1. Closed chamber incubation with alkali CO2 traps
1.1 Materials and Reagents
1 Incubation jars with gastight lids (Mason or Kilner types; Figure 45.1)
2. Glass vials (20-50 ml) for the alkali alkali solution and water
3. M NaOH solution
4. 0.5 M HCl solution
5. Phenolphthalein soiution
6. 1 M BaCl2
7. Pipettes
8. Burette or automatic titrator
9. Magnetic stirrer (optional)
10. Incubator or controlled environment room (optional)
FIGURE 45.1. Closed incubation vessel with NaOH traps for CO2
1.2 Procedure
Weigh 100-150 g (dry weight equivalent) into jars and record the weight of each jar plus soil without its lid. Place one vial containing 10 ml of 1 M MaOH and one vial containing watcr into eath jar and seal them with the lids (Figure 45.1). Incubate the jars in the dark and at the desired temperature. The CO2 can be assayed at intervals of 3-10 days typically. For each mole of CO2 trapped in the NaOH. 2 moles of NaOH will be converted to Na2CO2 (Equation 45.1). Therefore, the total CO2 produced is twice the depletion of NaOH in the trap. Remove the vials of water and NaOH and tben backtitrate the excess NaOH with HCl (Equation 45.2) using phenolphthalein as an indicator having removed dissolved CO2 and carbonates by precipitation with the addition of 2 ml BaCl2
2NaOH + CO2 → Na2CO3 + H2O (45.1)
NaOH + HCl → NaCl + H2O (45.2)
For example, example, if 5 ml of 0.5 M HCI was required to backtirate the excess NaOH in alkali trap trap that originally contained 10 ml of 1.0 M NaOH after precipitating the carbonates with BaCl2 then the CO2 content of the traps would be calculated as
CO2 in trap = 0.5 x (((VNaOH x CNaOH)/1000) – ((VHCI x CHCI)/1000)) (45.3)
Where VNaOH is the initial volume of NaOH (mL), CNaOH is the initial molar concentration of NaOH, VHCI is the volume of HCI used in the the titration (mL), and CHCI is the molar concentration of HCI used in titration.
So, CO2 in the trap = 0.5 x [((10 x 1.0)/1000) – ((5 x 0.5)/1000)]
= 0.00375 mol C
Where the incubation involved 100 g of dry weight equivalent soil and an incubation time of 48 h, C mineralization rate would be calculated as
C mineralization rate = CO2 in the trap /(soil mass in g x incubation time in h)
= 0.00375/(100 x 48)
= 0.00000078 mol C g-1 soil h-1 or 0.78 µmol C g-1 soil h-1 (45.4)
If the incubation is to be continued, wipe any continued, wipe any condensation from the inside of the jar and the lid, weigh the jars, and correct for any weight by addition of water. Then put frsh NaOH and water vials in the jars, reseal them, and continue the incubation.
1.3 Comments
The method given here is very general and may be adapted to address a wide range of specific research questions. Among other factors, the amount of soil, the temperature and moisture conditions, the concentration and amount of NaOH, and the incubation time can all be adjusted to suit particular applications. It is, however, important to be sure that the headspace in the jars is large enough to avoid the risk of anaerobiosis during long-term incubations. Typically, 100-150 g soil in a 1000 mL vessel is suitable for 3-4 days incubation intervals. It is also important to ensure that the amount of NaOH is adequate to trap all the CO2 produced. If the amount of CO2 produced. is small, reducing the NaOH concentration will increase the sensitivity of the assay. Carbonic anhydrase can be analyte to catalyze the dissolution of CO2 in water and allow titration between the pH endpoints, 8.3 to 3.7 (Underwood 1961). An automatic titrator and a magnetic stirrer can be used to help improve the precision of the titration. However, these are not essential as the assays can be carried out satisfactorily using manual equipment provided the operator is careful and skilful.
