Yeast inoculum preparationCultures

Yeast inoculum preparation
Cultures of K. marxianus IMB 1, IMB 2, IMB 3, IMB 4, IMB 5 and S.
cerevisiae D5A were grown in YPD media containing 10 g/L yeast
extract, 20 g/L peptone, and 50 g/L dextrose (Dowe and McMillan,
2001). A loopful of each yeast strain was taken from a slant and
used to inoculate 100 mL of YPD media in a 250 mL baffled flask.
The media was sterilized by filtration through a 0.22 lm filter
(500 mL Sterile Bottletop Filter, Corning Life Sciences, Big Flats,
NY) and the flasks were autoclaved without media at 121 C. The
inoculum flasks were topped with aerobic stoppers (Bugstopper,
Whatman Inc., Florham Park, NJ) and incubated on a rotary shaker
(MaxQ 4450, Thermo Scientific, Dubuque, IA) at 250 rpm for 16 h.
K. marxianus strains were incubated at 45 C and S. cerevisiae D5A
was incubated at 37 C. Samples of the inoculum were taken and
diluted with deionized water to achieve an absorbance between
0.5 and 1.0 at a wavelength of 600 nm on a UV–vis spectrophotometer
(Cary 50 Bio, Varian Inc., Palo Alto, CA). The absorbance and
dilution of each inoculum were recorded and used to determine
optical cell density in the inoculum. The yeast cells were separated
from the inoculum media by centrifuging at 3500 rpm for 5 min,
washed with deionized water twice, and resuspended in deionized
water to achieve an optical density of 50 to provide an initial optical
density of 0.5 when using 1 mL of inoculum to each shake flask
SSF.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ยีสต์เตรียม inoculum
marxianus วัฒนธรรมคุณ IMB 1, IMB 2, IMB 3, IMB 4, IMB 5 และ S.
cerevisiae D5A ถูกปลูกในสื่อ YPD ประกอบด้วยยีสต์ 10 กรัม/L
สารสกัด peptone 20 g/L และขึ้น 50 g/L (Dowe และ McMillan,
2001) Loopful ของแต่ละต้องใช้ยีสต์ได้มาจากการเอียง และ
ใช้ฉีด 100 มล YPD สื่อในความหนาว baffled 250 mL.
สื่อถูก sterilized โดยการกรองผ่านตัวกรอง lm 0.22
(500 mL กระบอกกรอง Bottletop วิทยาศาสตร์สุขภาพคอร์นทำ แฟลตขนาดใหญ่,
NY) และน้ำ autoclaved โดยสื่อที่ 121 c
นำ inoculum ได้รสจุกแอโรบิก (Bugstopper,
Whatman Inc., Florham Park, NJ) และ incubated ในเชคเกอร์โรตารี่
(MaxQ 4450 วิทยาศาสตร์เทอร์โม ดู IA) ที่ 250 rpm สำหรับ 16 h.
K สายพันธุ์ marxianus มี incubated ที่ 45 C และ S. cerevisiae D5A
ถูก incubated ที่ 37 C. ตัวอย่างของ inoculum ถูกถ่าย และ
ทำให้เจือจาง ด้วยน้ำ deionized จะบรรลุการ absorbance ระหว่าง
0.5 และ 1.0 ที่ความยาวคลื่นของ 600 nm ในเครื่องทดสอบกรดด่าง UV – vis
(แครีแกรนต์ 50 ชีวภาพ แล้วแต่กำหนด Inc. ดัลลัส CA) Absorbance ที่ และ
เจือจางของ inoculum แต่ละถูกบันทึก และใช้
ความหนาแน่นเซลล์แสงใน inoculum มีแบ่งเซลล์ยีสต์
จากสื่อ inoculum โดย centrifuging ที่ 3500 รอบต่อนาทีสำหรับ 5 นาที,
ล้าง ด้วยน้ำ deionized สองครั้ง และ resuspended ใน deionized
น้ำเพื่อให้มีความหนาแน่นออปติคอล 50 เพื่อให้การเริ่มต้นแสง
ความหนาแน่น 0.5 เมื่อใช้ 1 mL ของ inoculum หนาวสั่นแต่ละ
SSF

