Objective: To investigate the molec

Objective: To investigate the molecular mechanism underlying T-bet mediated anti-neoplastic effects of
cytokine induced killer (CIK) cells.
Methods: Lymphocytes isolated from peripheral blood of leukemic children were induced with γ- interferon
(IFN-γ), CD3McAb and interluki-2 (IL-2), and co-cultured with dendritic cells (DCs) to generate DC-CIK cells.
The morphology and immunophenotype of these cells were determined by a light microscopy and flow
cytometry, respectively. IL-2 and IFN-γ levels released by DC-CIK cells were quantified by ELISA. Cytotoxicity
of DC-CIK cells against leukemia cell lines was measured by MTT assay. FCM was used to detect
CD4+CD25+Treg cells, while RT-PCR and Western blot were used to determine mRNA and protein expressions
of Foxp3 and GATA3 in DC-CIK cells treated with T-bet monoclonal antibody.
Findings: Induced DC-CIK cells were regular, round and transparent with variable cell volume and cellular
aggregation. The main effector cells in this population were CD3+CD8+ cells and CD3+CD56+ cells. We
demonstrated a time dependent increase in IL-2 and IFN-γ levels after induction. DC-CIK cells were cytotoxic
to B95 cells, Jhhan cells and M07e cells, with the highest cytotoxicity towards B95 cells. Treatment with
mouse anti-human T-bet monoclonal antibody resulted in an increase in the proportion of CD4+CD25+Treg
cells and elevation of Foxp3 and GATA3 mRNA and protein levels.
Conclusion: DC-CIK cells induced with cytokines were strongly cytotoxic towards a number of cancer cell
lines. Foxp3 and GATA3 were implicated in the T-bet mediated anti-neoplastic effects of DC-CIK cells via
activation of the Th1 pathway and suppression of the Th2 and Treg pathways.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

วัตถุประสงค์: เพื่อตรวจสอบกลไกระดับโมเลกุล แบบ T-เดิมพัน mediated ผล neoplastic ต่อต้านอย่างไร cytokine เกิดเซลล์ (CIK) นักฆ่าวิธีการ: นำ Lymphocytes ที่แยกต่างหากจากเลือดต่อพ่วงเด็ก leukemic กับอินเตอร์ฟีรอนγ(IFN-γ), CD3McAb และ interluki-2 (IL-2), และอ่างร่วมกับเซลล์ dendritic (Dc) เพื่อสร้างเซลล์ DC CIKสัณฐานวิทยาและ immunophenotype ของเซลล์เหล่านี้ถูกกำหนด โดยแสง microscopy และกระแสเซลล์ ตามลำดับ IL-2 และ IFN-γระดับออก โดยเซลล์ DC CIK ถูก quantified โดย ELISA Cytotoxicityของเซลล์ DC CIK กับบรรทัดของเซลล์มะเร็งเม็ดเลือดขาวถูกวัด โดย MTT assay ใช้ตรวจหา FCMเซลล์ CD4 + CD25 + Treg ขณะใช้ RT-PCR และคืนในตาตะวันตกกำหนดนิพจน์ mRNA และโปรตีนFoxp3 และ GATA3 ในเซลล์ DC CIK รับเดิมพัน T monoclonal แอนติบอดีค้นพบ: DC CIK เหนี่ยวนำให้เซลล์ปกติ วงกลม และโปร่งใสที่ มีปริมาณเซลล์ผันแปรและมือถือรวม เซลล์ effector หลักในประชากรนี้มี CD3 + CD8 เซลล์ และ CD3 + CD56 + เซลล์ เราแสดงการเพิ่มขึ้นขึ้นอยู่กับเวลาในระดับ IL-2 และ IFN-γหลังเหนี่ยวนำ เซลล์ DC CIK ถูก cytotoxicB95 เซลล์ เซลล์ Jhhan และ M07e เซลล์ cytotoxicity สูงต่อเซลล์ B95 การรักษาด้วยเมาส์ต่อต้านบุคคล T-เดิมพัน monoclonal แอนติบอดีผลในการเพิ่มสัดส่วนของ CD4 + CD25 + Tregเซลล์และการเพิ่ม Foxp3 และ GATA3 ระดับ mRNA และโปรตีนสรุป: เซลล์ DC CIK เกิดกับ cytokines cytotoxic อย่างยิ่งต่อจำนวนเซลล์มะเร็งลงรายการบัญชีบรรทัด Foxp3 และ GATA3 เกี่ยวข้องในลักษณะต่อต้าน neoplastic mediated เดิมพัน T เซลล์ DC CIK ผ่านเปิดใช้งานของทางเดินของ Th1 และปราบปรามมนต์ Th2 และ Treg

