For enzyme activity assay, 10 g of

For enzyme activity assay, 10 g of sarcocarp samples around the
infection spots from 15 fruits were ground in mortar using liquid
nitrogen. All the enzymes were extracted at 4 C and the absorbance
was determined by UV-160 spectrophotometer (Shimadzu,
Japan). The activity of phenylalanine ammonia-lyase (PAL) was
detected following the methods of Yao and Tian (2005). PAL was
extracted with 25 mL of 0.05 mol/L sodium borate buffer (pH 8.8,
containing 5 mmol/L b-mercaptoethanol).1 mL enzyme extractwas
incubated with 2 mL of borate buffer (50 mmol/L, pH 8.8) and 1 mL
of L-phenylalanine (20 mmol/L) for 60 min at 37 C. The reaction
was stopped with 1 mL HCl (1 mol/L). PAL activity was determined
by the production of cinnamate, which was measured by absorbance
at 290 nm. The activity of polyphenoloxidase (PPO) was
assayed following the methods of Tian, Xu, Jiang, and Qin (2002).
PPO was extracted with 25 mL 0.2 mol/L sodium phosphate buffer
(pH 6.4). For enzyme detection, 3 mL 0.5 mol/L 4-methylcatechol in
0.2 mol/L sodium phosphate buffer (pH 6.4) and 100 mL enzyme

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

สำหรับการทดสอบการทำงานของเอนไซม์, 10 กรัมตัวอย่าง sarcocarp
รอบจุดที่ติดเชื้อจาก15
ผลไม้มาบดในครกใช้ของเหลวไนโตรเจน เอนไซม์ทั้งหมดถูกสกัดที่ 4
องศาเซลเซียสและดูดกลืนแสงถูกกำหนดโดยspectrophotometer UV-160 (Shimadzu,
ญี่ปุ่น) กิจกรรมของ phenylalanine แอมโมเนียไอเลส (PAL)
ได้รับการตรวจพบต่อไปนี้วิธีการของยาวและท่าเตียน(2005) PAL
ถูกสกัดด้วย25 มล 0.05 โมล / ลิตรโซเดียมบอเรตบัฟเฟอร์ (pH 8.8
ที่มี 5 มิลลิโมล / ลิตร B-mercaptoethanol) 0.1 มิลลิลิตรเอนไซม์ extractwas
บ่ม 2 มิลลิลิตรของบัฟเฟอร์ borate (50 มิลลิโมล / ลิตรค่า pH 8.8) และ 1
มิลลิลิตรของL-phenylalanine (20 มิลลิโมล / ลิตร) เป็นเวลา 60 นาทีที่ 37 องศาเซลเซียส ปฏิกิริยาหยุด 1 มิลลิลิตร HCl (1 โมล / ลิตร)
กิจกรรม PAL
ถูกกำหนดโดยการผลิตของcinnamate
ซึ่งวัดจากการดูดกลืนแสงที่290 นาโนเมตร กิจกรรมของพอลีฟีนนี้ (PPO) ถูก
assayed ต่อไปนี้วิธีการของเทียนที่ซูเจียงและฉิน (2002).
PPO ถูกสกัดด้วย 25 มิลลิลิตร 0.2 โมล / ลิตรโซเดียมฟอสเฟตบัฟเฟอร์
(pH 6.4) สำหรับการตรวจสอบการทำงานของเอนไซม์ 3 มิลลิลิตร 0.5 โมล / ลิตร 4 methylcatechol ใน
0.2 โมล / ลิตรโซเดียมฟอสเฟตบัฟเฟอร์ (pH 6.4) และ 100 มิลลิลิตรเอนไซม์

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

สำหรับกิจกรรมของเอนไซม์ต่อ 10 กรัม sarcocarp ตัวอย่างรอบ
การติดเชื้อจุดจาก 15 ผล พื้นดินในมอร์ต้าร์โดยใช้ไนโตรเจนเหลว

เอนไซม์เป็นสารสกัดที่ 4  C และค่า
ถูกกําหนดโดย uv-160 Spectrophotometer ( Shimadzu
, ญี่ปุ่น ) กิจกรรมของฟีนิลอะลานีนแอมโมเนีย lyase ( PAL ) คือ
ตรวจพบตามวิธีการ และ เถียนเหยา ( 2005 ) เพื่อนคือ
สกัดด้วย 25 มิลลิลิตร 0.05 mol / L โซเดียมบอเรตบัฟเฟอร์ pH 8.8 ,
ที่ 5 มิลลิโมล / ลิตร b-mercaptoethanol ) 1 ml บ่มเอนไซม์ extractwas
2 ml ของบอเรตบัฟเฟอร์ ( 50 มิลลิโมล / ลิตรพีเอช 8.8 ) และ 1 ml
ของฟีนิลอะลา ( 20 mmol / L ) สำหรับ 60 นาทีที่ 37  C . ปฏิกิริยา
ถูกหยุดด้วย HCl 1 มล. / ล. 1 mol ) กิจกรรมเพื่อนตั้งใจ
โดยการผลิตของซินนาเมต ซึ่งวัดจากค่า
ที่ 290 nm .กิจกรรมของเอนไซม์โพลีฟีนอลอ ซิเดส ( PPO ) คือ
ดังต่อไปนี้วิธีการของเทียน ซู เจียง และฉิน ( 2002 ) .
PPO สาร 25 มล. 0.2 mol / l
( ฟอสเฟตบัฟเฟอร์ pH 6.4 ) การตรวจหาเอนไซม์ 3 ml 0.5 โมลต่อลิตร 4-methylcatechol ใน 0.2 mol / l
โซเดียมฟอสเฟตบัฟเฟอร์ pH 6.4 ) และเอนไซม์ 100 มล.