The Comparison of Effects of Enzyme

The Comparison of Effects of Enzymes Equalized
for endo- and exo-(β-1,4)-Glucanase and endo- and exo-(β-1,4)-Xylanase Activities

Four enzyme activities were selected for an analysis
of gas production resulting from the addition of equal
enzyme activities. These were endo- and exo-glycanase
activities on two of the main polymers in plant fiber,
cellulose and xylan. The polysaccharidase activities reported
in Tables 1 and 4 were measured by the release
of reducing sugars. This analysis detects free sugars
and free reducing ends in oligosaccharides. The apparent
enzyme activity would be dominated by free sugar
release, resulting predominantly from exoglycanase activities.
In contrast, the key activity in breaking down
fiber might be expected to be endo in mechanism of
action, breaking down the polymeric structure in the
middle, rather than the ends, of chains. Such activity
would be grossly underestimated from reducing sugar
determinations. endo-(β-1,4)-Glucanase and endo-(β-1,4)-xylanase assays were therefore undertaken using
azo-CMC and azo-xylan, in which solubilized material,
including solubilized oligosaccharides, is measured by
dye release.
The standard addition in the gas incubations was
designated to be the 11.1 mL/L concentration of enzyme
A, in order to give a reasonable size of response. Other
enzyme extracts were made up such that the addition
of the same volume to the gas assay resulted in the
addition of exactly the same amount of one of the enzyme
activities (i.e., against azo-CMC, azo-xylan, CMC
by reducing sugars, or xylan by reducing sugars). The
process involved a process of iteration, whereby different
dilutions were assayed successively until the activity
in the dilution matched within ±10% of the corresponding
activity of enzyme A.
Many different extracts, including those already examined
and pure recombinant enzymes obtained from
a variety of sources, were subjected to this laborious
process. Many were eliminated, such as the A. niger
extract, because it was not possible to dissolve the enzyme
at a concentration high enough to attain the activity
of enzyme A. None of the pure recombinant enzymes
had activity sufficient to be included, even when a gas
response test of a 10-fold lower scale was developed,
because of either cost or availability. Only eight preparations,
in addition to enzyme A, remained at the end
of the process, and, of these, several were only included
in one or two incubations because one or more of their
activities were too low to match enzyme A.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

การเปรียบเทียบผลของเอนไซม์แบ่งงานสำหรับวงจรและเอกโซ-(β-1,4) คัดและ endo และเอกโซ-(β-1,4)-ไซลาเนสกิจกรรมกิจกรรมของเอนไซม์สี่ได้เลือกวิเคราะห์ของแก๊สที่เกิดจากการเพิ่มเท่ากับกิจกรรมของเอนไซม์ มี endo - และเอกโซ-glycanaseกิจกรรมสองของโพลิเมอร์หลักพืชเส้นใยเซลลูโลสและ xylan กิจกรรม polysaccharidase รายงานในตารางที่ 1 และ 4 ถูกวัด โดยปล่อยลดน้ำตาล วิเคราะห์นี้ตรวจน้ำตาลฟรีและลดฟรีสิ้นสุดใน oligosaccharides ชัดเจนเอนไซม์จะถูกครอบงำ โดยชูการ์ฟรีปล่อย ส่วนใหญ่เกิดจากกิจกรรม exoglycanaseในทางตรงข้าม กิจกรรมหลักในการแบ่งไฟเบอร์อาจจะคาดว่าจะมีวงจรในกลไกของการกระทำ การแบ่งโครงสร้างชนิดกลาง มากกว่าปลาย ของโซ่ กิจกรรมดังกล่าวจะเป็น underestimated grossly จากลดน้ำตาลdeterminations วงจร-(β-1,4)-คัดและ endo ไซลาเนส-(β-1,4) assays ได้จึงดำเนินการใช้azo CMC และ azo-xylan ในวัสดุใด solubilizedsolubilized oligosaccharides รวมทั้งการวัดโดยสีออกเป็นการเพิ่มมาตรฐานใน incubations แก๊สกำหนดให้เป็น 11.1 mL/L ความเข้มข้นของเอนไซม์A เพื่อให้มีขนาดที่เหมาะสมของผลตอบรับ อื่น ๆสารสกัดจากเอนไซม์ได้ขึ้นให้การเพิ่มของไดรฟ์ข้อมูลเดียวกันเพื่อวิเคราะห์ก๊าซทำให้เกิดการเพิ่มเหมือนกันจำนวนหนึ่งของเอนไซม์กิจกรรม (เช่น กับ azo-CMC, azo-xylan, CMCโดยลดน้ำตาล หรือ xylan ลดน้ำตาล) ที่กระบวนการที่เกี่ยวข้องกับกระบวนการของการเกิดซ้ำ โดยแตกต่างกันdilutions ถูก assayed ติด ๆ กันจนถึงกิจกรรมในการเจือจางตรงภายใน〜%ให้สอดคล้องกับกิจกรรมของเอนไซม์เอในบางส่วน รวมทั้งตรวจสอบแล้วและเอนไซม์ recombinant บริสุทธิ์ที่ได้รับจากแหล่ง ถูกต้องนี้ลำบากกระบวนการ จำนวนมากถูกตัดออก เช่นไนเจอร์อ.สารสกัดจาก เนื่องจากไม่สามารถละลายเอนไซม์นี้ที่ความเข้มข้นสูงพอที่จะบรรลุกิจกรรมของเอนไซม์เอ ไม่บริสุทธิ์ recombinant เอนไซม์มีกิจกรรมเพียงพอที่จะรวม แม้เมื่อเป็นแก๊สทดสอบตอบเป็นมาตราส่วนล่าง 10-fold ได้รับการพัฒนาเนื่องจากต้นทุนหรือความพร้อมใช้งาน เตรียมเฉพาะแปดนอกจากเอนไซม์ A ยังคงจบของกระบวนการ และ ของ หลายได้เท่านั้นรวมใน incubations หนึ่ง หรือสองเนื่องจากหนึ่ง หรือหลายของพวกเขากิจกรรมต่ำเกินไปเพื่อให้ตรงกับอ.เอนไซม์

