3. Materials and methods3.1. Reagen

3. Materials and methods
3.1. Reagents
We used doubly distilled deionized water (specific resistance not less than 18.0 MΩ cm, Millipore, France). The following reagents were used throughout: cp conc. H2SO4 (density, 1.87 g ml−1, 98% wt.; Sigma–Aldrich, CAS no. 7664-93-9) and p.a. grade ferrous tris(1,10-phenanthrolinate) sulfate, Fe(C12H8N2)3SO4 (ferroin, CAS no. 14634-91-4, M = 692.52 g mol−1; Labtekh, Russia), stock solutions of 0.1442 mol l−1 (calibration) and 0.1083 mol l−1 (kinetics). Calibration solutions were made from the stock solution using doubly distilled deionized water giving the range of 1.9–140 μmol l−1.

3.2. Auxiliary measurements
Absorption spectra were measured using a Shimadzu UVmini 1240 spectrophotometer (Japan) in a quartz cells (path lengths, l = 1 cm and l = 0.1 cm) at room temperature in the wavelength range 190–1100 nm. For weighing, a Kern 770 analytical balance (Germany, precision ±0.1 μg) was used. To intensify the dissolution, a GRAD 38-35 ultrasonic bath (Grad Technology, Russia) was used. Samples were taken with Eppendorf Pro automatic pipettes (Germany), (20 ± 1)–(200 ± 1) μl, (100 ± 1)–(1000 ± 1) μl, and (500 ± 1)–(5000 ± 1) μl.

3.3. Procedure
Kinetic measurements using spectrophotometry and OA spectroscopy were made for a ferroin concentration of 3.2 × 10−2 mol l−1 in 12.9 mol l−1 sulfuric acid. The stock ferroin solution was added to sulfuric acid in a test tube, quickly cooled to room temperature with a water flow, the initial temperature was controlled, and the measurements are started. At the stage of spectrophotometric measurements, the kinetic curve was recorded at 532 nm (to correspond to OA measurements) in a cell with 1 mm path length each 2 s. OA measurements were every 2–4 min (the total of 20 measurements per curve).

3.4. Data treatment
The measurement results are treated presented in accordance with the requirements of ISO/IEC 17025:2005 [39]. The limits of detection (LOD) were calculated from the 3σ-criterion according to the IUPAC 1998 recommendations for the presentation of the results of chemical analysis [40]. All the procedures were characterized by the repeatability relative standard deviation (RSD), and the minimum values of this error curve was used as another metrological parameter. To determine the significance of contributions to the signal of the control experiments, the series were compared by Student's t-tests; variances were compared using the Fisher test.

3.5. Optoacoustic setup
OA measurements were performed using the experimental setup illustrated in Fig. 2a. For the generation of OA signals in the medium under study, the radiation of the second harmonic (λ = 532 nm) of a pulsed Nd:YAG laser (a Solar LQ129, Belarus) was used. The laser pulse duration τL = 22 ns at the 1/e level, which was measured with a photodiode. The laser pulse energy could be varied with a number of neutral filters and did not exceed 1 mJ and the corresponding laser fluence did not exceed few mJ cm−2. The laser radiation propagated through the system of a light scatterer and a convex lens to homogenize light distribution in the beam cross-section and make the beam diameter 12 mm at the surface of the medium under study. The laser pulse repetition rate was 50 Hz, which allowed us to register OA signals in 3 s (at 128 signal averages) and thereby neglect any signal changes related with chemical reactions inside the OA cell.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

