Sample collection. All samples were collected in 2005 by the
same crew of trained FSIS personnel who traveled to the plants.
Carcasses were removed from the line or table with a clean pair of
latex gloves for each carcass and placed in a sterile plastic hag with
WO ml of sterile buffered peptone water. Carcass rinses were
performed by vigorous hand shaking for 60 s prior to pouring the
rinsate into sterile specimen cups. Samples were shipped to the
laboratory by overnight courier in an insulated container containing
frozen ice packs. Upon receipt, the temperature of each sample was
taken using an infrared thermometer (Cole Parmer Instruments Co..
Chicago. IL) and recorded. If the sample temperature was below
10C, the sample was used for culture. In cases where the rinses
were not within an acceptable temperature range upon receipt, the
plant was resampled.
Salmonella culture methods. All samples were cultured for
Salmonella by standard FSIS procedures (22) as follows. Each of
the 30-ml rinse samples was aseptically mixed with 30 ml of
buffered peptone water and incubated for 24 h at 37 C. Following
incubation, samples were screened for the presumptive presence of
Salmonella by the BAX PCR assay according to the manufacturers
instructions (DuPont Qualicon. Wilmington, DE). Positive
Salmonella broths from the BAX assay were confirmed by
conventional culturing method. Preenriched samples (ItS nil) were
transferred to 10 ml of tetrathionate broth (Becton Dickinson,
Sparks. MD) and 0.1 ml of sample was transferred to 10 ml of
Rappaport -Vass iliadis RIO broth (RV; Becton Dickinson); the
enrichment broths were incubated aerobically at 37 C for 24 Ii.
Then, one loopfut each of tetrathionate broth and RappaportVassiliadis
RIO broth was streaked on modified lysine iron agar
(Oxoid. Basingstoke, UK) and brilliant green sulfa agar (Becton
Dickinson), and these were incubated aerobically at 37C for 24 h.
After incubation, a well-isolated colony with typical Salmonella
morphology was picked from modified lysine iron agar and/or
brilliant green sulfa agar and screened on triple sugar iron agar
(Becton Dickinson) and lysine iron agar (Becton Dickinson) slants
by stabbing the agar butts and streaking the slants. Following 18 to
24 h of incubation aerobically at 37 , C, isolates giving typical
biochemical reactions were categorized by somatic surface
antigens (serology, Becton Dickinson) and flagellar antigen (latex
agglutination. Mierogen, Camberley, UK). Two isolates from each
positive carcass rinse were sent to the National Veterinary Services
Laboratories (Ames. IA) for serotyping.
เก็บตัวอย่าง ตัวอย่างทั้งหมดถูกรวบรวมในปี 2548 โดยการลูกเรือที่เหมือนกันของ FSIS บุคลากรผ่านการฝึกอบรมที่เดินทางไปพืชซากถูกเอาออกจากรายการหรือตาราง มีคู่ดีสำหรับแต่ละซากผลิตถุงมือยาง และวาง hag พลาสติกผ่านการฆ่าเชื้อด้วยWO ml ของกอซ buffered น้ำ peptone Rinses ซากได้ดำเนินการ โดยคึกคักมือสั่นสำหรับ 60 s ก่อนเทrinsate เป็นตัวอย่างใส่ถ้วย ตัวอย่างจัดส่งไปห้องปฏิบัติการ โดยพัสดุค้างคืนในภาชนะฉนวนประกอบด้วยการน้ำแข็งน้ำแข็งซอง เมื่อได้รับ อุณหภูมิของแต่ละอย่างได้ดำเนินการโดยใช้เครื่องวัดอุณหภูมิอินฟราเรด (โคล Parmer บริษัทเครื่องมือชิคาโก IL) และบันทึก ถ้าอุณหภูมิตัวอย่างด้านล่างใช้ในวัฒนธรรม 10C ตัวอย่าง ในกรณีที่ rinsesไม่ได้อยู่ในอุณหภูมิยอมรับได้เมื่อได้รับ การโรงงานถูกปรับจำนวนพิกเซลสายวัฒนธรรมวิธีการ ตัวอย่างทั้งหมดมีอ่างสำหรับระดับ โดยมาตรฐาน FSIS กระบวนงาน (22) เป็นดังนี้ แต่ละตัวอย่าง 30 ml ล้างถูกผสมกับ 30 ml ของ asepticallybuffered น้ำ peptone และ incubated ใน 24 ชมที่ 37 C. ต่อไปนี้คณะทันตแพทยศาสตร์ ตัวอย่างถูกฉายในสถานะ presumptive ของระดับ โดยวิเคราะห์ BAX PCR ตามผู้ผลิตคำแนะนำ (ดูปองท์ Qualicon วิลมิ เดอ) ค่าบวกสาย broths จากวิเคราะห์ BAX ถูกยืนยันโดยวิธี culturing ธรรมดา ตัวอย่าง preenriched (เป็น nil) ได้transferred to 10 ml of tetrathionate broth (Becton Dickinson,Sparks. MD) and 0.1 ml of sample was transferred to 10 ml ofRappaport -Vass iliadis RIO broth (RV; Becton Dickinson); theenrichment broths were incubated aerobically at 37 C for 24 Ii.Then, one loopfut each of tetrathionate broth and RappaportVassiliadisRIO broth was streaked on modified lysine iron agar(Oxoid. Basingstoke, UK) and brilliant green sulfa agar (BectonDickinson), and these were incubated aerobically at 37C for 24 h.After incubation, a well-isolated colony with typical Salmonellamorphology was picked from modified lysine iron agar and/orbrilliant green sulfa agar and screened on triple sugar iron agar(Becton Dickinson) and lysine iron agar (Becton Dickinson) slantsby stabbing the agar butts and streaking the slants. Following 18 to24 h of incubation aerobically at 37 , C, isolates giving typicalbiochemical reactions were categorized by somatic surfaceantigens (serology, Becton Dickinson) and flagellar antigen (latexagglutination. Mierogen, Camberley, UK). Two isolates from eachpositive carcass rinse were sent to the National Veterinary ServicesLaboratories (Ames. IA) for serotyping.