Commonly used protocols that employ closed chamber incubations to measure soil biological activity and to quantify the amount of readily mineralizable C in soil are given below. Closed chamber techniques involving alkali traps for measuring CO2 production in the field have also been described by Anderson (1982) and Zibilske (1994)
1 . บ่มเพาะห้องปิดกับด่าง CO2 กับดัก
1.1 วัสดุและสารเคมี
1 1 ขวดกับฝา gastight ( เมสัน หรือประเภท คิลเนอร์รูป 45.1 )
2 ขวดแก้ว ( 20 มล. ) สำหรับด่างด่างและน้ำ
3 สารละลาย NaOH M
4 0.5 M กรดไฮโดรคลอริก
5 ฟีนอล์ฟทาลีน ธีอื่นมั๊ย
6 1 M bacl2
7 ปิเปต
8 บิวเรตต์หรืออัตโนมัติเครื่องไทเทรต
9 stirrer แม่เหล็ก ( ถ้ามี )
10ตู้หรือห้องควบคุมสิ่งแวดล้อม ( ถ้ามี )
รูป 45.1 เรือใช้เวลาปิดด้วย NaOH ดัก CO2
ชั่ง 1.2 ขั้นตอน 100-150 กรัม ( น้ำหนักเทียบเท่าแห้ง ) ลงในเหยือกและบันทึกน้ำหนักของแต่ละขวดบวกดินไม่มีฝาของมัน สถานที่หนึ่งขวด บรรจุ 10 ml ของ maoh 1 M และหนึ่งขวดในขวดที่มี watcr eath และประทับตรากับฝา ( คิดดี )ฟักไข่ขวดในที่มืดและที่อุณหภูมิที่ต้องการ . สามารถปริมาณ CO2 ที่ช่วงเวลา 3-10 วัน โดยทั่วไป สำหรับแต่ละโมลของ CO2 อยู่ NaOH 2 โมลของ NaOH จะถูกแปลงเป็น na2co2 ( สมการ 45.1 ) ดังนั้น ทั้งหมดที่ผลิตเป็นสองเท่าของค่า CO2 ใช้ในกับดัก เอาขวดน้ำและ NaOH และ tben backtitrate NaOH HCl ( สมการที่เกินกับ 452 ) การใช้ฟีนอล์ฟทาลีน เป็น ตัวชี้วัด มีเอาออกละลาย CO2 และคาร์บอเนตโดยการตกตะกอนด้วยนอกเหนือจาก 2 ml bacl2
2naoh CO2 → keyboard - key - name Na2CO3 H2O ( แห้ง ) NaOH HCl → keyboard - key - name เกลือ H2O
( 45.2 ) ตัวอย่าง เช่น ถ้า 5 ml 0.5 M กรดไฮโดรคลอริกที่ใช้ backtirate NaOH ส่วนเกินในด่างกับดักกับดักเดิมที่มีอยู่ 10 ml 10 M NaOH หลังจากที่ตกตะกอนคาร์บอเนตที่มีการ bacl2 แล้วเนื้อหา CO2 ของกับดักจะถูกคำนวณเป็น
CO2 ในกับดัก = 0.5 x ( ( ( vnaoh x cnaoh ) / 1000 ) ) ( ( vhci x chci ) / 1000 ) ( RevPAR )
ที่ vnaoh เป็นเล่มแรกของ NaOH ( มิลลิลิตร ) cnaoh เป็นกรามสมาธิเบื้องต้นของ NaOH vhci เป็นปริมาณของยาที่ใช้ในการประยุกต์ ( มิลลิลิตร ) ,และ chci คือความเข้มข้นโดยโมลของกรดไฮโดรคลอริกที่ใช้ในการไทเทรต .
ดังนั้น CO2 ในกับดัก = 0.5 x [ ( ( 10 x 1.0 ) / 1000 ) ) ( ( 5 x 0.5 ) / 1000 ) ]
= 0.00375 โมล C
ที่บ่มเกี่ยวข้องของน้ำหนักแห้ง เท่ากับดินและระยะเวลา 48 H 100 g , C จะให้อัตราการคํานวณ
c สูงเท่ากัน = CO2 ในกับดัก / ( มวลดินในกรัม x ระยะเวลาใน H )
= 0.00375 / ( 100 x 48 )
= 0.00000078 โมล C G-1 ดินส่วน หรือ 0.78 µโมล C G-1 ดินส่วน ( ต่อ )
ถ้าบ่มเพาะจะยังคงเช็ดใดใดต่อ เช็ดหยดน้ำจากด้านในของขวดและฝาขวด ชั่ง และถูกต้องโดยการเพิ่มของน้ำหนักน้ำ ใส่แล้ว frsh NaOH และขวดน้ำในเหยือก ข้อสมมติที่สมเหตุสมผล และต่อไป 1.3 ความคิดเห็น
การบ่มวิธีการให้ที่นี่คือทั่วไปมาก และอาจจะปรับให้เข้ากับที่อยู่ที่หลากหลายของเฉพาะคำถามวิจัย ระหว่างปัจจัยอื่น ๆ , ปริมาณของดิน อุณหภูมิ และสภาวะความชื้น ความเข้มข้นและปริมาณของ NaOH และระยะเวลาทั้งหมดสามารถปรับให้เหมาะสมกับการใช้งานเฉพาะ มันเป็น , อย่างไรก็ตาม ,ที่สำคัญเพื่อให้แน่ใจว่าเฮดสเปซในขวดโหลมีขนาดใหญ่เพียงพอเพื่อหลีกเลี่ยงความเสี่ยงของ anaerobiosis ในระหว่าง incubations ระยะยาว โดยปกติ 100-150 กรัมของดินในภาชนะ 1000 ml เหมาะสำหรับ 3-4 วัน ระยะเวลาช่วงเวลา ยังเป็นสิ่งสำคัญเพื่อให้แน่ใจว่าปริมาณการใช้มีเพียงพอที่จะดัก CO2 ที่ผลิต ถ้าปริมาณของ CO2 ที่ผลิต มีขนาดเล็กการลดความเข้มข้นของ NaOH จะเพิ่มความไวของการทดสอบ ฉะนี้แลสามารถครูเร่งการสลายตัวของ CO2 ในน้ำและช่วยให้ผู้ใช้ที่มีระหว่าง pH 8.3 3.7 ( อันเดอร์วูด , 1961 ) เป็นเครื่องไทเทรตอัตโนมัติและ stirrer แม่เหล็กสามารถใช้เพื่อช่วยปรับปรุงความแม่นยำของเทคนิคการไทเทรต อย่างไรก็ตามเหล่านี้จะไม่สําคัญหรือสามารถดำเนินการได้ดีใช้อุปกรณ์คู่มือให้ผู้ประกอบการระมัดระวังและฝีมือ
ปกติใช้โปรโตคอลที่ใช้ปิดห้อง incubations วัดกิจกรรมทางชีวภาพของดิน และปริมาณเงินพร้อม mineralizable C ในดินจะได้รับดังนี้ปิดห้องเทคนิคที่เกี่ยวข้องกับด่างกับดักวัดการผลิต CO2 ในฟิลด์ยังได้รับการอธิบายโดยแอนเดอร์สัน ( 1982 ) และ zibilske ( 1994 )
การแปล กรุณารอสักครู่..