3. วัสดุและวิธีการ3.1. reagentsเราใช้น้ำกลั่นสองเหตุการณ์ deionized (ความต้านทานจำเพาะ 18.0 ไม่น้อยกว่า MΩ ซม. มาก ฝรั่งเศส) Reagents ดังต่อไปนี้ใช้ตลอด: cp conc. กำมะถัน (ความหนาแน่น 1.87 g ml−1, 98% wt.; CAS no. 7664-93-9, Sigma–Aldrich) และต่อเกรด tris(1,10-phenanthrolinate) เหล็ก ซัลเฟต Fe (C12H8N2) 3SO4 (ferroin, CAS เลข 14634-91-4, M = 692.52 g mol−1 Labtekh รัสเซีย), โซลูชั่นของ 0.1442 โมล l−1 หุ้น (เทียบ) และ l−1 โมล 0.1083 (จลนพลศาสตร์) โซลูชั่นเทียบแปลงจากโซลูชันหุ้นใช้น้ำ deionized กลั่นสองเหตุการณ์ที่ให้ช่วงของ 1.9 – 140 μmol l−13.2 การสนับสนุนวัดแรมสเป็คตราดูดซึมถูกวัดโดยใช้ตัว Shimadzu UVmini 1240 เครื่องทดสอบกรดด่าง (ญี่ปุ่น) ในเซลล์ควอตซ์ (ความยาวเส้นทาง l = 1 cm และ l = 0.1 ซม.) ที่อุณหภูมิห้องในความยาวคลื่นช่วง 190 – 1100 nm ชั่ง มีใช้ดุลวิเคราะห์ Kern 770 (เยอรมนี μg ±0.1 ความแม่นยำ) การกระชับยุบ จบใช้ 38-35 ห้องอัลตราโซนิก (จบเทคโนโลยี รัสเซีย) ตัวอย่างที่ถ่าย ด้วย Eppendorf Pro อัตโนมัติ pipettes (เยอรมนี), (20 ± 1) – (200 ± 1) μl (100 ± 1) μl (1000 ± 1) และ (500 ± 1) – (5000 ± 1) μl3.3 การขั้นตอนวัดเดิม ๆ ใช้ spectrophotometry และก OA มีไว้สำหรับสมาธิ ferroin ของ 3.2 l−1 โมล 10−2 ซื้อในกรดซัลฟิวริก l−1 โมล 12.9 โซลูชัน ferroin หุ้นถูกเพิ่มกับกรดกำมะถันในหลอดทดสอบ ระบายความร้อนด้วยอุณหภูมิห้องกับการไหลของน้ำ ได้อย่างรวดเร็วมีควบคุมอุณหภูมิเริ่มต้น และมีการเริ่มต้นการวัด ในขั้นตอนของการประเมิน spectrophotometric โค้งเดิม ๆ เป็นบันทึกที่ 532 nm (ให้สอดคล้องกับวัด OA) ในเซลล์ที่มีความยาว 1 มม.เส้นทาง แต่ละวัด OA s ได้ 2 ได้ทุก 2 – 4 นาที (รวม 20 วัดต่อโค้ง)3.4 รักษาข้อมูลการวัดผลจะถือว่านำเสนอตามข้อกำหนดของ ISO/IEC 17025:2005 [39] ขีดจำกัดของการตรวจสอบ (ลอด) คำนวณได้จากเกณฑ์ 3σ ตามคำแนะนำปี 1998 ยิ่ง ๆ สำหรับการนำเสนอผลการวิเคราะห์ทางเคมี [40] มีลักษณะกระบวนการทำซ้ำในแบบย่อส่วนเบี่ยงเบนมาตรฐาน (RSD), และค่าต่ำสุดของเส้นโค้งนี้ข้อผิดพลาดถูกใช้เป็นพารามิเตอร์อื่นฝล เพื่อกำหนดความสำคัญของการสรรค์สร้างสัญญาณทดลองควบคุม ชุดถูกเปรียบเทียบ โดย t-ทดสอบของนักเรียน ผลต่างถูกเปรียบเทียบโดยใช้การทดสอบ Fisher3.5 การตั้งค่า OptoacousticOA วัดได้ดำเนินการใช้การตั้งค่าการทดลองแสดงใน Fig. 2a สำหรับรุ่น OA สัญญาณในสื่อภายใต้ศึกษา รังสีของ harmonic ที่สอง (λ = 532 nm) ของ Nd:YAG พัล ใช้เลเซอร์ (มีแสง LQ129 เบลารุส) ΤL ช่วงเวลาพัลส์เลเซอร์ = 22 ns ที่ระดับ 1/e ซึ่งถูกวัด ด้วย photodiode พลังงานเลเซอร์ชีพจรอาจจะแตกต่างกันกับจำนวนของตัวกรองที่เป็นกลาง และไม่เกิน 1 mJ และ fluence เลเซอร์ที่เกี่ยวข้องไม่เกินกี่ cm−2 mJ รังสีเลเซอร์เผยแพร่ผ่านระบบ scatterer แสงและเลนส์นูน การ homogenize กระจายแสงในระหว่างส่วนลำแสงต้องการแสงเส้นผ่าศูนย์กลาง 12 มม.ที่พื้นผิวของสื่อภายใต้การศึกษา อัตราซ้ำของพัลส์เลเซอร์ 50 Hz ซึ่งได้รับอนุญาตให้ลงทะเบียนสัญญาณ OA ใน 3 s (ที่ค่าเฉลี่ยของสัญญาณ 128) และละเลยการเปลี่ยนแปลงสัญญาณใด ๆ ที่เกี่ยวข้องกับปฏิกิริยาเคมีภายในเซลล์ OA จึง

