental group, with a total number
of six aquaria. The experiment was performed under constant conditions
of photoperiod (14:10 L:D) and temperature (27 ± 1 C by
100W ATMAN aquarium heater). The juveniles were fed daily ad
libitum with commercial Tetradiskus granules and Elodea sp. All
aquaria were cleaned and water was completely replaced once a
week. The experimental period comprised 300 days, during which
animals were sexed according to the position of the gonopores,
weighed (precision 0.01 mg) and their mortality recorded every
2 weeks. The regeneration of the removed pereiopods, the re-formation
of male gonopores and appendices masculinae, the development
of female gonopores, and the differentiation of the red patch
were also recorded.
2.3. Morphological and histological examination
At the end of the experiment, all animals were weighed (precision:
0.1 mg) and the following morphometric variables were measured
(precision: 0.01 mm): cephalothorax length (CL), from the
tip of the rostrum to the end of the cephalotorax; postorbital cephalothorax
length (POL), from behind the eye to the end of the
cephalotorax; pleon width (PWi), measured in the second abdominal
segment; length, width and height of the chelae (LC, WC and
HC, respectively); and length of the red patch (LRP), when present.
The weight of the chelae (CWe) and pleon (PWe) of each animal
were also recorded. The size of the endopod and exopod of the first
and second pleopods, together with the morphology of the pleopod
setae, were qualitatively analyzed under a light microscope (40),
and compared between groups, taking into account that in males
only plumose setae are present while with the progress of female
maturation simple (ovigerous) setae are developed in the endopod,
which is larger than the exopod [53].
After being cold-anaesthetized at 20 C for 15 min the carapace
of each animal was removed and the reproductive system
was inspected to determine their relative size, form and color. They
were then quickly dissected, weighed, and fixed in Bouin’s solution
for 4 h at room temperature. The tissues were finally dehydrated
and embedded in paraffin. Sections, 5–7 lm thick, were stained
with Hematoxylin–Eosin and Masson Trichrome. At least three
slides from each crayfish were inspected under light microscope.
The structure of the testes and the VD epithelium, the relative
amount of secretion and the composition of the primary and secondary
layers of the spermatophore [32,33,67], were qualitatively
analyzed. Also, the number of spermatic cord sections within the
 