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

การเปรียบเทียบผลของเอนไซม์เสมอภาค
สำหรับ endo- และ exo- (β-1,4) -Glucanase และ endo- และ exo- (β-1,4) -Xylanase กิจกรรมสี่เอนไซม์ถูกเลือกสำหรับการวิเคราะห์ของการผลิตก๊าซที่เกิด จากการเพิ่มขึ้นของค่าเท่ากับเอนไซม์ เหล่านี้เป็น endo- และ EXO-glycanase กิจกรรมที่สองของโพลีเมอหลักในเส้นใยพืชเซลลูโลสและไซแลน กิจกรรม polysaccharidase รายงานในตารางที่ 1 และ 4 ถูกวัดโดยการเปิดตัวของการลดน้ำตาล การวิเคราะห์นี้จะตรวจสอบน้ำตาลฟรีและสิ้นสุดการลดฟรีใน oligosaccharides เห็นได้ชัดการทำงานของเอนไซม์จะถูกครอบงำโดยน้ำตาลปล่อยผลส่วนใหญ่จากกิจกรรม exoglycanase ในทางตรงกันข้ามกิจกรรมที่สำคัญในการทำลายลงเส้นใยอาจจะมีการคาดว่าจะมี Endo ในกลไกของการกระทำที่ทำลายลงโครงสร้างพอลิเมอในตรงกลางมากกว่า ปลายโซ่ กิจกรรมดังกล่าวจะได้รับการประเมินอย่างไม่มีการลดน้ำตาลรีดิวซ์จากการตรวจวัด endo- (β-1,4) -Glucanase และ endo- (β-1,4) ตรวจ -xylanase กำลังดำเนินการจึงใช้azo-CMC และ azo-ไซแลนซึ่งวัสดุที่ละลาย, รวมทั้ง oligosaccharides ละลาย, วัดจากการเปิดตัวสีย้อม . นอกจากมาตรฐานในการฟักตัวของเชื้อก๊าซที่ถูกกำหนดให้เป็นความเข้มข้น 11.1 มิลลิลิตร / ลิตรของเอนไซม์ในเพื่อที่จะให้มีขนาดที่เหมาะสมของการตอบสนอง อื่น ๆสารสกัดจากเอนไซม์ที่ทำขึ้นดังกล่าวว่านอกจากนี้ในปริมาณเดียวกันที่จะทดสอบก๊าซมีผลในการเพิ่มขึ้นของว่าปริมาณที่เท่ากันของหนึ่งในเอนไซม์กิจกรรม (เช่นกับ azo-CMC, azo-ไซแลน, CMC โดยการลดน้ำตาล หรือไซแลนโดยการลดน้ำตาล) กระบวนการที่เกี่ยวข้องกับกระบวนการของการซ้ำโดยที่แตกต่างกันเจือจางถูก assayed อย่างต่อเนื่องจนถึงกิจกรรมในการลดสัดส่วนการจับคู่ภายใน± 10% ของผู้ที่เกี่ยวข้องการทำงานของเอนไซม์เอสารสกัดที่แตกต่างกันหลายคนรวมถึงผู้ที่ตรวจสอบแล้วและบริสุทธิ์เอนไซม์ recombinant ที่ได้รับจากความหลากหลายของ แหล่งที่มาถูกยัดเยียดให้ลำบากนี้กระบวนการ หลายคนถูกตัดออกเช่น A. ไนเจอร์สารสกัดจากเพราะมันเป็นไปไม่ได้ที่จะละลายเอนไซม์ที่มีความเข้มข้นสูงพอที่จะบรรลุกิจกรรมของเอนไซม์ A. ไม่มีเอนไซม์ recombinant บริสุทธิ์มีกิจกรรมที่เพียงพอที่จะรวมแม้เมื่อ ก๊าซทดสอบการตอบสนองของระดับ 10 เท่าต่ำกว่าได้รับการพัฒนา, เพราะทั้งค่าใช้จ่ายหรือความพร้อม เพียงแปดเตรียมการนอกเหนือไปจากเอนไซม์ยังคงอยู่ในตอนท้ายของกระบวนการและของเหล่านี้หลายคนเท่านั้นรวมในหนึ่งหรือสองฟักตัวของเชื้อเพราะหนึ่งหรือมากกว่าหนึ่งของกิจกรรมที่ต่ำเกินไปเพื่อให้ตรงกับการทำงานของเอนไซม์เอ