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

3. วัสดุและวิธีการ
3.1 รีเอเจนต์
น้ำปราศจากไอออนที่เราใช้กลั่นทวีคูณ (ต้านทานที่เฉพาะเจาะจงไม่น้อยกว่า 18.0 MΩเซนติเมตรค, ฝรั่งเศส) น้ำยาต่อไปนี้ถูกนำมาใช้ตลอด: CP เข้มข้น H2SO4 (ความหนาแน่น 1.87 กรัมมล-1, 98% โดยน้ำหนัก .; Sigma-Aldrich, CAS ไม่มี. 7664-93-9) ต่อปีและเกรด tris เหล็ก (1,10-phenanthrolinate) ซัลเฟต, เฟ (C12H8N2) 3SO4 (Ferroin, CAS ไม่มี 14634-91-4, M = 692.52 กรัม mol-1;. Labtekh, รัสเซีย), การแก้ปัญหาของหุ้น 0.1442 mol L-1 (สอบเทียบ) และ 0.1083 mol L-1 (จลนศาสตร์) การแก้ปัญหาการสอบเทียบที่ทำจากการแก้ปัญหาสต็อกการใช้น้ำกลั่นปราศจากไอออนกลั่นทวีคูณให้ช่วงของ 1.9-140 ไมโครโมล L-1 3.2 วัดสำรองสเปกตรัมการดูดซึมถูกวัดโดยใช้ Shimadzu UVmini 1240 Spectrophotometer (ญี่ปุ่น) ในเซลล์ควอตซ์ (ความยาวเส้นทาง, L = 1 ซมและ L = 0.1 ซม.) ที่อุณหภูมิห้องในช่วงความยาวคลื่น 190-1100 นาโนเมตร สำหรับชั่งน้ำหนัก, เครื่องชั่งวิเคราะห์เคอร์น 770 (เยอรมนี, ความแม่นยำ± 0.1 ไมโครกรัม) ถูกนำมาใช้ ที่จะกระชับการสลายตัว, อาบน้ำล้ำ GRAD 38-35 (จบเทคโนโลยีรัสเซีย) ถูกนำมาใช้ ตัวอย่างที่ถ่ายด้วย Eppendorf ปิเปต Pro อัตโนมัติ (เยอรมนี) (20 ± 1) - (200 ± 1) ไมโครลิตร (100 ± 1) - (1,000 ± 1) ไมโครลิตรและ (500 ± 1) - (5000 ± 1) ไมโครลิตร3.3 ขั้นตอนการวัดโดยใช้ Kinetic spectrophotometry และโอเอเปคโทรสถูกสร้างขึ้นมาเพื่อความเข้มข้น Ferroin 3.2 × 10-2 โมล L-1 ใน L-1 กรดกำมะถัน 12.9 mol การแก้ปัญหา Ferroin หุ้นถูกบันทึกอยู่ในกรดกำมะถันในหลอดทดลองได้อย่างรวดเร็วการระบายความร้อนที่อุณหภูมิห้องที่มีการไหลของน้ำที่อุณหภูมิเริ่มต้นถูกควบคุมและการวัดจะเริ่มต้น ในขั้นตอนของการวัดสเปกโค้งการเคลื่อนไหวถูกบันทึกไว้ที่ 532 นาโนเมตร (ให้สอดคล้องกับการวัดโอเอ) ในมือถือที่มี 1 มิลความยาวแต่ละเส้นทาง 2 วินาที วัดโอเอได้ทุก 2-4 นาที (รวมเป็น 20 วัดต่อเส้นโค้ง) 3.4 การรักษาข้อมูลผลการวัดที่ได้รับการปฏิบัติที่นำเสนอให้สอดคล้องกับความต้องการของมาตรฐาน ISO / IEC 17025: 2005 [39] ข้อ จำกัด ของการตรวจสอบ (หลอด) จะถูกคำนวณจาก3σ-เกณฑ์ตามข้อเสนอแนะเพื่อนำเสนอผลการวิเคราะห์ทางเคมี IUPAC 1998 [40] ขั้นตอนทั้งหมดที่ได้รับการโดดเด่นด้วยการทำซ้ำส่วนเบี่ยงเบนมาตรฐานสัมพัทธ์ (RSD) และค่าต่ำสุดของเส้นโค้งข้อผิดพลาดนี้ถูกนำมาใช้เป็นพารามิเตอร์มาตรวิทยาอื่น เพื่อตรวจสอบความสำคัญของการมีส่วนร่วมกับสัญญาณของการทดลองควบคุมชุดถูกนำมาเปรียบเทียบโดย t การทดสอบของนักเรียน; ความแปรปรวนถูกนำมาเปรียบเทียบโดยใช้การทดสอบฟิชเชอร์3.5 การติดตั้ง Optoacoustic วัดโอเอได้รับการดำเนินการโดยใช้การตั้งค่าการทดลองแสดงให้เห็นในรูป 2a สำหรับคนรุ่นของสัญญาณโอเอในสื่อภายใต้การศึกษารังสีที่สองฮาร์มอนิ (λ = 532 นาโนเมตร) ของชีพจร Nd: YAG เลเซอร์ (LQ129 พลังงานแสงอาทิตย์, เบลารุส) ถูกนำมาใช้ ระยะเวลาชีพจรเลเซอร์τL = 22 ns ในระดับ 1 / E ซึ่งเป็นวัดที่มีโฟโตไดโอด ชีพจรพลังงานเลเซอร์จะมีการเปลี่ยนแปลงที่มีจำนวนของตัวกรองที่เป็นกลางและไม่เกิน 1 เมกกะจูลและ fluence เลเซอร์ที่สอดคล้องกันไม่เกินกี่เมกกะจูลต่อเซนติเมตร-2 รังสีเลเซอร์เผยแพร่ผ่านระบบของ scatterer แสงและเลนส์นูนจะเป็นเนื้อเดียวกันการกระจายแสงในคานหน้าตัดและทำให้ลำแสงขนาดเส้นผ่าศูนย์กลาง 12 มิลลิเมตรที่พื้นผิวของกลางภายใต้การศึกษา เลเซอร์ชีพจรอัตราการทำซ้ำเป็น 50 Hz ซึ่งได้รับอนุญาตให้เราลงทะเบียนสัญญาณโอเอใน 3 วินาที (ที่ 128 ค่าเฉลี่ยสัญญาณ) และจึงละเลยสัญญาณการเปลี่ยนแปลงใด ๆ ที่เกี่ยวข้องกับปฏิกิริยาทางเคมีภายในเซลล์โอเอ

