2.1. Isolation of probiotic strain from kimchi and cell line
To isolate Lactobacillus sp. from kimchi, samples were diluted in 0.1% peptone water, and 100 μL of each diluted suspension was spread onto Lactobacillus selective medium (LBS; BD BBL, Cockeysville, MD, USA) agar. After incubation for 24 h at 37 °C, grown colonies were isolated. The isolates were grown on lactobacilli MRS agar (BD BBL), and stored as stock solutions in 20% glycerol at −70 °C. Lactobacillus acidophilus CH-2 (Chr. Hansen, Hoersholm, Denmark) and Streptococcus thermophilus TH-4 (Chr. Hansen) were used for yogurt production.
RAW 264.7 (murine macrophage) and HT-29 (human colon adenocarcinoma) cell lines were purchased from the Korean Cell Line Bank (KCLB; Seoul, Korea). Each medium of RAW 264.7 and HT-29 cell lines were DMEM (Invitrogen, Grand Island, NY, USA) and RPMI 1640 (Invitrogen). Both medium were containing 10% FBS (Invitrogen) and 1% streptomycin-penicillin (Invitrogen), and incubated under 5% CO2 at 37 °C.
2.1 การแยกสายพันธุ์โปรไบโอติกจากกิมจิและสายพันธุ์ของเซลล์
ในการแยกแลคโตบาซิลลัส SP จากกิมจิตัวอย่างถูกเจือจางในน้ำเปปโตน 0.1% และ 100 ไมโครลิตรของแต่ละระงับเจือจางแผ่ลงบนกลางแลคโตบาซิลลัสเลือก (LBS; BD BBL, Cockeysville, MD, USA) วุ้น หลังจากการบ่มเป็นเวลา 24 ชั่วโมงที่อุณหภูมิ 37 ° C, โคโลนีที่ปลูกถูกแยก สายพันธุ์ที่ปลูกในอาหารเลี้ยงเชื้อแลคโต MRS (BD BBL) และเก็บไว้เป็นโซลูชั่นหุ้นในกลีเซอรอล 20% ที่อุณหภูมิ -70 องศาเซลเซียส Lactobacillus acidophilus CH-2 (Chr. แฮนเซน Hoersholm, เดนมาร์ก) และ Streptococcus thermophilus TH-4 (Chr. แฮนเซน) ถูกนำมาใช้ในการผลิตโยเกิร์ต. RAW 264.7 (หมา macrophage) และ HT-29 (มะเร็งลำไส้ใหญ่ของมนุษย์) เซลล์กำลังซื้อ จากสายมือถือเกาหลีธนาคาร (Kclb; Seoul, Korea) สื่อกลางในการ RAW 264.7 และ HT-29 สายแต่ละเซลล์มี DMEM (Invitrogen, Grand Island, NY, USA) และ RPMI 1640 (Invitrogen) กลางทั้งสองได้มี 10% FBS (Invitrogen) และ streptomycin เพนิซิลิ 1% (Invitrogen) และบ่มภายใต้ CO2 5% ที่อุณหภูมิ 37 ° C
การแปล กรุณารอสักครู่..
2.1 . การแยกเชื้อโปรไบโอติกจากกิมจิและ
เซลล์ Lactobacillus sp . ที่แยกได้จากกิมจิ ตัวอย่างที่เจือจางในน้ำ 0.1 % ตามลำดับ และ 100 ลิตร ซึ่งแต่ละμระงับได้กระจายลงบน Lactobacillus เลือกขนาดกลาง ( ปอนด์ ; BD BBL , Cockeysville , MD , USA ) วุ้น หลังจากบ่มเป็นเวลา 24 ชั่วโมงที่อุณหภูมิ 37 องศา C , ปลูกอาณานิคมได้ถูกแยกที่ปลูกในสายพันธุ์ Lactobacilli MRS agar ( BD BBL ) และเก็บเป็นสต็อกโซลูชั่น 20 % กลีเซอรอลที่− 70 องศา ch-2 Lactobacillus acidophilus ( Chr . แฮนเซ่น hoersholm , เดนมาร์ก ) และ Streptococcus สีที่ได้จากธรรมชาติ th-4 ( Chr . แฮนเซน ) ที่ใช้ในการผลิตโยเกิร์ต ดิบ ( ~
264.7 แมคโครฟาจ ) และ ht-29 ( adenocarcinoma ลําไส้ใหญ่ของมนุษย์ ) เซลล์เส้น ซื้อมาจากเกาหลี มือถือสายธนาคาร ( kclb ;โซล , เกาหลีใต้ ) แต่ละสื่อของวัตถุดิบและ 264.7 ht-29 เซลล์เส้น dmem ( Invitrogen , Grand Island , NY , USA ) และ RPMI 1640 ( Invitrogen ) มีทั้งขนาดกลางที่มี 10% FBS ( Invitrogen ) และ 1 % streptomycin เพนนิซิลิน ( Invitrogen ) และ CO2 บ่มภายใต้ 5 % ที่อุณหภูมิ 37 องศา
การแปล กรุณารอสักครู่..