2.3. Analytical methodsViable cells

2.3. Analytical methods
Viable cells in the culture medium were counted by using
classical microbiological techniques. Following serial dilution of the
must, samples were plated on YPD agar (1% yeast extract, 2%
peptone, 2% glucose and 2% agar) and counted after incubation at
28 C for two days. The fermentation process was monitored via the
amount of CO2 released as a measure of weight loss (Bely,
Sablayrolles, & Barre, 1990). Enological parameters were determined according with the European Union Official Methods (CEE,
1990). Sugars (glucose and fructose), succinic acid, ammonia and
urea were quantified with specific enzymatic kits from BoehringereMannheim (Germany). The major volatile compounds and
polyols were quantified in a gas chromatograph HP 6890 Series II
equipped with a capillary column with molten silica CP-WAX 57 CB
(50 m in length, 0.25 mm in internal diameter and 0.4 mm in coating
thickness) and a Flame Ionization Detector. The chromatographic
conditions and sample preparation were described by Peinado,
Moreno, Munoz, Medina, and Moreno (2004) ~ . The identification
and quantification of the major volatile compounds performed by
means of the standards were submitted to the same treatment as
the analysed samples. Amino acids were identified and quantified
by previously passing the samples through a Millipore filter of
0.22 mm pore diameter and then using the method of Botella, Perez-

Rodríguez, Domecq, and Valpuesta (1990) for separation and
quantitation of their dansyl derivatives (Tapuhi, Schmidt, Lindner,
& Karger, 1981) on a Spectra-Physics P200 HPLC instrument. The
chromatograph used a 15  0.4 cm reversed C18 column packed
with Spherisorb ODS2 resin of 5 mm particle size from Tracer
Analítica (Barcelona, Spain) that was thermostated at 25 C and
coupled to an Sp 8450 UVeVis detector for measurement of the
absorbance at 254 nm, using 5 mM L-norleucine as an internal
standard. Amino acids were identified by comparing their relative
retention times to those of standards from SigmaeAldrich (Germany). Data were acquired and processed by using the software

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2.3 การวิเคราะห์วิธีเซลล์ทำงานได้ในกลางวัฒนธรรมนับได้ โดยใช้เทคนิคทางจุลชีววิทยาที่คลาสสิก หลังเจือจางประจำของการต้อง ตัวอย่างถูกชุบบน YPD agar (1% ยีสต์สกัด 2%peptone กลูโคส 2% และ 2% agar) และตรวจนับหลังจากบ่มที่C 28 สองวัน การหมักถูกตรวจสอบผ่านการปริมาณ CO2 ที่ปล่อยออกมาเป็นการวัดน้ำหนัก (BelySablayrolles, & Barre, 1990) Enological พารามิเตอร์ถูกกำหนดตามวิธีทางของสหภาพยุโรป (ซีปี 1990) น้ำตาล (กลูโคสและฟรักโทส), กรด แอมโมเนีย และยูเรียมี quantified โดยเฉพาะชุดที่เอนไซม์ในระบบจาก BoehringereMannheim (เยอรมนี) สารระเหยสำคัญ และpolyols ถูก quantified ใน chromatograph แก๊ส HP 6890 ชุด IIพร้อมคอลัมน์เส้นเลือดฝอยที่มีซิลิก้าหลอมละลายขี้ผึ้ง CP CB 57(50 เมตรในความยาว 0.25 มม.เส้นผ่านศูนย์กลางภายใน และ 0.4 มม.เคลือบความหนา) และเครื่องตรวจ จับการ Ionization เปลวไฟที่ การ chromatographicเงื่อนไขและการเตรียมตัวอย่างได้อธิบายไว้ โดย PeinadoMoreno น่าโชว์ เมดิน่า และ Moreno (2004) ~ รหัสและนับของสารระเหยที่สำคัญดำเนินการโดยส่งมาที่การรักษาเดียวกันเป็นวิธีการมาตรฐานตัวอย่าง analysed กรดอะมิโนได้ระบุ และ quantifiedโดยก่อนหน้านี้ ผ่านตัวอย่างตัวกรองมากรูขุมขน 0.22 มิลลิเมตรเส้นผ่าศูนย์กลางและใช้วิธีการของ Botella เปเรซ-Rodríguez, Domecq และ Valpuesta (1990) สำหรับการแยก และการวิเคราะห์หาปริมาณอนุพันธ์ของ dansyl (Tapuhi ชมิดท์ ลินด์เนอร์คอนเก รสและ Karger, 1981) ในเครื่องมือ HPLC P200 แรมสเป็คตราฟิสิกส์ ที่chromatograph ใช้คอลัมน์ C18 15 0.4 ซม.กลับบรรจุด้วยเรซิน Spherisorb ODS2 5 มม.ขนาดอนุภาคจากการติดตามAnalítica (บาร์เซโลน่า สเปน) ที่ thermostated ที่ 25 C และควบคู่กับเครื่องตรวจจับการ Sp 8450 UVeVis สำหรับวัดabsorbance ที่ 254 nm ใช้ 5 มม. L-norleucine เป็นการภายในมาตรฐาน กรดอะมิโนที่ระบุ โดยการเปรียบเทียบความสัมพันธ์รักษาเวลาที่มาตรฐานจาก SigmaeAldrich (เยอรมนี) รับข้อมูล และประมวลผล โดยใช้ซอฟต์แวร์