เรนโบว์ภาวะเพศกำกวม juveniles [4], และสรีรวิทยาที่เปลี่ยนแปลงโครงสร้างของเพศหญิง และเพศชายส่วนประกอบของการสืบพันธุ์ระบบ [25] อย่างไรก็ตาม การรู้ของเราไม่กระทบ หรือสรีรวิทยาจำแนกเคยได้ของผลกระทบของ AGจี้ตัวอักษรทางเพศภายนอกและระบบสืบพันธุ์ของเพศชายเรนโบว์ซีเครย์ฟิชปลานี้เป็นสปีชีส์ gonochoristic ตัวมีคู่ของลิ้มที่เชื่อมต่อในส่วนของกลางไป vasadeferentia ซึ่งเปิดเป็น masculinae appendices ที่คู่ที่ห้าของการเดินขา [17,32] Spermatophore นี้ชนิดประกอบด้วยสององค์ประกอบ: (1) spermatic cordซึ่งเป็นโครงสร้างอย่างต่อเนื่องประกอบด้วยมวลของ spermatozoaจากลิ้ม ห้องในส่วนของ vas proximaldeferens (VD) โดยบางชั้นชื่อ ''ชั้นหลัก '' ของ spermatophore(2)ชั้นรองของ spermatophore ซึ่งสังเคราะห์ในส่วนกลางของ VD และล้อมรอบตัวชั้นหลัก มีระบุส่วนประกอบที่โดดเด่นสองในหลัง:ปริมาณสูงหยดรอบ cytoplasmatic และที่เป็นเนื้อเดียวกันเมตริกซ์ [32,33]บนมืออื่น ๆ ได้ผลของ AG เจริญเติบโตได้ยังเรียนในม.ก้ามกรามและเรนโบว์ซี ชายเติบโตเร็ว และมีขนาดใหญ่กว่าหญิง [11,13,20,24,48,50 บรรลุ55,57] ในทั้งสองชนิด somatic เจริญเติบโตลดลง โดยการจี้และเพิ่มขึ้น ด้วยฤทธิ์ของต่อมนี้ [34,52] มันยังคงอยู่ชัดเจนว่าผลของ AG เติบโตโดยตรงผ่านมี androgen (ยังไม่เคยค้นพบในสายพันธุ์เหล่านี้ [36]), อ้อมโดยยับยั้งการลงทุนที่มีพลังของฉันทำซ้ำ หรือการรวมกันของทั้งสอง [35]ในความพยายามที่จะเข้าใจละเอียดมากขึ้นของบทบาทของการAG ในบางส่วนของชีววิทยาซีเรนโบว์ ให้การศึกษานี้ประเมินเป็นระยะยาว (300 วัน) ของผลของการจี้ที่มีระยะแรก ๆ ของการพัฒนาเจริญเติบโต โครงสร้างของการระบบสืบพันธุ์และการพัฒนาตัวรองทางเพศของเพศชายชนิดนี้2. วัสดุและวิธีการ2.1 การสัตว์Juveniles ที่ใช้ในการศึกษาปัจจุบันได้รับภายใต้สภาพห้องปฏิบัติการ จากสูตรการจัดฟาร์มลาGolondrinas, Entre Ríos อาร์เจนตินา หญิง Ovigerous ได้ทีวางในอควาเรียแก้ว 30 40 60 ซมประกอบด้วยL 20 ของน้ำประปา dechlorinated และ aeration อย่างต่อเนื่องอุณหภูมิจัดขึ้นคงที่ 27 ± 1 C โดยน้ำ ATMANเครื่องทำความร้อน (100 W ความแม่นยำ 1 C), และชั่วโมง 14:10(L:D) พิพิธภัณฑ์สัตว์น้ำแต่ละที่มีท่อ PVC (10 ซม.ยาว 25 ซม.และเส้นผ่าศูนย์กลาง) เป็นที่พักพิง [18] ฉันได้รับทุกวันad libitum Elodea sp.และพาณิชย์ Tetradiskus เม็ด(ประมาณองค์ประกอบ: ลดโปรตีนหยาบ 47.5% ส่วนลดน้ำมันไขมัน 6.5% สูงสุด เส้นใยหยาบ 2.0% สูงสุด ความชื้น 6.0% ฟอสฟอรัสต่ำ1.5% และลดกรดแอสคอร์บิค 100 มก.กก. 1) ตาม Sánchezเดอ Bock และ López Greco [58] และ Tropea et al. [64] เมื่อ juvenilesเป็นอิสระในระยะ III [31] ถูกแยกออกจากกันจากแม่ของพวกเขา หลังจากถึงประมาณ 0.200 g เยาวชนชายระบุ โดยสังเกตช่องที่อวัยวะเพศในการฐานของการจับคู่ที่ห้าของการเดินขา [66] Juveniles เหล่านี้ได้รักษาภายใต้เงื่อนไขเดียวกันคุณภาพน้ำ อุณหภูมิชั่วโมงและให้อาหารอธิบายสำหรับมารดาของพวกเขาจนถึงจุดเริ่มต้นของการทดลอง2.2. ทดลองออกแบบชาย juveniles น้ำหนัก 1.85 ± 0.03 g (พัฒนาขั้นตอนที่สองของระบบสืบพันธุ์เพศชายตาม Vazquez López Greco[67]) สำหรับทดลอง และสุ่มให้หนึ่งในการรักษาต่อไปนี้:– Andrectomy (AGA): เอาทั้งห้าเดินขากันกับ AG โดยตัดผ่านวิคิวลาร์ระหว่างการcoxa และ cephalothorax– ควบคุม (C): เอาขาเดินทั้งห้าโดยการดำเนินการตัดวิคิวลาร์ระหว่าง coxa และฐานของการpereiopodในทั้งสองรักษา หลังจากการกำจัด pereiopods การตัดได้ด้วย ด้วย Xylocaine (ประกอบด้วย 2.5% Lidocaine) และelectro cauterized เพื่อหลีกเลี่ยงการสูญเสียมากเกินไป ของ hemolymph และการให้เอาเนื้อเยื่อ AG ที่สมบูรณ์ Juveniles บางตายในระหว่างสัปดาห์ที่ตาม microsurgeries ทดลองถูกเริ่มต้นจำนวนสัตว์การรักษาแต่ละครั้งมีเสถียร สิ่งมีชีวิตถูกรักษาไว้ใน 60 40 30 ซม.อควาเรียแก้วที่เต็มไป ด้วย dechlorinated ก๊อกน้ำต่อเนื่อง 20 Laeration ท่อ PVC (10 ซม.เส้นผ่านศูนย์กลาง และยาว 25 ซม.)และตาข่ายถุงหอมถูกใช้เป็นกำบัง มีพิพิธภัณฑ์สัตว์น้ำแต่ละทำซ้ำ และมี 4/5 เครย์ฟิช (สัตว์ 16.7-20.8 m2) เหมือนกับสามใช้สำหรับแต่ละกลุ่มการทดลอง มีจำนวนรวมของอควาเรีย 6 ทำการทดลองที่สภาวะคงของช่วงแสง (14:10 L:D) และอุณหภูมิ (27 ± 1 C โดย100W ATMAN พิพิธภัณฑ์สัตว์น้ำฮีตเตอร์) Juveniles ได้รับโฆษณาทุกวันlibitum พาณิชย์ Tetradiskus เม็ดและ Elodea sp.ทั้งหมดอควาเรียได้ถูกล้างไวรัส และน้ำถูกแทนเมื่อการสัปดาห์ วัน 300 ซึ่งประกอบด้วยรอบระยะเวลาทดลองสัตว์ถูก sexed ตามตำแหน่งของ gonoporesน้ำหนัก (ความแม่นยำ 0.01 มิลลิกรัม) และบันทึกการตายของพวกเขาทุกสัปดาห์ที่ 2 ฟื้นฟูของ pereiopods เอา การก่อตัวใหม่ของชาย gonopores และ appendices masculinae การพัฒนาหญิง gonopores และสร้างความแตกต่างของแพทช์สีแดงนอกจากนี้ยังบันทึก2.3. สัณฐาน และสรีรวิทยาสอบเมื่อสิ้นสุดการทดลอง สัตว์ทั้งหมดมีน้ำหนัก (ความแม่นยำ:0.1 มิลลิกรัม) และมีวัดตัวแปร morphometric ดังต่อไปนี้(ความแม่นยำ: 0.01 mm): ยาว cephalothorax (CL), จากการคำแนะนำของ rostrum ของ cephalotorax postorbital cephalothoraxความยาว (POL), พอตาไปสิ้นสุดcephalotorax ความกว้าง pleon (PWi), วัดในท้องที่สองเซ็กเมนต์ ความยาว ความกว้าง และความสูงของ chelae (LC สุขา และHC ตามลำดับ); และความยาวของแพทช์สีแดง (LRP), ท้องน้ำหนักของ chelae (CWe) และ pleon (PWe) ของสัตว์แต่ละนอกจากนี้ยังบันทึก ขนาดของ endopod และ exopod ครั้งแรกและสอง pleopods พร้อมรูปร่าง pleopodsetae, qualitatively ได้วิเคราะห์ภายใต้กล้องจุลทรรศน์แสง (40),และเปรียบเทียบระหว่างกลุ่ม การเข้าบัญชีที่ในชายเฉพาะ plumose setae มีอยู่ในขณะที่ มีความคืบหน้าของเพศหญิงมีพัฒนา setae ง่าย (ovigerous) พ่อแม่ใน endopodซึ่งมีขนาดใหญ่กว่า exopod [53]หลังจากเย็น-anaesthetized ที่ 20 C ใน 15 นาที carapaceของสัตว์แต่ละถูกเอาออก และระบบสืบพันธุ์ถูกตรวจสอบเพื่อกำหนดความสัมพันธ์ขนาด แบบฟอร์ม และสี พวกเขาได้แล้วเร็ว dissected ชั่งน้ำหนัก และถาวรในโซลูชันของ Bouinสำหรับ h 4 ที่อุณหภูมิห้อง เนื้อเยื่อถูกอบแห้งในที่สุดและฝังในพาราฟิน ส่วน หนา lm 5 – 7 มีสีHematoxylin – Eosin และ Masson Trichrome อย่างน้อยสามภาพนิ่งจากแต่ละเครย์ฟิชได้ตรวจสอบภายใต้กล้องจุลทรรศน์แสงโครงสร้างของการลิ้มลองและ epithelium VD ญาติจำนวนหลั่งและองค์ประกอบหลักและรองมีชั้นของ spermatophore [32,33,67], qualitativelyวิเคราะห์ ยัง จำนวน spermatic cord ส่วนภายใน
การแปล กรุณารอสักครู่..