การแปล กรุณารอสักครู่..

ตัวอย่างคอลเลกชัน ตัวอย่างทั้งหมดจะถูกเก็บใน 2005
เดียวกันลูกเรือของบุคลากร FSIS การฝึกอบรมผู้ที่จะเดินทางไปพืช
ซากถูกถอดออกจากสายหรือตารางกับคู่ของถุงมือยางสำหรับทำความสะอาด
แต่ละซากและวางไว้ในคนแก่พลาสติกปลอดเชื้อด้วย
wo มิลลิลิตรตามลำดับฆ่าเชื้อในน้ำ ซากถูก
ขับร้องโดย rinses คึกคัก จับมือ 60 s ก่อนที่จะเท
rinsate ลงในถ้วยอย่างปลอดเชื้อ ตัวอย่างจะถูกส่งไปยังห้องปฏิบัติการ โดยค้างคืนจัดส่ง
ในฉนวนภาชนะที่มี
แพ็คน้ำแข็งแช่แข็ง เมื่อได้รับอุณหภูมิของแต่ละตัวอย่าง
ถ่ายโดยใช้เครื่องวัดอุณหภูมิอินฟราเรด ( โคล พาร์เมอร์เครื่องมือ Co .
ชิคาโก อิล ) และการบันทึก ถ้าตัวอย่างที่อุณหภูมิต่ำกว่า
10C , ตัวอย่างการใช้วัฒนธรรม ในกรณีที่ rinses
ไม่ภายในช่วงอุณหภูมิที่ยอมรับได้เมื่อได้รับ
พืชซึ่งจะช่วยลดเวลา วิธีการเพาะเชื้อ . ตัวอย่างอาหาร
Salmonella โดยวิธีการ FSIS มาตรฐาน ( 22 ) ดังนี้ แต่ละ
30 ml ล้างจำนวน aseptically ผสม 30 มล.
2 น้ำบ่มเป็นเวลา 24 ชั่วโมง ตามลำดับที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียส ดังต่อไปนี้
ระยะเวลาตัวอย่างจากษาตนของ Salmonella โดยวิธี PCR assay แบกซ์
ตามที่ผู้ผลิตแนะนำ ( ดูปองท์ qualicon . Wilmington , DE ) บวก
Salmonella broths จากแบกซ์ ) ได้รับการยืนยันโดย
วิธีการเลี้ยงแบบดั้งเดิม preenriched ตัวอย่าง ( 0 )
โอน 10 มิลลิลิตรของน้ำซุปเตตราไทโอเนต ( เบคตอนดิกคินสัน
, ประกายไฟ MD ) และ 0จำนวน 1 มิลลิลิตร โอน 10 มล.
แร็ปเปอพอร์ต - แวสอิลลาดีสริโอ ( RV broth ; เบคตอน Dickinson ) ;
าเสริมถูกบ่มที่ 37 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 24 aerobically 2 .
แล้ว หนึ่ง loopfut แต่ละของน้ำซุปและซุปคือเตตราไทโอเนต rappaportvassiliadis
ริโอลายบนชุดเหล็กดัดวุ้น
( oxoid . Basingstoke , สหราชอาณาจักร ) และสดใสสีเขียวซัลฟา ( เบคตอน
Dickinson )และเหล่านี้เป็นเชื้อที่ 37c aerobically
หลังจากบ่มเป็นเวลา 24 ชั่วโมง , แยกดีอาณานิคมกับสัณฐาน Salmonella
โดยทั่วไปคือเลือกจากวุ้นดัดเหล็ก ไลซีน และ / หรือ
สดใสสีเขียวซัลฟาวุ้น และฉายในสามน้ำตาลเหล็กวุ้น
( เบคตอน Dickinson ) ชุดเหล็ก ( เบคตอน Dickinson ) slants
โดยแทงวุ้น และที่ก้น streaking slants . 18
ต่อไปนี้24 ชั่วโมง aerobically บ่มที่ 37 , C , สายพันธุ์ที่ให้ปฏิกิริยาทางชีวเคมีทั่วไป
ส่วนแบ่งโดยแอนติเจนพื้นผิว ( เซรุ่มวิทยา เบคตอน Dickinson ) และ flagellar แอนติเจน ( latex agglutination
mierogen Camberley , สหราชอาณาจักร ) 2 ไอโซเลทจากแต่ละ
บวกซากบ้วนถูกส่งไปยังห้องทดลองแห่งชาติบริการ
สัตวแพทย์ ( เอม IA ) สำหรับการสำรวจ .
การแปล กรุณารอสักครู่..
