2. Materials and methods2.1. Induct

2. Materials and methods
2.1. Induction of antibiotic resistance in A. hydrophila
A. hydrophila AL98-C1B isolate obtained from MAS diseased
channel catfish was used to determine whether resistance to
rifampicin or to novobiocin or to N + R was able to attenuate A.
hydrophila AL98-C1B. After the most effective attenuation strategy
was determined to be N + R, the N + R strategy was then used
to attenuate the three highly virulent 2009 isolates (Table 1) of A.
hydrophila. The identification of the four isolates has been published
previously [19]. The archived isolates were recovered from frozen
stocks (2 mL aliquots stored at
−80 ◦C) and grown in tryptic soy
broth (TSB) (Fisher Scientific, Pittsburgh, PA) for 24 h at 28 ◦C. Novobiocin
sodium salt and rifampicin were purchased from Promega
(Madison, WI) and Sigma–Aldrich (St. Louis, MO), respectively. All
A. hydrophila isolates were cultured in tryptic soy broth (TSB) containing
different concentrations of N + R for 24 h at 28 ◦C. The initial
concentration of N + R that allowed growth of A. hydrophila was
12.5 g/mL. After 20 passages of A. hydrophila in TSB containing
the same or higher concentration of N + R, all three strains of A.
hydrophila were able to grow in TSB containing 1600 g/mL of N + R.
The three parent and N + R-resistant A. hydrophila strains were then
grown on 5% sheep blood agar plates (Thermo Fisher Scientific
Remel Products, Lenexa, KS) for bacterial identification. Bacteria
isolates were identified by API 20E test (BioMerieux, Durham, NC)
and gas chromatography analysis of fatty acid methyl ester using
MIDI microbial identification system (MIDI, Newark, DE) according
to established procedures [40].

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2. วัสดุและวิธีการ2.1 การเหนี่ยวนำต้านทานยาปฏิชีวนะใน A. hydrophilaA. hydrophila AL98 C1B ที่แยกได้จากเส้นมาสอเมริกันถูกใช้เพื่อกำหนดว่าความต้านทานต่อrifampicin หรือ novobiocin หรือ N + R ได้ attenuate อ.hydrophila AL98 C1B หลังจากกลยุทธ์อ่อนมีประสิทธิภาพสูงสุดที่กำหนดเป็น N + R, N + R แล้วใช้กลยุทธ์การ attenuate สามสูง virulent 2009 แยก (ตารางที่ 1) ของhydrophila รหัสของสี่แยกได้ถูกเผยแพร่ก่อนหน้านี้ [19] แยกเก็บถาวรถูกกู้คืนจากแช่แข็งหุ้น (2 mL aliquots เก็บที่−80 ◦C) และปลูกถั่วเหลือง trypticซุป (TSB) (วิทยาศาสตร์ Fisher พิตส์เบิร์ก PA) ใน 24 ชมที่ 28 ◦C Novobiocinเกลือโซเดียมและ rifampicin ซื้อจาก Promega(เมดิสัน WI) ซิก-Aldrich (St. Louis, MO), และตามลำดับ ทั้งหมดA. hydrophila ที่แยกได้มีอ่างในถั่วเหลือง tryptic ประกอบด้วยซุป (TSB)แตกต่างความเข้มข้นของ N + R สำหรับ 24 ชมที่ 28 ◦C เริ่มต้นมีความเข้มข้นของ N + R ที่สามารถเจริญเติบโตของ A. hydrophila12.5 g/mL หลังจากทางเดิน 20 ของ A. hydrophila ใน TSB ประกอบด้วยเดียวกัน หรือสูงกว่าความเข้มข้นของ N + R สายพันธุ์ที่สามทั้งหมดของอ.มีความสามารถเติบโตใน TSB ประกอบด้วย 1600 g/mL ของ N + R. hydrophilaในหลักที่สาม และ N + R ทน A. hydrophila สายพันธุ์ได้แล้วปลูกใน 5% แกะเวย์ agar เลือดแผ่น (เทอร์โม Fisher วิทยาศาสตร์ผลิตภัณฑ์ Remel, Lenexa, KS) สำหรับการระบุเชื้อแบคทีเรีย แบคทีเรียแยกระบุ โดย API 20E ทดสอบ (BioMerieux เดอแรม NC)และการวิเคราะห์กรดไขมัน methyl เอสใช้ chromatography ก๊าซMIDI รหัสจุลินทรีย์ระบบ (MIDI นวร์ก DE) ตามการสร้างขั้นตอน [40]