 
 
quadricarinatus หนุ่มสาว Intersex [4] 
และการเปลี่ยนแปลงเนื้อเยื่อโครงสร้างของส่วนประกอบหญิงและชายของเจริญพันธุ์ระบบ
[25] อย่างไรก็ตามเพื่อให้ความรู้ของเราไม่มีก้านหรือเนื้อเยื่อตัวละครที่เคยได้รับการทำจากผลกระทบของเอจีระเหยในตัวละครทางเพศภายนอกและระบบสืบพันธุ์ของเพศชายซีquadricarinatus. กุ้งน้ำจืดนี้เป็นสายพันธุ์ gonochoristic เพศชายมีคู่ของอัณฑะที่เชื่อมต่อในส่วนตรงกลางของพวกเขาไปแวdeferentia ซึ่งเปิดเข้าไปในภาคผนวก masculinae ที่ฐานของคู่ที่ห้าของขาเดิน[17,32] spermatophore นี้ชนิดประกอบด้วยสององค์ประกอบ: (1) สายน้ำกาม, ซึ่งเป็นโครงสร้างอย่างต่อเนื่องประกอบด้วยมวลของตัวอสุจิจากอัณฑะที่ล้อมรอบในส่วนใกล้เคียงของ vas deferens (VD) โดยชั้นบางชื่อ '' ชั้นประถมศึกษา '' ของ spermatophore นั้น(2) ชั้นที่สองของ spermatophore ซึ่งถูกสังเคราะห์ในส่วนตรงกลางของVD และล้อมรอบชั้นประถมศึกษา สององค์ประกอบที่โดดเด่นจะมีการระบุในหลัง: ปริมาณสูงของหยด cytoplasmatic รอบและเป็นเนื้อเดียวกัน. เมทริกซ์ [32,33] บนมืออื่น ๆ ที่มีผลต่อการเป็นไปได้ของเอจีต่อการเจริญเติบโตก็ยังศึกษาในเอ็มrosenbergii และ C quadricarinatus ที่มีเพศเติบโตได้เร็วขึ้นและบรรลุมีขนาดใหญ่กว่าตัวเมีย[11,13,20,24,48,50, 55,57] ทั้งสองชนิดในการเจริญเติบโตของร่างกายลดลงระเหยและเพิ่มขึ้นจากการฝังของต่อมนี้ [34,52] มันยังคงไม่มีความชัดเจนว่าผลกระทบของเอจีต่อการเจริญเติบโตโดยตรงผ่านทางแอนโดรเจน(ยังคงยังไม่ได้เปิดในรูปแบบเหล่านี้ [36]) ทางอ้อมผ่านการยับยั้งการลงทุนที่มีพลังของผู้หญิงในการทำสำเนาหรือการรวมกันของทั้งสอง[35] ได้. ใน ความพยายามที่จะได้รับเพิ่มเติมในเชิงลึกของความเข้าใจบทบาทของที่เอจีในบางแง่มุมของชีววิทยาซีquadricarinatus การศึกษาครั้งนี้มีการประเมินผลในระยะยาว(300 วัน) ผลกระทบจากการระเหยของมันในช่วงเริ่มต้นของการพัฒนาในการเจริญเติบโตของโครงสร้างของระบบสืบพันธุ์และการพัฒนาของตัวละครทางเพศที่สองของสายพันธุ์เพศผู้นี้. 2 วัสดุและวิธีการ2.1 สัตว์หนุ่มสาวที่ใช้ในการศึกษาครั้งนี้ได้รับภายใต้เงื่อนไขการทดลองจากพ่อแม่พันธุ์ที่จัดทำโดยฟาร์มลาGolondrinas, Entre Ríosอาร์เจนตินา หญิง Ovigerous เป็นรายบุคคลที่ถูกวางไว้ในตู้กระจก60? 40? 30 ซม. ที่มี20 ลิตรน้ำประปาฆ่าเชื้อด้วยคลอรีนและอยู่ภายใต้การเติมอากาศอย่างต่อเนื่อง. อุณหภูมิที่จัดขึ้นอย่างต่อเนื่องวันที่ 27 ± 1 องศาเซลเซียสโดย ATMAN น้ำเครื่องทำความร้อน(100 วัตต์, ความแม่นยำ 1 องศาเซลเซียส) และแสงเป็น 14:10 (L: D ) พิพิธภัณฑ์สัตว์น้ำแต่ละคนมีให้กับพีวีซีท่อ (10 เซนติเมตรและมีขนาดเส้นผ่าศูนย์กลาง25 ซม. ยาว) เป็นที่พักพิง [18] ผู้หญิงได้รับการเลี้ยงดูในชีวิตประจำวันโฆษณา libitum กับ Elodea SP และเชิงพาณิชย์ Tetradiskus? เม็ด(องค์ประกอบโดยประมาณ: ต่ำสุดโปรตีน 47.5% นาทีน้ำมันดิบ.. ไขมัน 6.5% สูงสุดเยื่อใย 2.0% สูงสุดความชื้น 6.0% นาทีฟอสฟอรัส... 1.5% และต่ำสุดวิตามินซี 100 มิลลิกรัมต่อกิโลกรัม 1.?) เป็นไปตาม