This limits the accurate detection

This limits the accurate detection of the target sequence
and necessitates methodologies that assess the specificity of the
amplification products. To this end the use of SYBR Green enable
us to perform a Melting point analysis, also referred to as dissociation
curve analysis, is frequently used to monitor the homogeneity
of the qPCR products. During this procedure, the fluorescence
intensity emitted by SYBR Green intercalated into PCR products
is recorded at temperatures rising in small increments from 65 C
to 95 C. This increasing temperature gradually denatures dsDNA,
which induces a consequent reduction of the fluorescent signal,
which appears as a sharp drop in signal intensity when both
strands separate completely. As the Tm of a DNA duplex is dependent
upon length and base composition, the number of points of
inflection in the melting curve indicates the number of PCR products
(including the primer-dimers) generated. An acceptable dissociation
curve has a single peak (i.e. one PCR product), while the
occurrence of multiple peaks indicates the presence of non-specific
amplification products.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

นี้จำกัดการตรวจสอบความถูกต้องของลำดับเป้าหมายและวิธีที่ประเมิน specificity ของ necessitatesขยายผลิตภัณฑ์ การสิ้นสุดนี้ใช้ SYBR Greenเราทำการวิเคราะห์มีจุดหลอมเหลว และยังหมายถึง dissociationวิเคราะห์ทางโค้ง มักใช้การตรวจสอบ homogeneityผลิตภัณฑ์ qPCR การ ในระหว่างขั้นตอนนี้ การ fluorescenceความเข้มที่เปล่งออกมา โดย SYBR Green intercalated เป็นผลิตภัณฑ์ PCRบันทึกที่อุณหภูมิที่เพิ่มขึ้นทีละน้อยจาก 65 Cการซี 95 อุณหภูมิที่เพิ่มขึ้นนี้ค่อย ๆ denatures dsDNAซึ่งก่อให้เกิดการลดทอดสัญญาณฟลูออเรสซึ่งปรากฏเป็นวางคมชัดความเข้มของสัญญาณเมื่อทั้งสองstrands แยกกันอย่างสมบูรณ์ เป็น Tm ของเพล็กซ์เป็นดีเอ็นเอขึ้นตามความยาวและฐานองค์ประกอบ จำนวนคะแนนของการผันคำในโค้งละลายระบุจำนวนผลิตภัณฑ์ PCR(รวมถึงรองพื้น-dimers) ที่สร้างขึ้น Dissociation ที่ยอมรับได้เส้นโค้งมีช่วงเดียว (เช่น PCR ผลิตภัณฑ์ ขณะเกิดยอดหลายบ่งชี้ก็ไม่เฉพาะเจาะจงขยายผลิตภัณฑ์

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

นี้จะช่วย จำกัด
การตรวจสอบความถูกต้องของลำดับเป้าหมายและวิธีการที่จำเป็นต้องประเมินลักษณะเฉพาะของผลิตภัณฑ์เครื่องขยายเสียง
ด้วยเหตุนี้การใช้สีเขียว SYBR
ช่วยให้เราสามารถดำเนินการวิเคราะห์จุดหลอมเหลวยังเรียกว่าแยกออกจากกันการวิเคราะห์โค้งมักจะถูกใช้ในการตรวจสอบความสอดคล้องกลมกลืนของผลิตภัณฑ์qPCR ในระหว่างขั้นตอนนี้เรืองแสงความเข้มปล่อยออกมาจากสีเขียว SYBR อธิกมาสเป็นผลิตภัณฑ์ PCR จะถูกบันทึกไว้ในอุณหภูมิที่เพิ่มขึ้นทีละน้อยจาก 65? C ถึง 95? C อุณหภูมินี้เพิ่มขึ้นเรื่อย denatures dsDNA, ซึ่งก่อให้เกิดการลดผลเนื่องมาจากสัญญาณเรืองแสงที่ปรากฏเป็นลดลงในความเข้มของสัญญาณเมื่อทั้งสองเส้นแยกสมบูรณ์ ในฐานะที่เป็น Tm เพล็กซ์ของดีเอ็นเอจะขึ้นอยู่กับความยาวและองค์ประกอบฐานจำนวนจุดของโรคติดเชื้อในโค้งละลายระบุจำนวนของผลิตภัณฑ์วิธีPCR (รวมทั้งไพรเมอร์ dimers) สร้าง แยกออกจากกันยอมรับโค้งมียอดเดียว (เช่นผลิตภัณฑ์ PCR หนึ่ง) ในขณะที่การเกิดขึ้นของยอดเขาหลายแสดงว่าไม่ใช่เฉพาะผลิตภัณฑ์เครื่องขยายเสียง

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

นี้ จำกัด การตรวจสอบความถูกต้องของชิ้นงานและวิธีการที่ประเมินการศึกษาลำดับ

( ความจำเพาะของผลิตภัณฑ์ . ด้วยเหตุนี้การใช้สีเขียว SYBR ให้
เรามาหลอมการวิเคราะห์จุดยังเรียกว่าการวิเคราะห์โค้งหวิว
, มักใช้เพื่อตรวจสอบความสม่ำเสมอของผลิตภัณฑ์ qpcr
. ในระหว่างขั้นตอนนี้เรืองแสงด้วย
ความเข้มที่ปล่อยออกมาโดย SYBR กรีน ) ลงในผลิตภัณฑ์ PCR
เป็นบันทึกที่อุณหภูมิสูงขึ้นทีละน้อย จาก 65  C
95  C อุณหภูมิที่เพิ่มขึ้นนี้ค่อย ๆ dsdna ผู้ผลิต , ซึ่งก่อให้เกิดการลดลงของ

เนื่องจากสัญญาณฟลูออเรสเซนต์ ซึ่งปรากฏเป็นลดลงเมื่อความเข้มสัญญาณทั้ง
เส้นแยกกันโดยสิ้นเชิง เป็น TM ของดีเอ็นเอขึ้นอยู่กับ
ดูเพล็กซ์ตามความยาวของฐาน จำนวนจุดของ
การผันคำในการหลอมละลายเส้นโค้งที่ระบุหมายเลขของ PCR
( รวมถึงสายผลิตภัณฑ์รองพื้น ) สร้างขึ้น เส้นโค้งการยอมรับ มียอดเดียว
( เช่นผลิตภัณฑ์ PCR ) ในขณะที่
เกิดยอดหลายบ่งชี้สถานะของสินค้า ( เฉพาะ