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

3 . วัสดุและวิธีการ
3.1 . สารเคมี
เราใช้ทวีคูณกลั่นคล้ายเนื้อเยื่อประสานน้ำ ( เฉพาะความต้านทานไม่น้อยกว่า 18.0 เมตรΩซม. มิลลิ , ฝรั่งเศส ) การใช้สารเคมีต่อตลอด : CP เข้มข้น . กรดซัลฟิวริก ( ความหนาแน่น 1.87 กรัมต่อมิลลิลิตร− 1 , 98 % โดยน้ำหนัก ) ; ซิกม่า Aldrich หมายเลข CAS 7664-93-9 ) และปรับเกรดเฟอร์ทริส ( 1,10-phenanthrolinate ) ซัลเฟต , Fe ( c12h8n2 ) 3so4 ( เฟอโร น แคสไม่ 14634-91-4 , M = 580 .52 G − mol 1 ; labtekh , รัสเซีย ) , หุ้นโซลูชั่นของ 0.1442 โมล L − 1 ( สอบเทียบ ) และ 0.1083 โมล L − 1 ( จลนศาสตร์ ) โซลูชั่นที่ปรับแต่งได้จากหุ้นโซลูชั่นการใช้ทวีคูณกลั่นน้ำคล้ายเนื้อเยื่อประสานให้ช่วง 1.9 – 140 μ mol − 1 L .