Sánchezเดอเบียร์และLópezกรีก[58] และโตรเปีย et al, [64] เมื่อหนุ่มสาวกลายเป็นอิสระในขั้นตอนที่สาม [31] พวกเขาถูกแยกออกจากแม่ของพวกเขา หลังจากที่ไปถึงประมาณ 0.200 กรัมเด็กและเยาวชนชายที่ถูกระบุโดยการสังเกตของการเปิดอวัยวะเพศที่ฐานของคู่ที่ห้าของขาเดิน[66] หนุ่มสาวเหล่านี้ถูกเก็บรักษาไว้ภายใต้เงื่อนไขเดียวกันของคุณภาพน้ำอุณหภูมิแสงและการให้อาหารที่อธิบายไว้สำหรับคุณแม่ของพวกเขาจนกว่าจุดเริ่มต้นของการทดลอง. 2.2 การออกแบบการทดลองเยาวชนชายที่มีน้ำหนัก 1.85 ± 0.03 กรัม (ขั้นตอนการพัฒนาที่สองของระบบสืบพันธุ์เพศชายตามVazquez และLópezกรีก[67]) ได้รับเลือกสำหรับการทดสอบและสุ่มให้หนึ่งในการรักษาต่อไปนี้: - Andrectomy (AGA): กำจัด ของทั้งสองขาเดินห้าร่วมกันกับเอจีโดยการตัดผ่านเสียงที่เปล่งออกระหว่าง. ตะโพกและ cephalothorax - การควบคุม (C): การกำจัดของขาเดินทั้งห้าโดยการดำเนินการตัดเสียงที่เปล่งออกระหว่างตะโพกและฐานของpereiopod ในการรักษาทั้งสองหลังจากการกำจัดของ pereiopods ตัดที่ถูกอสัญญีกับXylocaine (ที่มี 2.5% Lidocaine) และไฟฟ้าcauterized เพื่อหลีกเลี่ยงการสูญเสียเลือดมากเกินไปและเพื่อให้แน่ใจว่าการกำจัดที่สมบูรณ์ของเนื้อเยื่อเอจี ในฐานะที่เป็นหนุ่มสาวบางคนเสียชีวิตในช่วงสัปดาห์ที่ตาม microsurgeries การทดลองได้ริเริ่มขึ้นเมื่อจำนวนของสัตว์ในการรักษาแต่ละมีเสถียรภาพ สิ่งมีชีวิตที่ได้รับการดูแลใน 60? 40? 30 ซมตู้กระจกที่เต็มไปด้วยน้ำ20 ลิตรประปาฆ่าเชื้อด้วยคลอรีนที่มีอย่างต่อเนื่องการเติมอากาศ ท่อพีวีซี (10 ซม. และมีขนาดเส้นผ่าศูนย์กลาง 25 ซม. ยาว) และถุงตาข่ายหอมถูกนำมาใช้เป็นที่พักพิง พิพิธภัณฑ์สัตว์น้ำแต่ละคนเป็นซ้ำและมี 4/5 กั้ง (16.7-20.8 สัตว์ / m2) ซ้ำสามถูกนำมาใช้สำหรับกลุ่มทดลองแต่ละที่มีจำนวนหกตู้ การทดลองที่ได้รับการดำเนินการภายใต้เงื่อนไขที่คงที่ของแสง (14:10 L: D) และอุณหภูมิ (27 ± 1 องศาเซลเซียสโดย 100W ATMAN เครื่องทำน้ำอุ่นตู้ปลา) หนุ่มสาวได้รับการเลี้ยงดูโฆษณาทุกวันกินอย่างเต็มที่กับ Tetradiskus พาณิชย? เม็ดและ Elodea SP ทุกตู้ทำความสะอาดและน้ำก็ถูกแทนที่สมบูรณ์ครั้งหนึ่งเคยเป็นสัปดาห์ ระยะเวลาการทดลองประกอบด้วย 300 วันในระหว่างที่สัตว์ที่ถูกบ้าเซ็กส์ตามตำแหน่งของgonopores ที่ชั่งน้ำหนัก(ความแม่นยำ 0.01 มก.) และการเสียชีวิตของพวกเขาบันทึกทุก2 สัปดาห์ การฟื้นฟูของ pereiopods ลบออกอีกครั้งการก่อตัวของgonopores เพศชายและเพศภาคผนวก masculinae การพัฒนาของgonopores หญิงและความแตกต่างของแพทช์สีแดงที่ถูกบันทึกไว้ยัง. 2.3 การตรวจสอบทางสัณฐานวิทยาและเนื้อเยื่อในตอนท้ายของการทดลองสัตว์ทั้งหมดถูกชั่งน้ำหนัก (ความแม่นยำ: 0.1 มก.) และตัวแปรเมตริกต่อไปนี้ถูกวัด(ความแม่นยำ: 0.01 มม): ความยาว cephalothorax (CL) จากปลายจะงอยปากที่สิ้นสุดของ cephalotorax นั้น postorbital cephalothorax ระยะเวลา (POL) จากด้านหลังตาไปยังจุดสิ้นสุดของcephalotorax; ความกว้าง Pleon (PWI) วัดในท้องสองส่วน; ความยาวความกว้างและความสูงของ Chelae นี้ (LC, สุขาและHC