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

เชื้อยีสต์เตรียม
วัฒนธรรม K. marxianus IMB 1 IMB 2 IMB 3 IMB 4 IMB 5 และ S.
cerevisiae D5A มีปลูกอยู่ในสื่อ YPD ที่มี 10 กรัม / ลิตรยีสต์
สกัด, 20 กรัม / ลิตรเปปโตนและ 50 g / L เดกซ์โทรส (Dowe และ McMillan,
2001) loopful ของยีสต์แต่ละถูกนำมาจากเอียงและ
ใช้ในการฉีดวัคซีน 100 มลของสื่อ YPD ใน 250 มิลลิลิตรงงงันขวด
สื่อที่ได้รับการฆ่าเชื้อโดยการกรองผ่านตัวกรอง 0.22 LM
(500 มิลลิลิตรหมัน Bottletop กรอง Corning วิทยาศาสตร์สิ่งมีชีวิตขนาดใหญ่ แฟลต,
NY) และขวดที่นึ่งฆ่าเชื้อโดยไม่ต้องสื่อที่ 121 องศาเซลเซียส
ขวดหัวเชื้อที่ถูกราดด้วย Stoppers แอโรบิก (Bugstopper,
เบอร์อิงค์ในฟลอร์แฮมพาร์ค, นิวเจอร์ซีย์) และบ่มในเครื่องปั่นหมุน
(MaxQ 4450, เทอร์โมวิทยาศาสตร์, Dubuque, IA) ที่ 250 รอบต่อนาทีเป็นเวลา 16 ชั่วโมง
K. สายพันธุ์ marxianus ไปบ่มที่อุณหภูมิ 45 องศาเซลเซียสและ S. cerevisiae D5A
ถูกบ่มที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียส ตัวอย่างเชื้อที่ได้รับการถ่ายและ
เจือจางด้วยน้ำกลั่นปราศจากไอออนเพื่อให้บรรลุการดูดกลืนแสงระหว่าง
0.5 และ 1.0 ที่ความยาวคลื่น 600 นาโนเมตรใน UV-Vis spectrophotometer
(50 แครีไบโอ Varian อิงค์พาโลอัลโต, แคลิฟอร์เนีย) การดูดซับและ
ลดสัดส่วนของแต่ละหัวเชื้อที่ถูกบันทึกไว้และใช้ในการกำหนด
ความหนาแน่นของเซลล์แสงในหัวเชื้อ เซลล์ยีสต์ถูกแยกออก
จากสื่อเชื้อโดยการปั่นแยกที่ 3500 รอบต่อนาที 5 นาที
ล้างด้วยน้ำกลั่นปราศจากไอออนสองครั้งและ resuspended ในปราศจากไอออน
น้ำเพื่อให้เกิดความหนาแน่นของแสงของ 50 เพื่อให้แสงเริ่มต้น
ความหนาแน่นของ 0.5 เมื่อใช้ 1 มิลลิลิตรของเชื้อ แต่ละขวดเขย่า
SSF

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

การเตรียมเชื้อยีสต์
วัฒนธรรมของ K . marxianus แรกแรกแรก 1 , 2 , 3 , 4 และ 5 IMB , IMB S .
d5a สายพันธุ์ปลูกใน ypd สื่อบรรจุ 10 g / l
ยีสต์สกัด 20 กรัมต่อลิตร ตามลำดับ และ 50 กรัม / ลิตร ( dowe เดกซ์โทรส และ McMillan
2001 ) เป็น loopful ของแต่ละสายพันธุ์ยีสต์ที่ได้จากเอียงและ
เคยฉีดวัคซีน 100 มิลลิลิตรของ ypd สื่อใน 250 ml ขวด
งง .สื่อถูกฆ่าเชื้อโดยการกรองผ่าน 0.22 LM กรอง
( 500 มล. เป็นหมันบอตเทิลท็อปกรอง คอร์น วิทยาศาสตร์เพื่อชีวิต บิ๊กแฟลต
NY ) และขวดถูกสังเคราะห์โดยสื่อที่ 121  C
3 ขวดถูกราดด้วยแอโรบิก stoppers ( bugstopper
whatman , อิงค์ , florham Park , NJ ) โดยใน เป็นเครื่องปั่น Rotary (
maxq 4450 , เทอร์โมวิทยาศาสตร์ , Dubuque , IA ) ที่ 250 รอบต่อนาที 16 H .
Kสายพันธุ์ marxianus อุณหภูมิ 45  C และ S . cerevisiae d5a
ถูกบ่มที่ 37  C ตัวอย่างเชื้อถูกเจือจางด้วยน้ำและ
คล้ายเนื้อเยื่อประสานเพื่อให้เกิดการดูดกลืนแสงระหว่าง
0.5 และ 1.0 ที่ความยาวคลื่น 600 nm ใน UV Spectrophotometer ( 2
( - 50 ชีวภาพ , เครื่องอิงค์ , พาโลอัลโต แคลิฟอร์เนีย ) นและ
เจือจางของแต่ละสายพันธุ์ที่ถูกบันทึกไว้และใช้ในการตรวจสอบ
แสงในเซลล์ของเชื้อ . เซลล์ยีสต์ที่แยกจากเชื้อ
สื่อสารที่ 3500 รอบต่อนาที เป็นเวลา 5 นาที ล้างด้วยน้ำคล้ายเนื้อเยื่อประสาน
2 ครั้ง และ resuspended ในคล้ายเนื้อเยื่อประสาน
น้ำเพื่อให้บรรลุความหนาแน่นของเลนส์ 50 เพื่อให้มีความหนาแน่นของแสง
เริ่มต้น 0.5 เมื่อใช้ปริมาณ 1 มิลลิลิตรของแต่ละขวดเขย่า
SSF .