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2. วัสดุและวิธีการ
2.1 การเหนี่ยวนำความต้านทานยาปฏิชีวนะใน A. hydrophila
เอ hydrophila แยก AL98-C1B ที่ได้รับจาก MAS
โรคช่องดุกถูกใช้ในการตรวจสอบว่าความต้านทานต่อการ
rifampicin หรือ Novobiocin หรือ N + R ก็สามารถที่จะผอม A.
hydrophila AL98-C1B หลังจากที่กลยุทธ์การลดทอนประสิทธิภาพมากที่สุดก็ตัดสินใจที่จะเป็น N + R, กลยุทธ์ N + R ถูกนำมาใช้แล้วจะผอมสามรุนแรงสูง2,009 สายพันธุ์ (ตารางที่ 1) ของ A. hydrophila บัตรประจำตัวของสี่สายพันธุ์ที่ได้รับการตีพิมพ์ก่อนหน้านี้ [19] เชื้อที่เก็บไว้หายจากการแช่แข็งหุ้น (2 aliquots มิลลิลิตรเก็บไว้ที่ -80 ◦C) และถั่วเหลืองที่ปลูกใน tryptic น้ำซุป (TSB) (ฟิชเชอร์ทางวิทยาศาสตร์, พิตต์สเบิร์ก) เป็นเวลา 24 ชั่วโมงวันที่ 28 ◦C Novobiocin เกลือโซเดียมและ rifampicin ที่ซื้อมาจาก Promega (Madison, WI) และ Sigma-Aldrich (เซนต์หลุยส์) ตามลำดับ ทุกA. ไอโซเลท hydrophila เพาะเลี้ยงในน้ำซุปถั่วเหลือง tryptic (TSB) ที่มีความเข้มข้นแตกต่างกันของN + R เป็นเวลา 24 ชั่วโมงวันที่ 28 ◦C เริ่มต้นที่ความเข้มข้นของ N + R ที่ได้รับอนุญาตการเจริญเติบโตของ A. hydrophila เป็น 12.5? g / มิลลิลิตร หลังจาก 20 ทางเดินของ A. hydrophila ใน TSB ที่มีความเข้มข้นเดียวกันหรือสูงขึ้นของN + R ทั้งสามสายพันธุ์ของ A. hydrophila ก็สามารถที่จะเจริญเติบโตได้ในที่มี TSB 1600? g / มิลลิลิตร N + อาร์สามปกครองและN + A. R ทน hydrophila สายพันธุ์นั้นก็เติบโตขึ้น5% ในแผ่นวุ้นเลือดแกะ (เทอร์โมฟิชเชอร์ทางวิทยาศาสตร์ผลิตภัณฑ์Remel, เลเนซา, แคนซัส) เพื่อระบุตัวตนของแบคทีเรีย แบคทีเรียสายพันธุ์ที่ถูกระบุโดยการทดสอบ API 20E (Biomerieux, Durham, NC) และการวิเคราะห์แก๊ส chromatography ของกรดไขมันเมทิลเอสเตอร์โดยใช้ระบบการระบุจุลินทรีย์MIDI (MIDI, นวร์ก, DE) ตามขั้นตอนการจัดตั้งขึ้น[40]

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2 . วัสดุและวิธีการ
2.1 . การต้านทานยาปฏิชีวนะใน A . hydrophila
A . hydrophila al98-c1b แยกได้จากแม่ป่วย
ปลาดุก channel ถูกใช้เพื่อตรวจสอบว่าต้านทาน
rifampicin หรือโนโวไบโอซินหรือ N R สามารถเจือจาง A .
ใน al98-c1b หลังจากที่มีการกำหนดเป็นกลยุทธ์
n r , n r กลยุทธ์แล้ว ใช้
เจือจาง สามอย่างรุนแรง ( ตารางที่ 1 ) 2009 สายพันธุ์ A . hydrophila
. กำหนดสี่สายพันธุ์ที่ได้รับการตีพิมพ์
ก่อนหน้านี้ [ 19 ] เก็บเชื้อที่พบจาก
หุ้นแช่แข็ง ( 2 มล. เฉยๆเก็บไว้ที่
− 80 ◦ C ) และปลูกในน้ำซุปถั่วเหลือง
อาหาร ( TSB ) ( ฟิชเชอร์ทางวิทยาศาสตร์ , Pittsburgh , PA ) 24 H ที่ 28 ◦โนโวไบโอซิน
Cเกลือโซเดียมและ rifampicin ซื้อมาจาก promega
( Madison , WI ) และ Sigma –ดิช ( St . Louis , MO ) ตามลำดับ A . hydrophila สายพันธุ์ทั้งหมด
เพาะเลี้ยงในอาหารน้ำซุปถั่วเหลือง ( TSB ) ที่มีความเข้มข้นแตกต่างกัน n r
24 H ที่ 28 ◦ C ความเข้มข้นเริ่มต้น
N R ที่อนุญาตให้มีการเจริญเติบโตของ A . hydrophila
0 g / ml  หลังจาก 20 หัวข้อของ A . hydrophila ใน TSB ประกอบด้วย
เดียวกันหรือสูงกว่าความเข้มข้นของ r ทั้งหมด 3 สายพันธุ์ A .
hydrophila สามารถเติบโตใน TSB ที่มี 1600  g / ml ของ R .
3 A . hydrophila สายพันธุ์พ่อแม่และ r-resistant แล้ว
โต 5 % แกะเลือดวุ้นแผ่น ( เทอร์โมฟิชเชอร์ทางวิทยาศาสตร์
remel ผลิตภัณฑ์ lenexa ) ) ชนิดของเชื้อแบคทีเรีย แบคทีเรียไอโซเลท
ระบุทดสอบ 20e API ( biomerieux , Durham , NC )
และการวิเคราะห์กรดไขมันเมทิลเอสเทอร์ด้วยแก๊สโครมาโตกราฟี ของการใช้ระบบการจำแนกจุลินทรีย์
MIDI ( MIDI , Newark , DE ) ตามขั้นตอนการจัดตั้ง
[ 40 ]