ตามลำดับ); และความยาวของแพทช์สีแดง (LRP) เมื่อมีการแสดง. น้ำหนักของ Chelae (ที่ CWE) และ Pleon (PWE) ของสัตว์แต่ละถูกบันทึกไว้ยัง ขนาดของ endopod และ exopod แรกpleopods และครั้งที่สองร่วมกับสัณฐานวิทยาของ pleopod ที่setae, วิเคราะห์คุณภาพภายใต้กล้องจุลทรรศน์แบบใช้แสง (40) และเมื่อเทียบระหว่างกลุ่มคำนึงถึงว่าในเพศชายเท่านั้น setae plumose มี ปัจจุบันขณะที่ความคืบหน้าของหญิงเจริญเติบโตง่าย(ovigerous) setae มีการพัฒนาใน endopod ที่ซึ่งมีขนาดใหญ่กว่าexopod เมื่อ [53]. หลังจากที่เย็นอสัญญีที่ 20 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 15 นาทีกระดองของสัตว์แต่ละจะถูกลบออกและระบบสืบพันธุ์ได้รับการตรวจสอบเพื่อกำหนดขนาดญาติของพวกเขารูปแบบและสี พวกเขาถูกชำแหละแล้วได้อย่างรวดเร็วชั่งน้ำหนักและการแก้ไขในการแก้ปัญหา Bouin ของ 4 ชั่วโมงที่อุณหภูมิห้อง เนื้อเยื่อที่ถูกอบแห้งในที่สุดและฝังตัวอยู่ในพาราฟิน ส่วน 5-7 ไมครอนหนามีการย้อมด้วยHematoxylin-Eosin และมาซซ็อง trichrome อย่างน้อยสามภาพนิ่งจากแต่ละกั้งถูกตรวจสอบภายใต้กล้องจุลทรรศน์แสง. โครงสร้างของอัณฑะและเยื่อบุผิว VD ที่ที่ญาติปริมาณของการหลั่งและองค์ประกอบของประถมศึกษาและมัธยมศึกษาชั้นของspermatophore เมื่อ [32,33,67] มีคุณภาพวิเคราะห์ นอกจากนี้ยังมีจำนวนของส่วนสายน้ำกามภายใน
การแปล กรุณารอสักครู่..

 
 
quadricarinatus สัจนิยมเยาวชน [ 4 ] และการเปลี่ยนแปลงทางจุลกายวิภาค 
 โครงสร้างของหญิงและชาย ส่วนประกอบของระบบการสืบพันธุ์ 
 [ 25 ] อย่างไรก็ตาม ความรู้ไม่มีก้าน หรือชิ้น 
 คุณสมบัติเคยทำให้ผลการรักษาโดย 
 บนภายนอกเพศตัวละคร และระบบสืบพันธุ์ของเพศชาย quadricarinatus 
 
 C ของเรากุ้งน้ำจืด นี้คือ gonochoristic ชนิด ผู้ชาย 
 มีคู่ของอัณฑะที่เชื่อมต่อในส่วนตรงกลางของ Vasa 
 deferentia ซึ่งเปิดในเอกสารประกอบ masculinae ที่โคนขาเดินคู่ที่ 5 
 [ 17,32 ] การ spermatophore 
 ชนิดนี้ประกอบด้วยสององค์ประกอบ : ( 1 ) สายไฟเกี่ยวกับน้ำอสุจิ 
 , ซึ่งเป็นอย่างต่อเนื่องโครงสร้างที่ประกอบด้วยมวลของผนัง 
จากอัณฑะ แวดล้อมในส่วนการทำงานของ vas deferens 
 ( Vd ) โดยชั้นบาง ๆ ที่ชื่อ ' 'primary ชั้น ' ' ของ spermatophore ; 
 ( 2 ) ชั้นมัธยมของ spermatophore ซึ่ง 
 สังเคราะห์ในส่วนตรงกลางของกามโรคและล้อมรอบ 
 ชั้นหลัก สององค์ประกอบที่โดดเด่นจะถูกระบุในหลัง : 
 ปริมาณสูงของหยด cytoplasmatic รอบและเป็นเนื้อเดียวกัน 
เมทริกซ์ [ 32,33 ] . 
 บนมืออื่น ๆผลที่เป็นไปได้ของ AG ในการเจริญเติบโตยัง 
 เรียนม. การ . quadricarinatus ที่มีคนปลูก 
 ได้เร็วขึ้นและบรรลุมีขนาดใหญ่กว่าเพศหญิง [ 11,13,20,24,48,50 
 , 55,57 ] ในทั้งสองชนิดเจริญเติบโตทางกายลดลง Ablation 
 และเพิ่มขึ้น โดยฝังนี้ต่อม [ 34,52 ] มันยังคง 
ชัดเจนว่าผลของ AG ในการเจริญเติบโตโดยตรง 
 ผ่าน androgen ( ยังไม่ได้เปิดในชนิดเหล่านี้ [ 36 ] ) ทางอ้อม 
 ผ่านการยับยั้งการลงทุนคึกคักของหญิง 
 การสืบพันธุ์หรือการรวมกันของทั้งสอง [ 35 ] . 
