In vitro evaluation of The influenc

In vitro
evaluation
of
The influence of varying concentration of EOs, ORs and PC antimicrobial
efficacy was assessed against two concentrations (103 and
106 CFU/ml) of microorganisms using 96-wells (flat bottom wells) microtiter
plates (8 × 12; Sarstedt Inc. Montréal, Canada) broth dilution
assay according to a modified protocol of (Gutierrez, Barry-Ryan, &
Bourke, 2008). On the day of the experiment, the compounds were
emulsified in water at a concentration of 2.5% (w/w) using 5% of
Tween 80. The first column of the plate was filled with 200 μl of M–H
broth and columns 2 to 12 were filled with 150 μl M–H broth. Following,
58 μl of stock solution (2.5%) was added to the first column. Two
fold serial dilutions were done from columns 1 to 11. Row 12 served
as a positive control without antimicrobial. Finally, 15 μl of a bacterial
suspension (104 and 107 CFU/ml) was added to each well prior to
24 h incubation at 37 °C. Bacterial concentrations were standardized
using optical density ratios that were calculated for each specific bacterial
strain. Each rowfrom1 to 3 and 5 to 7 contained a different bacterial
strain and rows 4 and 8 served as negative turbidity control without
bacteria. On the following day, 15 μl of iodonitrotetrazolium chloride
(INT, 0.5 mg/ml in 70% ethanol) was added to each well and the
microplates were again incubated at 37 °C for 60 min, and in those
wells, where bacterial growth occurred, INT changed from clear to purple.
Bacterial growth was detected by optical density at 540 nmusing a
microtiter plate reader (ELISA reader, CLX800-BioTek Instruments) and
compared to the negative turbidity control (Valgas, de Souza, Smania, &
Smania, 2007). The lowest concentration that inhibited the growth of
the bacteria (the minimum concentration of EO where the OD of the
sample was equal to the OD of the turbidity control) was determined
as the minimal inhibitory concentration (MIC). The MIC was determined
using a bacterial concentration of 106 CFU/ml. Moreover, in
this study the maximal tolerated concentration (MTC) was also determined.
The MTC is described as the maximal concentration of antimicrobial
agents that permit the bacteria to grow without being affected
(the maximum concentration of HE where the OD of the sample was
equal to the OD of the positive control) (Oussalah et al., 2007). The
MTC was determined using a bacterial concentration of 103 CFU/ml.
The MTC investigated was undertaken in order to characterize the
level of HE that did not affect the growth of the target bacteria. Since
the ultimate goal of this experiment is to combinemultiple antimicrobial
compounds in a lower concentration the MTC investigation was important
to our research. The MIC and MTC values were determined
based on the average MIC or MTC of 3 separate growth kinetic and
were expressed in part per million (ppm or mg/l). As a control, a solution