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.3 วิธีการวิเคราะห์เซลล์ทำงานได้ในระดับปานกลางวัฒนธรรมนับโดยใช้เทคนิคทางจุลชีววิทยาคลาสสิก ต่อไปนี้การลดสัดส่วนของอนุกรมต้องตัวอย่างถูกชุบใน YPD วุ้น (สารสกัดจากยีสต์ 1%, 2% เปปโตนกลูโคส 2% และอาหารเลี้ยงเชื้อ 2%) และนับหลังจากการบ่มที่28 องศาเซลเซียสเป็นเวลาสองวัน กระบวนการหมักที่ได้รับการตรวจสอบผ่านทางปริมาณของ CO2 ที่ปล่อยออกมาเป็นตัวชี้วัดของการสูญเสียน้ำหนัก (เบลี, Sablayrolles และ Barre, 1990) พารามิเตอร์ Enological ได้รับการพิจารณาตามกับสหภาพยุโรปอย่างเป็นทางการวิธี (CEE, 1990) น้ำตาล (กลูโคสฟรุกโตสและ) กรดอินทรีย์ชนิดแอมโมเนียและยูเรียถูกวัดด้วยชุดของเอนไซม์ที่เฉพาะเจาะจงจากBoehringereMannheim (เยอรมนี) สารระเหยที่สำคัญและโพลีออลถูกวัดในก๊าซ Chromatograph HP 6890 Series II พร้อมกับคอลัมน์ของเส้นเลือดฝอยที่มีซิลิกาหลอมละลาย CP-WAX 57 CB (50 เมตรความยาว 0.25 มมภายในและ 0.4 มมเคลือบหนา) และเปลวไฟ เครื่องตรวจจับไอออนไนซ์ สารเงื่อนไขและเตรียมตัวอย่างถูกอธิบายโดย Peinado, โมเรโนโวเมดินาและเรโน (2004) ~ บัตรประจำตัวและการหาปริมาณของสารระเหยที่สำคัญที่ดำเนินการโดยวิธีการมาตรฐานที่ถูกส่งไปรักษาที่เดียวกับตัวอย่างการวิเคราะห์ กรดอะมิโนที่ถูกระบุและวัดโดยผ่านก่อนหน้านี้กลุ่มตัวอย่างที่ผ่านการกรองคของ0.22 มิลลิเมตรเส้นผ่าศูนย์กลางรูขุมขนและจากนั้นใช้วิธีการ Botella ที่ Perez-? Rodríguez, Domecq และ Valpuesta (1990) สำหรับการแยกและปริมาณสัญญาซื้อขายล่วงหน้าdansyl ของพวกเขา (Tapuhi ชมิดท์, Lindner, และ Karger, 1981) ในตราสาร Spectra-ฟิสิกส์ P200 HPLC chromatograph ใช้ 15? 0.4 ซมกลับคอลัมน์ C18 เต็มไปด้วยเรซินSpherisorb ODS2 5 มมขนาดอนุภาคจาก Tracer ANALITICA (บาร์เซโลน่า, สเปน) ที่ถูก thermostated ที่ 25 องศาเซลเซียสและควบคู่ไปกับSp 8450 เครื่องตรวจจับ UVeVis สำหรับวัดการดูดกลืนแสงที่254 นาโนเมตรโดยใช้ 5 มิลลิ L-norleucine เป็นภายในมาตรฐาน กรดอะมิโนที่ถูกระบุโดยการเปรียบเทียบญาติของพวกเขาครั้งการเก็บรักษาให้กับผู้ที่มาตรฐานจาก SigmaeAldrich (เยอรมนี) ข้อมูลที่ได้มาและการประมวลผลโดยใช้ซอฟแวร์

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2.3 วิธีการวิเคราะห์
วางเซลล์ในวัฒนธรรมสื่อถูกนับโดยการใช้เทคนิคทางจุลชีววิทยา
คลาสสิก ต่อไปนี้อุทิศถวายของ
ต้องตัวอย่าง ใน ypd ชุบวุ้น ( กลูโคส 2 % สารสกัดจากยีสต์ 1 2 %
% ตามลำดับ และ 2 % Agar ) และนับหลังจากการบ่มที่
28  เป็นเวลาสองวัน กระบวนการหมักคือการติดตามผ่านทาง