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

การเปรียบเทียบผลของเอนไซม์เอนโดและแก้วหู
สำหรับ exo - บีตา - 1 , 4 ) - glucanase และ Endo - exo - บีตา - 1 , 4 ) - กิจกรรมเอนไซม์ไซลาเนส

4 กิจกรรมสุ่มการวิเคราะห์
ของการผลิตก๊าซที่เกิดจากกิจกรรมของเอนไซม์เท่ากับเพิ่ม

เหล่านี้เป็นเอ็นโด - exo glycanase
กิจกรรมบนสองของพอลิเมอร์หลักในเส้นใยพืช
เซลลูโลส และไซแลน .กิจกรรม polysaccharidase รายงาน
ในตารางที่ 1 และ 4 ได้ถูกวัดโดยปล่อย
ลดน้ำตาลได้ การวิเคราะห์นี้จะตรวจจับ
น้ำตาลฟรีและฟรีการสิ้นสุดในเทคโนโลยี . เอนไซม์จะถูกครอบงำโดยชัดเจน

ปล่อยน้ำตาลฟรี เป็นผลส่วนใหญ่จากกิจกรรม exoglycanase .
ส่วนกิจกรรมหลักในการแบ่ง
เส้นใยอาจจะคาดว่าจะจบในกลไกของ
ปฏิบัติการ แบ่งโครงสร้างของพอลิเมอร์ใน
กลางมากกว่าปลายของโซ่ เช่นกิจกรรม
จะไม่ประเมินจากปริมาณน้ำตาล
determinations . เอ็นโด - บีตา - 1 , 4 ) - glucanase และ Endo - บีตา - 1 , 4 ) - เนส ) ดังนั้นการใช้
: : CMC และไซแลนที่สร้างวัสดุ
รวมทั้งสร้างเทคโนโลยี วัดด้วย

สีปล่อย นอกจากมาตรฐานในก๊าซ incubations คือ
เขตเป็น 11.1 มิลลิลิตร / ลิตร ความเข้มข้นของเอนไซม์
, เพื่อให้ขนาดที่เหมาะสมของการตอบสนอง สารสกัดเอนไซม์อื่น
ถูกสร้างขึ้นดังกล่าวว่า นอกจาก
ของปริมาณเดียวกันกับก๊าซโดยส่งผลให้เกิด
นอกจากนี้ ตรงเดียวกัน ปริมาณของเอนไซม์
กิจกรรมต่างๆ ( เช่น กับอะโซ CMC , เอโซไซ , CMC
โดยลดน้ำตาล หรือไซ โดยลดน้ำตาล )
กระบวนการเกี่ยวข้องกระบวนการทำซ้ำโดยวิธีการต่าง ๆมีกิจกรรมอย่างต่อเนื่อง จนปริมาณ

ในการจับคู่ภายใน± 10% ของกิจกรรมของเอนไซม์ที่
.
หลายสารสกัด รวมทั้งได้ตรวจสอบและเอนไซม์บริสุทธิ์ที่ได้จากโคลน

ความหลากหลายของแหล่งที่มาจะถูกกระบวนการยากเย็นแสนเข็ญ
นี้ หลายคนถูกตัดออก เช่น A . niger
แยก เพราะมันเป็นไปไม่ได้ที่จะละลายเอนไซม์
มีความเข้มข้นสูงเพียงพอที่จะบรรลุกิจกรรมของ เอนไซม์ A ไม่มี

มีกิจกรรมเอนไซม์บริสุทธิ์โปรตีนเพียงพอที่จะถูกรวม แม้ว่าก๊าซ
ตอบสนองการทดสอบของ 10 เท่าระดับล่างถูกพัฒนาขึ้น
,เพราะทั้งต้นทุน หรือห้องว่าง แค่แปดเตรียม
นอกจากเอนไซม์ , อยู่ที่ปลาย
ของกระบวนการ และ เหล่านี้ หลายคนรวมเฉพาะ
ในหนึ่งหรือสอง incubations เนื่องจากหนึ่งหรือมากกว่าหนึ่งของกิจกรรมของพวกเขา
ต่ำเกินไปเพื่อให้ตรงกับเอนไซม์ .