. . ช่วยวัด
การดูดกลืนรังสี วัดโดยใช้ Shimadzu uvmini 1240 Spectrophotometer ( ญี่ปุ่น ) ในผลึกเซลล์ ( ความยาวของเส้นทางL = 1 ซม. และ L = 0.1 ซม. ) ที่อุณหภูมิห้องในช่วงความยาวคลื่น 190 – 1100 นาโนเมตร สำหรับเครื่องชั่ง , เคิร์น 770 วิเคราะห์สมดุล ( เยอรมัน แม่นยำ±μ 0.1 กรัม ) ใช้ เพื่อกระชับการยุบ จบ 38-35 ultrasonic บาท ( ป. บัณฑิตเทคโนโลยี , รัสเซีย ) พบว่า ตัวอย่างถ่ายด้วยเพนดอร์ฟ โปรปิเปตอัตโนมัติ ( เยอรมนี ) ( 20 ± 1 ) – ( 200 ± 1 ) μ L ( 100 ± 1 ) – ( 1000 ± 1 ) μ L( 500 ± 1 ) – ( 5 , 000 ± 1 ) μ L .

. . ขั้นตอนการวัดโดยใช้วิธี
จลนศาสตร์และ OA สเปกโทรสโกปีถูกทำให้เฟอโร นความเข้มข้น 3.2 × 10 − 2 mol − 1 ลิตรใน 12.9 โมล L − 1 กรดซัลฟูริค หุ้นเฟอโร นสารละลายเพิ่มกรดในหลอดทดลองได้อย่างรวดเร็วเย็นเพื่ออุณหภูมิห้องกับการไหลของน้ำ , อุณหภูมิเริ่มต้นถูกควบคุมและวัดก็เริ่ม ในขั้นตอนของการวัด ) , โค้งพลังงานจลน์เท่ากับ 532 nm ( ให้สอดคล้องกับการวัด OA ) ในเซลล์ที่มีความยาว 1 มม. 2 เอสโอเอ เส้นทางแต่ละวัดมีทุก 2 - 4 นาที ( รวม 20 วัดต่อโค้ง ) .

3.4 .
การรักษาข้อมูลการวัดผลจะถูกนำเสนอตามความต้องการของมาตรฐาน ISO / IEC 17025:2005 [ 39 ] ขีดจำกัดของการตรวจหา ( LOD ) คำนวณจาก 3 σ - เกณฑ์สากล 2541 ตามข้อเสนอแนะเพื่อการนำเสนอผลของการวิเคราะห์ทางเคมี [ 40 ] กระบวนการทั้งหมดเป็นลักษณะโดยการเปรียบเทียบส่วนเบี่ยงเบนมาตรฐาน ( RSD )และค่าต่ำสุดของเส้นโค้งข้อผิดพลาดนี้ถูกใช้เป็นอีกมาตรวิทยาพารามิเตอร์ ศึกษาความสำคัญของการเขียนสัญญาณของการทดลองควบคุมชุดเปรียบเทียบ โดยนักเรียนจำนวน ; ความเปรียบเทียบโดยใช้การทดสอบฟิชเชอร์

3 . optoacoustic ติดตั้ง
OA การวัดจำนวนการใช้ทดลองตั้งค่าแสดงในรูปที่ 2A .สำหรับรุ่นของ OA สัญญาณในสื่อการศึกษา รังสี ของ สองเสียงประสาน ( λ = 532 nm ) ของ pulsed Nd : YAG เลเซอร์ ( lq129 พลังงานแสงอาทิตย์ , เบลารุส ) คือใช้ เลเซอร์ชีพจรระยะเวลาτ L = 22 NS ที่ 1 / E ระดับ ซึ่งวัดด้วยโฟโตไดโอด .เลเซอร์พลังงานอาจจะแปรผันตามจำนวนของตัวกรองที่เป็นกลาง และ ไม่เกิน 1 fluence MJ และเลเซอร์ที่สอดคล้องกัน ไม่เกิน− MJ ซม. ไม่กี่ 2 เลเซอร์รังสีแพร่กระจายผ่านระบบของ scatterer แสงและเลนส์นูน เพื่อการกระจายแสงในคานหน้าตัดเดียวกันและให้คานขนาดเส้นผ่าศูนย์กลาง 12 มม. ที่พื้นผิวของตัวกลางภายใต้การศึกษาเลเซอร์พัลส์ซ้ำเท่ากันคือ 50 Hz ซึ่งอนุญาตให้เราลงทะเบียนสัญญาณ OA 3 S ( 128 สัญญาณค่าเฉลี่ย ) และจึงละเลยสัญญาณการเปลี่ยนแปลงใด ๆที่เกี่ยวข้องกับปฏิกิริยาทางเคมีภายในโอเอ เซลล์