of Tween (10%; w/w) was assayed and it did not show any growth
inhibition against target bacteria. In this study, the results obtained for
the PC were used to compare our results with other experiments published
in the literature. Each experiment was done in triplicate.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

In vitro evaluation of The influence of varying concentration of EOs, ORs and PC antimicrobialefficacy was assessed against two concentrations (103 and106 CFU/ml) of microorganisms using 96-wells (flat bottom wells) microtiterplates (8 × 12; Sarstedt Inc. Montréal, Canada) broth dilutionassay according to a modified protocol of (Gutierrez, Barry-Ryan, &Bourke, 2008). On the day of the experiment, the compounds wereemulsified in water at a concentration of 2.5% (w/w) using 5% ofTween 80. The first column of the plate was filled with 200 μl of M–Hbroth and columns 2 to 12 were filled with 150 μl M–H broth. Following,58 μl of stock solution (2.5%) was added to the first column. Twofold serial dilutions were done from columns 1 to 11. Row 12 servedas a positive control without antimicrobial. Finally, 15 μl of a bacterialsuspension (104 and 107 CFU/ml) was added to each well prior to24 h incubation at 37 °C. Bacterial concentrations were standardizedusing optical density ratios that were calculated for each specific bacterialstrain. Each rowfrom1 to 3 and 5 to 7 contained a different bacterialstrain and rows 4 and 8 served as negative turbidity control withoutbacteria. On the following day, 15 μl of iodonitrotetrazolium chloride(INT, 0.5 mg/ml in 70% ethanol) was added to each well and themicroplates were again incubated at 37 °C for 60 min, and in thosewells, where bacterial growth occurred, INT changed from clear to purple.เจริญเติบโตของเชื้อแบคทีเรียพบความหนาแน่นออปติคัลที่ 540 nmusing การอ่านแผ่น microtiter (ELISA อ่าน เครื่อง CLX800-BioTek) และเมื่อเทียบกับการควบคุมความขุ่นค่าลบ (Valgas, de Souza, Smania, &Smania, 2007) ความเข้มข้นต่ำสุดที่ห้ามการเจริญเติบโตของแบคทีเรีย (ความเข้มข้นต่ำสุดของอีโอที่ OD ของตัวอย่างได้เท่ากับ OD ที่ควบคุมความขุ่นของน้ำ) ได้กำหนดเป็นน้อยลิปกลอสไขความเข้มข้น (MIC) ไมค์ได้กำหนดใช้ความเข้มข้นจากแบคทีเรียของ 106 CFU/ml นอกจากนี้ ในศึกษานี้ยังได้กำหนดความเข้มข้นเผื่อไว้สูงสุด (MTC)MTC ที่อธิบายเป็นความเข้มข้นสูงสุดของจุลินทรีย์ตัวแทนที่ทำให้แบคทีเรียเติบโตได้โดยไม่ต้องรับผลกระทบ(สูงสุดความเข้มข้นของเขาที่มี OD ของตัวอย่างเท่ากับ OD ควบคุมบวก) (Oussalah et al., 2007) ที่MTC ถูกกำหนดโดยใช้ความเข้มข้นจากแบคทีเรียของ 103 CFU/mlMTC สอบสวนดำเนินการลักษณะนี้ระดับของเขาที่ไม่ได้มีผลต่อการเจริญเติบโตของเชื้อแบคทีเรียเป้าหมาย ตั้งแต่เป้าหมายสูงสุดของการทดลองนี้คือจุลินทรีย์ combinemultipleสารความเข้มข้นต่ำกว่าสอบสวน MTC เป็นสิ่งสำคัญการวิจัยของเรา มีกำหนดค่า MIC และ MTCตามไมค์เฉลี่ยหรือ MTC 3 แยกเจริญเติบโตเคลื่อนไหว และถูกแสดงในส่วนต่อล้าน (ppm หรือ mg/l) เป็นตัวควบคุม วิธีแก้ปัญหาof Tween (10%; w/w) was assayed and it did not show any growthinhibition against target bacteria. In this study, the results obtained forthe PC were used to compare our results with other experiments publishedin the literature. Each experiment was done in triplicate.