 ในความพยายามที่จะได้รับความเข้าใจในเชิงลึกมากขึ้นของบทบาทของ 
 AG ในบางแง่มุมของ quadricarinatus ชีววิทยา การศึกษานี้ให้ 
การประเมินผลระยะยาว ( 300 วัน ) ผลของการ 
 ที่ช่วงแรกของการพัฒนาการ โครงสร้างของระบบสืบพันธุ์และการพัฒนา 
 
 ทุติยภูมิทางเพศอักขระชนิดนี้ตัวผู้ . 
 2 วัสดุและวิธีการ 
 2.1 . สัตว์ 
 เด็กและเยาวชนที่ใช้ในการศึกษาได้มาภายใต้สภาวะห้องปฏิบัติการ 
 จากพ่อแม่มาจากฟาร์มใน golondrinas 
 ,argentina . kgm , อาร์เจนตินา ผู้หญิง ovigerous นักเรียนรายบุคคล 
 วางไว้ในแก้วนุกูล   60 40 30 ซม. ประกอบด้วย 
 20 ลิตร dechlorinated น้ำประปาและภายใต้อากาศอย่างต่อเนื่อง 
 อุณหภูมิจัดขึ้นคงที่ที่ 27 ± 1  C โดยหลักของ heaters น้ำ 
 ( 100 W , ความแม่นยำ 1  C ) และให้แสงเป็น 14 : 10 
 ( l : D ) แต่ละตู้มีให้กับท่อ PVC ( 10 เซนติเมตร 
ขนาดเส้นผ่าศูนย์กลางยาว 25 ซม. ) เป็นกำบัง [ 18 ] ตัวเมียที่เลี้ยงทุกวัน 
 อย่างเต็มที่กับ elodea sp . และพาณิชย์ tetradiskus  เม็ด 
 ( ส่วนประกอบ : โปรตีนประมาณนาที 47.5% , มิน ดิบ 
 ไขมัน 6.5 เปอร์เซ็นต์ เยื่อใยร้อยละ 2.0 แม็กซ์ แม็กซ์ ความชื้น 6.0 , มิน ฟอสฟอรัส 
 1.5% และนาที กรดแอสคอร์บิก 100 มิลลิกรัมต่อกิโลกรัม  1 ) ตาม ซันเชซบก 
 เดอ และ โลเปซ เกรโค [ 58 ] และโตรเปีย et al . [ 64 ] 
 เมื่อถึงวัยเจริญพันธุ์เป็นอิสระในขั้นตอนที่ 3 [ 31 ] , 
 พวกเขาถูกแยกจากแม่ หลังจากถึงประมาณ 0.200 กรัม เด็กและเยาวชน 
 ผู้ชายเปิดอวัยวะเพศที่ระบุสังเกต 
 ฐานของขาเดินคู่ที่ 5 [ 66 ] เยาวชนเหล่านี้ 
 รักษาภายใต้เงื่อนไขเดียวกัน คุณภาพน้ำ อุณหภูมิ แสง และให้อาหาร อธิบาย 
 
 แม่จนจุดเริ่มต้นของการทดลอง . 
 2.2 . ทดลองและชายออกแบบ 
 ชั่ง 1.85 ± 0.03 กรัม ( ตามระยะที่ 2 
 ระบบสืบพันธุ์ชายตามโลเปซเควซ และ เกรโค 
 [ 67 ] ) ได้ถูกเลือกสำหรับการทดลอง และแบบสุ่ม 
 หนึ่งในการรักษาต่อไปนี้ : 
 - andrectomy ( AGA ) : การกำจัดทั้งห้าเดินขาด้วยกัน 
กับ AG โดยตัดผ่าน ความต่างระหว่าง 
 coxa และซีฟาโลโทแรกซ์ . 
 - ควบคุม ( C ) : การกำจัดทั้งห้าเดินขาโดยการ 
 ตัดในความต่างระหว่าง coxa และฐานของ pereiopod 
 . 
 ทั้งในการรักษา หลังจากการกำจัดของ pereiopods ตัด 
 เป็นยาสลบกับเคน ( ที่ประกอบด้วย 2.5% ไลโด 
 ) และโรง cauterized เพื่อหลีกเลี่ยงการสูญเสียของเลือดและ 
 
 รับประกันการกำจัดเนื้อเยื่อเอจี . เป็นเยาวชน 
 ตายในระหว่างสัปดาห์ที่ตาม microsurgeries การทดลอง 
 ได้ริเริ่มขึ้นเมื่อหมายเลขของสัตว์ของแต่ละการรักษา 
 มีความเสถียร สิ่งมีชีวิตที่ถูกเก็บรักษาไว้ใน   60 40 30 ซม. 
