Effects on expression of iNOS, cycl

Effects on expression of iNOS, cyclooxygenase-2 (COX-2) and TNF-α mRNA

In order to acquire the mechanism for anti-inflammatory activity of Boesenbergia longiflora extract, the suppression on mRNA expression of iNOS, COX-2 and TNF-α genes was carried out as previously described by Sae-wong et al. (2009). Briefly, RAW264.7 cells were harvested after 20 h incubation with various concentrations of samples (3–100 µM) and were then isolated to obtain RNA using RNeasy Mini Kit (Qiagen Operon, USA). For the first strand cDNA synthesis, RNA from each sample was reverse-transcribed using cDNA synthesis kit (Rever Tra Ace-α kit, TOYOBO, Japan). Then PCR analyses were performed on the aliquots of the cDNA preparations for detecting iNOS, COX-2, TNF-α and β-actin gene expression by PCR kit (Rever Tra Dash, TOYOBO, Japan). The primers for each gene were as follows:

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ผลของ iNOS, cyclooxygenase-2 (ค็อกซ์-2) และ mRNA TNF-αเพื่อรับกลไกสำหรับกิจกรรมแก้อักเสบของสารสกัดจากกระชาย longiflora ปราบปรามในนิพจน์ mRNA ของ iNOS ค็อกซ์-2 และยีน TNF-αมีดำเนินการก่อนหน้านี้ที่ อธิบายไว้โดยแซ่หว่อง et al. (2009) สั้น ๆ RAW264.7 เซลล์เก็บเกี่ยวผลผลิตหลังจากฟักตัว 20 h กับความเข้มข้นต่าง ๆ ของตัวอย่าง (3-100 µM) และถูกแยกต่างหากจากนั้นสามารถใช้ชุดมินิ RNeasy (Qiagen Operon สหรัฐอเมริกา) อาร์เอ็นเอ การสังเคราะห์ cDNA แรกของสแตรนด์ อาร์เอ็นเอจากตัวอย่างแต่ละถูกย้อนกลับทับศัพท์โดยใช้ชุดการสังเคราะห์ cDNA (Rever ตราเอส-αชุด TOYOBO ญี่ปุ่น) แล้ว PCR วิเคราะห์ถูกดำเนินบน aliquots ของเตรียม cDNA สำหรับการตรวจสอบยีน iNOS ค็อกซ์-2, TNF-α และβ-แอกติน โดยชุด PCR (Rever ตราประ TOYOBO ญี่ปุ่น) ไพรเมอร์สำหรับแต่ละยีนมีดังนี้:

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ผลต่อการแสดงออกของ iNOS, cyclooxygenase-2 (COX-2) และ TNF-α mRNA เพื่อที่จะได้รับกลไกสำหรับกิจกรรมต้านการอักเสบของสารสกัดกระชาย longiflora ปราบปรามการแสดงออกของ iNOS, COX-2 และ TNF-α ยีนที่ได้ดำเนินการตามที่ระบุไว้ก่อนหน้านี้โดยแซ่วงศ์และคณะ (2009) สั้น ๆ เซลล์ RAW264.7 ถูกเก็บเกี่ยวหลังจาก 20 ชั่วโมงบ่มที่มีความเข้มข้นต่างๆของกลุ่มตัวอย่าง (3-100 ไมครอน) และถูกแยกแล้วจะได้รับใช้อาร์เอ็นเอ RNeasy มินิ Kit (Qiagen Operon สหรัฐอเมริกา) สำหรับการสังเคราะห์ cDNA สาระแรกอาร์เอ็นเอจากกลุ่มตัวอย่างแต่ละคนถูกย้อนกลับคัดลอกโดยใช้ชุดการสังเคราะห์ cDNA (Rever Tra ชุด Ace-α, TOYOBO, ญี่ปุ่น) จากนั้น PCR ได้ดำเนินการวิเคราะห์ในส่วนลงตัวของการเตรียม cDNA สำหรับการตรวจสอบ iNOS, COX-2, TNF-αและการแสดงออกของยีนβ-โปรตีนโดยชุด PCR (Rever Tra รีบ TOYOBO, ญี่ปุ่น) ไพรเมอร์สำหรับยีนแต่ละมีดังนี้

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ผลกระทบต่อการแสดงออกของ inos cyclooxygenase-2 , ( cox-2 ) และ TNF - α mRNA

เพื่อหากลไกสำหรับฤทธิ์ต้านการอักเสบของ longiflora กระบวนการเรียนรู้จากการปราบปรามในการแสดงออกของ mRNA inos cox-2 , และ TNF - αยีนพบว่าก่อนหน้านี้เป็นอธิบายโดยแซวอง et al . ( 2009 ) สั้น ๆ , raw264 .7 เซลล์ถูกเก็บเกี่ยวหลังจาก 20 ชั่วโมงบ่มที่มีความเข้มข้นต่าง ๆ ของตัวอย่าง ( 3 ) 100 µ M ) และได้แยกได้รับอาร์เอ็นเอโดยใช้ชุดมินิ rneasy ( QIAGEN โอเปอรอน สหรัฐอเมริกา ) ครั้งแรกกลุ่มยีนสังเคราะห์ RNA จากแต่ละตัวอย่างถูกย้อนกลับและใช้ชุดการสังเคราะห์ cDNA ( Rever TRA เอซ - αชุด toyobo , ญี่ปุ่น )จากนั้นวิเคราะห์ทั้งหมดจะถูกแสดงบนเฉยๆของการเตรียมสำหรับการตรวจหายีน inos cox-2 , TNF - α , และการแสดงออกของยีนบีตา - actin ซึ่งเป็นชุด ( Rever ตราประ toyobo , ญี่ปุ่น ) ไพรเมอร์สำหรับแต่ละยีน มีดังนี้ :