Enzyme-linked immunosorbent assay was used to measure the concentration of S. Typhimurium-specific IgG, IgM and
IgA antibodies in porcine serum. Maxisorp-ELISA plates (Thermo ScientificTM Nunc, UK) were coated with 100l of neat
Salmonella lysate as antigen and incubated for 16 h at ambient temperature. The plates were washed three times with
phosphate buffer solution (PBS) and then blocked with 3% (w/v) Marvel PBS (400l/well) for 1 h at room temperature. Sera
were diluted in 3% (w/v) Marvel PBS and added to the wells. After 1 h at room temperature, the plates were washed six times
with PBS + 0.05% (v/v) Tween 20 (PBST) and six times with PBS. Bound antibody was detected with 100l of goat anti-pig IgG
(Source BioScience, UK), IgM or IgA (Laboratories, Cambridge, UK) alkaline phosphatase secondary antibody (1:4000). After
1 h, the plates were washed as before and 100l of p-Nitrophenyl Phosphate substrate added to each well. Absorbance at
405nm was read after 1 h. For each ELISA plate, a minimum of three wells were coated with Salmonella lysate and detected
as above but without any primary sera, the mean of this assay background was then subtracted from all readings for that
plate before further analysis of the data.
เอนไซม์ที่เชื่อมโยงการทดสอบอิมมูโนถูกใช้ในการวัดความเข้มข้นของเอส Typhimurium เฉพาะ IgG, IgM และ
แอนติบอดี IgA ในซีรั่มสุกร แผ่น Maxisorp วิธี ELISA (เทอร์โม ScientificTM ตอนนี้สหราชอาณาจักร) ถูกเคลือบด้วย 100 ลิตรเรียบร้อย
lysate Salmonella เป็นแอนติเจนและบ่มเป็นเวลา 16 ชั่วโมงที่อุณหภูมิห้อง แผ่นถูกล้างสามครั้งด้วย
สารละลายบัฟเฟอร์ฟอสเฟต (พีบีเอส) และถูกปิดกั้นแล้วกับ 3% (w / v) พีบีเอสมาร์เวล (400 ลิตร / ดี) เป็นเวลา 1 ชั่วโมงที่อุณหภูมิห้อง ซีรั่ม
ถูกเจือจางใน 3% (w / v) พีบีเอสมาร์เวลและเพิ่มหลุม หลังวันที่ 1 ชั่วโมงที่อุณหภูมิห้อง, จานถูกล้างหกครั้ง
กับพีบีเอส + 0.05% (v / v) Tween 20 (PBST) และหกครั้งกับพีบีเอส แอนติบอดีที่ถูกผูกไว้ที่ตรวจพบกับ 100 ลิตรของแพะ IgG ต่อต้านหมู?
(ที่มาไบสหราชอาณาจักร), IgM หรือ IgA (ห้องปฏิบัติการ, เคมบริดจ์, สหราชอาณาจักร) แอนติบอดีด่าง phosphatase รอง (1: 4000) หลังจาก
1 ชั่วโมง, จานถูกล้างเป็นก่อนและ 100 ลิตร P-Nitrophenyl พื้นผิวฟอสเฟตเพิ่มเข้ามาในแต่ละดี ดูดกลืนแสงที่
405nm ได้อ่านหลังวันที่ 1 ชั่วโมง สำหรับแต่ละแผ่นวิธี ELISA, อย่างน้อยสามหลุมถูกเคลือบด้วย lysate Salmonella และตรวจพบ
ดังกล่าว แต่ไม่มีซีรั่มหลักใด ๆ ค่าเฉลี่ยของพื้นหลังการทดสอบนี้ถูกลบออกแล้วจากการอ่านทั้งหมดที่
แผ่นก่อนที่จะวิเคราะห์ต่อไปของข้อมูล
การแปล กรุณารอสักครู่..
![](//thimg.ilovetranslation.com/pic/loading_3.gif?v=b9814dd30c1d7c59_8619)
เอนไซม์ลิงค์ immunosorbent assay ถูกใช้เพื่อวัดความเข้มข้นของ S . typhimurium เฉพาะ IgG IgM และ IgA สุกร
แอนติบอดีในซีรั่ม maxisorp 3 แผ่น ( เทอร์โม scientifictm ขณะนี้ , UK ) ถูกเคลือบด้วย 100 ลิตร lysate Salmonella เรียบร้อย
เป็นแอนติเจนและบ่มเป็นเวลา 16 ชั่วโมง ที่อุณหภูมิปกติ จานถูกล้างด้วย
3 ครั้งสารละลายฟอสเฟตบัฟเฟอร์ ( PBS ) แล้วปิดด้วย 3% ( w / v ) มหัศจรรย์ PBS ( 400 ลิตร ) เป็นเวลา 1 ชั่วโมง ที่อุณหภูมิห้อง เซร่า
ลด 3 % ( w / v ) มหัศจรรย์ PBS และเพิ่มไปยังหลุม หลังจาก 1 ชั่วโมง ที่อุณหภูมิห้อง จานถูกล้าง 6 ครั้ง
กับ PBS 0.05 % ( v / v ) Tween 20 ( pbst ) และหกครั้งกับ PBS ผูกพันแอนติบอดีพบ 100 ผมแพะหมู IgG anti
( แหล่งวิทยาศาสตร์ชีวภาพ , UK )อิม หรือ งะ ( ห้องปฏิบัติการ , Cambridge , UK ) อัลคาไลน์ ฟอสฟาเตสระดับแอนติบอดี ( 1:4000 ) หลังจาก
1 h , จานถูกล้างก่อนและ 100 l p-nitrophenyl ฟอสเฟตตั้งต้นเพิ่มแต่ละครั้งได้อีกด้วย การดูดกลืนแสงที่
405nm ได้อ่านหลังจาก 1 ชั่วโมงสำหรับแต่ละจาน Elisa , อย่างน้อยสามบ่อถูกเคลือบด้วย lysate และตรวจพบเชื้อ Salmonella
ข้างบน แต่ไม่มีหลักเซราค่าเฉลี่ยของการทดสอบหลังถูกหักออกจากการอ่านที่
จานก่อนการวิเคราะห์ต่อไปของข้อมูล
การแปล กรุณารอสักครู่..
![](//thimg.ilovetranslation.com/pic/loading_3.gif?v=b9814dd30c1d7c59_8619)