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

วัตถุประสงค์: เพื่อศึกษากลไกในระดับโมเลกุลพื้นฐานผลกระทบ T-เดิมพันพึ่งต่อต้านเนื้องอกของ
นักฆ่าที่เหนี่ยวนำให้เกิดไซโตไคน์ (CIK) เซลล์.
วิธีการ: ที่แยกได้จากเซลล์เม็ดเลือดขาวในเลือดของเด็กที่ถูกเหนี่ยวนำให้เกิดมะเร็งเม็ดเลือดขาวด้วย interferon γ-
(IFN-γ) CD3McAb และ interluki -2 (IL-2) และร่วมกับการเพาะเลี้ยงเซลล์ dendritic (DCS) เพื่อสร้าง DC-เซลล์ CIK.
สัณฐานวิทยาและ immunophenotype ของเซลล์เหล่านี้ถูกกำหนดโดยใช้กล้องจุลทรรศน์แสงและการไหล
ภูมิคุ้มกันตามลำดับ IL-2 และระดับ IFN-γปล่อยออกมาจากเซลล์ DC-CIK ถูกวัดโดยวิธี ELISA พิษ
ของเซลล์ DC-CIK กับเซลล์มะเร็งเม็ดเลือดขาวโดยวัดจากการทดสอบ MTT FCM ถูกนำมาใช้ในการตรวจสอบ
CD4 + CD25 + เซลล์ Treg ขณะ RT-PCR และดวงตะวันถูกนำมาใช้ในการตรวจสอบและการแสดงออกของ mRNA โปรตีน
ของ Foxp3 และ GATA3 ในเซลล์ DC-CIK รับการรักษาด้วยแอนติบอดี T-เดิมพัน.
ผลการวิจัย: การชักนำให้เกิด DC-CIK เซลล์เป็นปกติรอบและโปร่งใสกับปริมาณเซลล์ตัวแปรและโทรศัพท์มือถือ
รวม เซลล์ effector หลักในประชากรกลุ่มนี้มี CD3 + เซลล์ CD8 + และ CD3 + CD56 + เซลล์ เรา
แสดงให้เห็นถึงการเพิ่มขึ้นขึ้นอยู่กับเวลาใน IL-2 และระดับ IFN-γหลังจากการเหนี่ยวนำ เซลล์ DC-CIK เป็นพิษ
เพื่อ B95 เซลล์ Jhhan และเซลล์ M07e มีความเป็นพิษต่อเซลล์สูงสุด B95 การรักษาด้วย
เมาส์ต่อต้านมนุษย์แอนติบอดี T-เดิมพันผลในการเพิ่มขึ้นของสัดส่วนของ CD4 + CD25 + Treg
เซลล์และระดับความสูงของ Foxp3 และ mRNA GATA3 และระดับโปรตีน.
สรุป: DC-เซลล์ CIK เหนี่ยวนำให้เกิดกับ cytokines เป็นอย่างยิ่งต่อการเป็นพิษต่อ จำนวนเซลล์มะเร็ง
เส้น Foxp3 และ GATA3 ถูกเกี่ยวข้องใน T-เดิมพันพึ่งผลการต่อต้านเนื้องอกของเซลล์ DC-CIK ผ่าน
การใช้งานของทางเดิน Th1 และปราบปรามการ Th2 และทางเดิน Treg

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

วัตถุประสงค์ : เพื่อศึกษากลไกระดับโมเลกุลพื้นฐาน t-bet ต่อต้านเนื้องอก ( ผลของไซโตไคน์และนักฆ่า ( เจ๊ะ )

วิธีแยกเซลล์ เม็ดเลือดขาวจากกระแสเลือดของเด็กและถูกชักนำด้วยγ - รอน
( IFN - γ ) และ cd3mcab interluki-2 ( 2 ) และการเพาะเลี้ยงร่วมกับเซลล์ จำกัด ( DCS ) พฤศจิกายน
สร้างเซลล์ทาง immunophenotype เหล่านี้ถูกกำหนดโดยเซลล์แสงกล้องจุลทรรศน์และไหล
( ตามลำดับ ) IL-2 IFN - γและระดับที่ออกโดยพฤศจิกายนเซลล์มี quantified โดยวิธีอีไลซ่า ความเป็นพิษต่อเซลล์ต่อเซลล์มะเร็งเม็ดเลือดขาวของพฤศจิกายน
เส้นวัดจาก MTT assay พบ ใช้ตรวจหา CD4 FCM
cd25 treg เซลล์ในขณะที่ RT-PCR และ Western blot ถูกใช้เพื่อตรวจสอบการแสดงออกของยีนและโปรตีน
foxp3 gata3 พฤศจิกายนและในเซลล์ที่ได้รับการรักษาด้วย t-bet โมโนโคลนอลแอนติบอดี .
: การค้นพบเซลล์เป็นปกติ พฤศจิกายน รอบ และโปร่งใสกับปริมาณเซลล์ตัวแปรและโทรศัพท์มือถือ
รวม . หลัก ( เซลล์ในประชากรนี้มีเซลล์ CD8 ทันที และทันทีปรากฏเซลล์ เรา
แสดงเวลาใน IL-2 IFN - ( เพิ่มและγระดับหลังจาก induction เซลล์มีการ b95
พฤศจิกายนทเซลล์ เซลล์ และ m07e jhhan เซลล์กับเซลล์ b95 สูงสุดต่อเซลล์ การรักษาด้วย
t-bet โมโนโคลนอลแอนติบอดีเมาส์ต่อต้านมนุษย์ มีผลทำให้มีการเพิ่มขึ้นในสัดส่วนของ CD4 cd25 treg
เซลล์และระดับความสูงของ foxp3 และ gata3 mRNA และโปรตีน
สรุป :เซลล์และสารพิษด้วยพฤศจิกายนเป็นอย่างมากต่อจำนวนเซลล์
มะเร็ง และ foxp3 gata3 ถูกที่เกี่ยวข้องใน t-bet ต่อต้านเนื้องอก ( ผลของการกระตุ้นเซลล์ผ่านทางพฤศจิกายน
ของ th1 ทางเดินและปราบปราม th2 treg
และเส้นทาง .