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ในหลอดทดลองประเมินผลของอิทธิพลของความเข้มข้นที่แตกต่างของEOS, ORs และยาต้านจุลชีพพีซีประสิทธิภาพได้รับการประเมินกับสองความเข้มข้น(103 และ106 CFU / ml) ของเชื้อจุลินทรีย์โดยใช้ 96 หลุม (หลุมด้านล่างแบน) ไมโครแผ่น(8 × 12 ซาร์สเต็ดท์ Inc . มอนทรีออ, แคนาดา) เจือจางน้ำซุปทดสอบตามโปรโตคอลแก้ไข(เตียร์, Barry-ไรอันและบอร์ก2008) ในวันของการทดสอบสารที่ถูกemulsified ในน้ำที่ระดับความเข้มข้น 2.5% โดย (w / w) โดยใช้ 5% ของTween 80 คอลัมน์แรกของแผ่นก็เต็มไปด้วย 200 ไมโครลิตร M-H น้ำซุปและคอลัมน์ 2 12 ที่เต็มไปด้วยน้ำซุป 150 ไมโครลิตร M-H ต่อไปนี้58 ไมโครลิตรของการแก้ปัญหาหุ้น (2.5%) ถูกบันทึกอยู่ในคอลัมน์แรก สองเจือจางอนุกรมพับได้ทำจากคอลัมน์ 1 ถึง 11 แถว 12 ทำหน้าที่เป็นตัวควบคุมในเชิงบวกโดยไม่ต้องยาต้านจุลชีพ สุดท้าย 15 ไมโครลิตรของแบคทีเรียระงับ(104 และ 107 CFU / ml) ถูกบันทึกอยู่ในแต่ละที่ดีก่อนที่จะมี24 ชั่วโมงบ่มที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียส ความเข้มข้นของแบคทีเรียที่ได้รับมาตรฐานโดยใช้อัตราส่วนความหนาแน่นของแสงที่ถูกคำนวณสำหรับแบคทีเรียที่เฉพาะเจาะจงในแต่ละสายพันธุ์ rowfrom1 แต่ละ 3 และ 5-7 มีแบคทีเรียที่แตกต่างกันความเครียดและแถวที่4 และ 8 ทำหน้าที่ควบคุมความขุ่นเชิงลบโดยไม่ต้องแบคทีเรีย ในวันรุ่งขึ้น 15 ไมโครลิตรคลอไรด์ iodonitrotetrazolium (INT, 0.5 mg / ml ในเอทานอล 70%) ถูกบันทึกอยู่ในแต่ละดีและmicroplates ถูกบ่มอีกครั้งที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 60 นาทีและในบรรดาหลุมที่เจริญเติบโตของแบคทีเรียที่เกิดขึ้น, INT เปลี่ยนจากที่ชัดเจนเป็นสีม่วง. การเจริญเติบโตของแบคทีเรียที่ตรวจพบโดยความหนาแน่นของแสงที่ 540 nmusing อ่านแผ่นไมโคร (อ่านวิธี ELISA, CLX800-Biotek Instruments) และเมื่อเทียบกับการควบคุมความขุ่นลบ(Valgas, de Souza, Smania และSmania 2007 ) ความเข้มข้นต่ำสุดที่สามารถยับยั้งการเจริญเติบโตของเชื้อแบคทีเรีย (ความเข้มข้นต่ำสุดของ EO ที่ OD ของตัวอย่างเท่ากับOD ของการควบคุมความขุ่น) ถูกกำหนดให้เป็นความเข้มข้นน้อยที่สุดยับยั้ง(MIC) ไมค์ถูกกำหนดโดยใช้ความเข้มข้นของแบคทีเรีย 106 CFU / ml นอกจากนี้ในการนี้การศึกษาสูงสุดเข้มข้นทน (MTC) ถูกกำหนดยัง. MTC อธิบายว่าเป็นความเข้มข้นสูงสุดของยาต้านจุลชีพตัวแทนที่อนุญาตให้แบคทีเรียที่จะเติบโตได้โดยไม่ต้องได้รับผลกระทบ(ความเข้มข้นสูงสุดของเขาที่ OD ของกลุ่มตัวอย่างได้ที่เท่าเทียมกันไป OD ของการควบคุมในเชิงบวก) (Oussalah et al., 2007) MTC ถูกกำหนดโดยใช้ความเข้มข้นของแบคทีเรีย 103 CFU / มล. MTC ตรวจสอบการได้ดำเนินการเพื่อให้ลักษณะของระดับของเขาที่ไม่ได้ส่งผลกระทบต่อการเจริญเติบโตของเชื้อแบคทีเรียเป้าหมาย เนื่องจากเป้าหมายสูงสุดของการทดลองนี้คือการ combinemultiple ยาต้านจุลชีพสารในความเข้มข้นที่ต่ำกว่าการตรวจสอบMTC เป็นสิ่งสำคัญที่การวิจัยของเรา ไมค์และค่า MTC ถูกกำหนดขึ้นอยู่กับค่าเฉลี่ยของMIC หรือ MTC เคลื่อนไหวของการเจริญเติบโตของ 3 แยกต่างหากและถูกแสดงในส่วนต่อล้านส่วน(ppm หรือ mg / l) ในฐานะที่เป็นการควบคุมวิธีการแก้ปัญหาของ Tween (10% w / w) ได้รับการวิเคราะห์และมันไม่ได้แสดงการเจริญเติบโตใด ๆ การยับยั้งเชื้อแบคทีเรียเป้าหมาย ในการศึกษานี้ผลที่ได้สำหรับเครื่องคอมพิวเตอร์ที่ถูกนำมาใช้เพื่อเปรียบเทียบผลของเรากับการทดสอบอื่น ๆ ที่เผยแพร่ในวรรณคดี การทดลองแต่ละคนได้ทำในเพิ่มขึ้นสามเท่า