 แก้วนุกูลเติม 20 ลิตร dechlorinated น้ำประปา 
 อย่างต่อเนื่องอากาศ ท่อพีวีซี ( 10 เซนติเมตรยาว 25 เซนติเมตร ) 
 และตาข่ายถุงหอมที่ถูกใช้เป็นกำบัง แต่ละตู้มี 
 ลอกเลียนแบบ และมี 4 / 5 กุ้ง ( 16.7 – 20.8 สัตว์ / m2 ) 3 ซ้ำ 
 ถูกใช้สำหรับแต่ละกลุ่มที่มีจำนวนหก 
 วาเรีย . ทดสอบภายใต้เงื่อนไขของการไม่คงที่ 
 ( ถ้ามี L : D ) และอุณหภูมิ ( 27 ± 1  
 C โดยมาร์คอาตมันพิพิธภัณฑ์สัตว์น้ำอุ่น ) เด็กและเยาวชนได้รับทุกวัน โฆษณา 
 หยาบกับพาณิชย์ tetradiskus  เม็ด elodea sp . และทั้งหมด 
 สัตว์น้ำสะอาดน้ำถูกเปลี่ยนอย่างสมบูรณ์เมื่อ 
 สัปดาห์ ระยะเวลาทดลองมี 300 วัน ซึ่งในระหว่าง 
 สัตว์เพศตามตำแหน่งของ gonopores 
 , หนัก ( ความแม่นยำ 0.01 มก. ) และอัตราการตายของพวกเขาที่บันทึกไว้ทุก 
 2 สัปดาห์การฟื้นฟูของออก pereiopods เรื่องการ gonopores 
 ของชายและผนวก masculinae การพัฒนา 
 ของ gonopores หญิง และความแตกต่างของแพทช์สีแดง 
 
 ยังบันทึก 2.3 ลักษณะทางสัณฐานวิทยาและครีบ 
 เมื่อสิ้นสุดการทดลอง สัตว์ทุกตัวมีน้ำหนัก ( ความแม่นยำ : 
 0.1 มก. ) และตามลักษณะตัวแปรวัด 
 ( ความแม่นยำ : 001 มิลลิเมตร ) ความยาวซีฟาโลโทแรกซ์ ( CL ) จาก 
 ปลายเวทีไปยังจุดสิ้นสุดของ cephalotorax ; ความยาวซีฟาโลโทแรกซ์ 
 postorbital ( พล ) จากหลังตาไปยังจุดสิ้นสุดของ 
 cephalotorax ; กว้าง pleon ( เหตุใด ) , วัดในส่วนช่องท้อง 
 2 ; ความยาว ความกว้าง และความสูงของ การ chelae ( LC , ห้องสุขาและ 
 HC ตามลำดับ ) และความยาวของแพทช์สีแดง ( LRP ) 
 เมื่อปัจจุบันน้ำหนักของ chelae ( cwe ) และ pleon ( ปแว ) ของสัตว์แต่ละ 
 ยังบันทึก ขนาดของ endopod และ exopod ครั้งแรก 
 pleopods และสอง พร้อมกับสัณฐานของ pleopod 
 ซีตี้ , วิเคราะห์คุณภาพภายใต้กล้องจุลทรรศน์แสง (  40 ) , 
 เปรียบเทียบระหว่างกลุ่ม จดลงในบัญชีนั้นในเพศชายเท่านั้น plumose เป็นปัจจุบันในขณะที่เส้น 
 
 กับความก้าวหน้าของผู้หญิงเลี้ยงง่าย ( ovigerous ) เส้นพัฒนาขึ้นใน endopod 
 , ซึ่งมีขนาดใหญ่กว่า exopod [ 53 ] . 
 หลังจากที่ถูกให้ยาสลบโดยเย็นที่  20  เป็นเวลา 15 นาทีกระดองของสัตว์แต่ละตัวก็เอาออก 
 
 และระบบสืบพันธุ์ถูกตรวจสอบเพื่อตรวจสอบขนาดญาติของพวกเขาและรูปแบบสี พวกเขา 
 แล้วได้อย่างรวดเร็วรายงาน , ชั่งน้ำหนัก และคงที่ Bouin โซลูชั่น 
 4 ชั่วโมงที่อุณหภูมิห้องเนื้อเยื่อถูกแห้งและในที่สุด 
 ฝังในพาราฟิน ส่วนที่ 5 – 7 ผมหนา ใช้ย้อม ( ย้อม 
 กับ eosin และเทคนิคแมสเซิ่น . อย่างน้อยสาม 
 สไลด์จากแต่ละกุ้งถูกตรวจสอบภายใต้กล้องจุลทรรศน์ 
 โครงสร้างของอัณฑะและกามโรคชนิด , ปริมาณสัมพัทธ์ 
 การหลั่งและองค์ประกอบของหลักและชั้นมัธยม 
 ของ spermatophore [ 32,33,67 ]มีคุณภาพ 
 วิเคราะห์ และหมายเลขของส่วนเกี่ยวกับน้ำอสุจิสายไฟภายใน
การแปล กรุณารอสักครู่..
