In the first assay was used NEW obtained from 0.1% w/v of sodium
chloride or sodium bicarbonate solutions in tap water against
P. fluorescens NCPPB 1964, P. marginalis 667, and P. syringae PS1 as
indicator strains; electrolyzed tap water without salts was used as a
control. Each sample of NEW, 9.9 ml, was contaminated with 0.1 ml
of bacterial suspension having OD600 ¼ 0.3 ± 0.05 (about at
8 log cfu/ml). Contaminated NEW samples were incubated at 4 C
for 2 and 5 min afterwards 0.1 ml was diluted in 9.9 ml of sterile
saline solution to dilute free chlorine potentially still having antimicrobial
activity. Surviving bacteria were enumerated after incubation
(24 h at 30 C) of PCA plates seeded with decimal dilution, in
sterile saline, of 1:100 NEW samples. Each strain was assayed three
times, independently (N ¼ 3). Based on results, 14 spoilage Pseudomonas
strains, as well as, P. aeruginosa DSM939, were used for an
additional in vitro assay by using the most probable number (MPN)
method for enumeration of viable microbial cells. Three samples of
NEW, produced from potassium chloride as electrolyte, were prepared
after 2 h of electrolysis (4000 mg/L free chlorine, pH ¼ 8.2,
ORP ¼ 846 mV). The NEW, diluted to 400, 200, and 100 mg/L of free
chlorine, was inoculated as previously reported and incubated at
4 C for 2 min. Inoculated NEW samples were decimally diluted
four times in mPCB. Occurrence of visible microbial growth was
recorded after 24 h at 25 C; un-treated bacterial suspensions were
used as a positive control. Absorbance value of test tubes without
visible growth was recorded at 600 nm and compared with uninoculated
(blank) tubes. Test tubes were considered positive
when OD600 readings were 0.050 higher than blank tubes. Calculation
of MPN was obtained comparing the results with MPN tables
(Man, 1983). In order to avoid false negative results deriving from
chlorine stressed cells, test tubes were incubated for additional 24 h
at 30 C. In this case the assay was performed a single time with
three repetition for each strain (N ¼ 3).
ในวิธีแรกที่ใช้ใหม่ได้จาก 0.1 % W / V ของโซเดียมคลอไรด์ โซเดียมไบคาร์บอเนต หรือโซลูชั่น
P . fluorescens ในน้ำประปากับ ncppb 2507 , หน้า marginalis 667 และหน้า syringae PS1 เป็น
บ่งชี้สายพันธุ์ ; เครื่องแยกสารประกอบน้ำประปาไม่มีเกลือถูกใช้เป็น
ควบคุม แต่ละตัวอย่างของมล ใหม่ , 9.9 , ถูกปนเปื้อนด้วย 0.1 ml
ของ bacterial suspension มี od600 ¼ 0.3 ± 0.05 ( เรื่อง
8 log CFU / ml ) ตัวอย่างใหม่ที่อุณหภูมิ 4 C
2 และ 5 นาทีหลังจากนั้น 0.1 มิลลิลิตร เจือจางใน 1 มิลลิลิตร หมัน
น้ำเกลือเจือจางคลอรีนที่อาจยังคงมีฤทธิ์ต้านจุลชีพ
ที่รอดตายแบคทีเรียถูกระบุหลังจากบ่ม
( 24 H 30 C ) ของ PCA จานเมล็ดกับทศนิยมเจือจางในน้ำเกลือปลอดเชื้อ
, 100 ตัวอย่างใหม่แต่ละสายพันธุ์มีปริมาณ 3
ครั้ง อิสระ ( N ¼ 3 ) บนพื้นฐานของผล 14 การเน่าเสียของ
สายพันธุ์ รวมทั้ง P . aeruginosa dsm939 ถูกใช้สำหรับ
เพิ่มเติมในนอร์เวย์ โดยใช้หมายเลขที่น่าจะเป็น ( MPN )
วิธีสำหรับการใช้จุลินทรีย์เซลล์ สามตัวอย่างของ
ใหม่ ผลิตจากโพแทสเซียมคลอไรด์เป็นอิเล็กโทรไลต์ถูกเตรียม
หลังจาก 2 ชั่วโมงด้วยไฟฟ้า ( 4 , 000 มก. / ล. ฟรีคลอรีน , พีเอช¼ 8.2 ,
ORP ¼ 846 MV ) ใหม่ , ประมาณ 400 , 200 และ 100 มก. / ล. คลอรีน
เป็นเชื้อตามที่รายงานก่อนหน้านี้ และบ่มที่
4 C 2 นาทีจากตัวอย่างใหม่ decimally เจือจาง
4 ครั้งใน mpcb . การมองเห็นได้จากการบันทึกหลังถูก
24 ชั่วโมง ที่ 25 C ; และรักษาแบคทีเรียแขวนลอยอยู่
ใช้เป็นตัวควบคุมบวก ค่าการดูดกลืนแสงของหลอดทดลองโดยไม่
การเจริญเติบโตมองเห็นเป็นบันทึกที่ 600 nm และเทียบกับการ
( ว่าง ) หลอด หลอดทดสอบถูกถือว่าบวก
เมื่ออ่าน od600 เป็น 0.050 สูงกว่าหลอดเปล่า การคำนวณ
ของเอ็มพีได้เปรียบเทียบผลลัพธ์กับ MPN ตาราง
( ชาย , 1983 ) เพื่อหลีกเลี่ยงผลลัพธ์อันเกิดจาก
ลบปลอมคลอรีนเน้นเซลล์หลอดทดสอบถูกบ่มเพิ่ม 24 H
ที่ 30 C ในกรณีนี้ ( แสดงเวลาเดียวกับ
3 ซ้ำสำหรับแต่ละสายพันธุ์ ( N ¼
3 )
การแปล กรุณารอสักครู่..