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ในหลอดทดลอง


ผลของอิทธิพลของความเข้มข้นแตกต่างกันของกล้อง , ORS และ PC ประสิทธิภาพการยับยั้ง
ประเมินกับสองความเข้มข้น ( 103 และ
106 cfu / ml ) ของเชื้อจุลินทรีย์โดยใช้ 96 บ่อ ( บ่อไมโครแบนด้านล่าง )
แผ่น ( 8 × 12 ; Sarstedt อิงค์มนตรีé al แคนาดา ) broth dilution
การทดสอบตามแก้ไขพิธีสาร ( Gutierrez , แบร์รี่ ไรอัน &
Bourke , 2008 )ในวันของการทดลอง สารทั้ง 3 ชนิดในน้ำ
ที่มีความเข้มข้น 2.5% ( w / w ) ใช้ 5 %
Tween 80 คอลัมน์แรกของจานที่เต็มไปด้วย 200 μ l m ) H
ซุปและ คอลัมน์ที่ 2 ถึง 12 เต็มไปด้วย 150 μ L M - H ซุป ต่อไปนี้
58 μล. หุ้นโซลูชั่น ( 2.5% ) ถูกเพิ่มลงในคอลัมน์แรก วิธีการพับเสร็จสอง
ต่อเนื่องจากคอลัมน์ที่ 1 ถึง 11 แถว 12 เสิร์ฟ
เป็นตัวควบคุมบวกปราศจากเชื้อ . ในที่สุด , 15 μ L ของ bacterial suspension
( 104 และ 107 CFU / ml ) เพิ่มกันก่อน
บ่ม 24 ชั่วโมง ที่อุณหภูมิ 37 องศา ปริมาณแบคทีเรียมาตรฐาน
ใช้ความหนาแน่นของแสงอัตราส่วนที่คำนวณสำหรับแต่ละ
แบคทีเรียเฉพาะสายพันธุ์ แต่ละ rowfrom1 3 และ 5 ถึง 7 มีแบคทีเรีย
แตกต่างกันความเครียดและแถวที่ 4 และ 8 ทำหน้าที่ควบคุมความขุ่นลบโดยไม่
แบคทีเรีย ในวันต่อไปนี้ μ 15 ลิตร iodonitrotetrazolium คลอไรด์
( int , 0.5 mg / ml ในเอทานอล 70% ) ก็เพิ่มกัน
microplates อีกครั้งและบ่มที่ 37 องศา C นาน 60 นาที และในบ่อเหล่านั้น
ที่การเจริญเติบโตของแบคทีเรียที่เกิดขึ้น , INT เปลี่ยนจากใสสีม่วง
การเติบโตของแบคทีเรียที่ตรวจพบความหนาแน่นของแสงโดย 540 nmusing เป็น
ไมโครจานอ่าน ( ELISA Reader , clx800 biotek เครื่องมือ ) และ
เมื่อเทียบกับการควบคุมความขุ่นลบ ( valgas เดอ ซูซ่า smania & , ,
smania , 2007 ) ความเข้มข้นต่ำสุดที่ยับยั้งการเจริญของแบคทีเรีย
( ความเข้มข้นต่ำสุดของ EO ที่ OD ของ
ตัวอย่างเท่ากับ OD ของการควบคุมความขุ่น ) ตั้งใจ
เป็นสมาธิที่ยับยั้งน้อยที่สุด ( MIC ) ไมค์ตั้งใจ
โดยใช้ความเข้มข้นของเชื้อแบคทีเรีย 106 cfu / ml นอกจากนี้
ศึกษาความเข้มข้นสูงสุด ( MTC ) ได้แก่
MTC อธิบายว่า ความเข้มข้นสูงสุดของยาต้านจุลชีพ
ตัวแทนที่อนุญาตให้แบคทีเรียเติบโตโดยไม่ได้รับผลกระทบ
( ความเข้มข้นสูงสุดของเขาที่ OD ของตัวอย่าง
เท่ากับ OD ของกลุ่มควบคุมบวก ) ( oussalah et al . , 2007 )
ประกาศใช้วิเคราะห์ความเข้มข้นของเชื้อแบคทีเรีย 103 CFU / มล.
MTC ศึกษามีวัตถุประสงค์เพื่อวิเคราะห์
ระดับเขา ที่ไม่ส่งผลกระทบต่อการเจริญเติบโตของเป้าหมายที่แบคทีเรียตั้งแต่
เป้าหมายสูงสุดของการทดลองนี้ เพื่อ combinemultiple จุลชีพ
สารประกอบในระดับต่ำที่ MTC การสืบสวนสำคัญ
การวิจัยของเรา ไมค์และ MTC ค่าวิเคราะห์
ยึดไมค์เฉลี่ยหรือ MTC 3 แยกเจริญ 6
ถูกแสดงออกในส่วนในล้านส่วน ( ppm ) หรือ mg / l ) ในฐานะที่เป็นตัวควบคุมโซลูชั่น
น ( 10% ;w / w ) ซีรั่มและมันไม่ได้แสดงการเจริญเติบโต
การยับยั้งเชื้อแบคทีเรียเป้าหมาย ในการศึกษานี้ ผลการศึกษาสำหรับ
พีซีเพื่อใช้เปรียบเทียบกับผลการทดลองของเราอื่น ๆเผยแพร่
ในวรรณคดี แต่ละการทดลองทั้งสามใบ