labeled with 5m l annexin V-fluores

labeled with 5m l annexin V-fluorescein and 5m l PI in 100m l
of binding buffer (10mM HEPES/NaOH, pH 7.4, 140mM
NaCl, 2.5mM CaCl2). After 15 min incubation at room temperature,
400m l of binding buffer was added in each sample
and cells were then analyzed by a FACSCalibur flow cytometer
(BD Bioscience, San Jose, CA, U.S.A.) of 20000 cells
in each group. Annexin-V binds to those cells that express
phosphatidylserine on the outer layer of cell membrane.
This allows for the discrimination of living cells (unstained
with either fluorochrome) from apoptotic cells (stained
only with annexin-V) and necrotic cells (stained with both of
annexin-V and PI).16,17) Data analysis was performed with
the standard Cell Quest Software. All experiments were
performed in duplicate and reproducibility was checked in
three independent experiments.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ติดป้ายชื่อ ด้วย annexin V-fluorescein และ 5m l PI ใน 100m l l ม 5บัฟเฟอร์รวม (10mM HEPES NaOH ค่า pH 7.4, 140 มม.NaCl, CaCl2 2.5 mM) หลังจาก 15 นาทีบ่มที่อุณหภูมิห้องเพิ่ม 400m l ของบัฟเฟอร์รวมในแต่ละอย่างและเซลล์แล้วถูกวิเคราะห์ โดย cytometer การไหล FACSCalibur(วิทยาศาสตร์ชีวภาพ BD, San Jose, CA สหรัฐอเมริกา) ของเซลล์ 20000ในแต่ละกลุ่ม Annexin V binds ไปยังเซลล์เหล่านั้นที่แสดงphosphatidylserine บนชั้นนอกของเยื่อหุ้มเซลล์สำหรับการเลือกปฏิบัติ (unstained เซลล์ชีวิตมีทั้ง fluorochrome) จากเซลล์ apoptotic (ย้อมสีด้วย annexin V) และเซลล์ necrotic (ย้อมได้ทั้งannexin V และ PI) .16,17) ดำเนินการวิเคราะห์ข้อมูลด้วยมาตรฐานเซลล์แสวงหาซอฟต์แวร์ มีการทดลองทั้งหมดทำซ้ำ และสามารถตรวจสอบในสามการทดลองอิสระ

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ที่มีป้ายกำกับ 5m L annexin V-fluorescein และ 5m L PI ใน 100m L
ผูกพันบัฟเฟอร์ (10 mM HEPES / NaOH ค่า pH 7.4 140mm
โซเดียมคลอไรด์, 2.5mm CaCl2) หลังจาก 15 นาทีบ่มที่อุณหภูมิห้อง
L 400m ของการผูกบัฟเฟอร์ถูกเพิ่มเข้ามาในแต่ละตัวอย่าง
และเซลล์ที่ได้มาวิเคราะห์แล้วโดย FACSCalibur ไหล cytometer
(BD ชีววิทยาศาสตร์, San Jose, CA, USA) 20000 เซลล์
ในแต่ละกลุ่ม Annexin-V ผูกกับเซลล์เหล่านั้นที่แสดง
phosphatidylserine บนชั้นนอกของเยื่อหุ้มเซลล์.
นี้จะช่วยให้การเลือกปฏิบัติของเซลล์ (ไม่มีรอยเปื้อนที่อยู่อาศัย
ที่มีทั้งสารเรืองแสง) จากเซลล์ apoptotic (ย้อมสี
เฉพาะกับ annexin-V) และเซลล์เนื้อตาย (ย้อมด้วยสีทั้ง ของ
annexin V และ PI) .16,17) การวิเคราะห์ข้อมูลได้ดำเนินการกับ
เซลล์มาตรฐานเควสซอฟท์แว การทดลองทั้งหมดถูก
ดำเนินการในการทำสำเนาซ้ำกันและได้รับการตรวจสอบใน
การทดลองสามอิสระ

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ป้ายกับ 5m ผม v-fluorescein ของเซลล์และพายใน 100m ผม 5M lของผูกบัฟเฟอร์ ( 10mm ฮีเปส / NaOH pH 7.4 140 มม.เกลือ , 2.5mm CaCl2 ) หลัง 15 นาที บ่มที่อุณหภูมิห้อง400 เมตรลิตรผูกบัฟเฟอร์เพิ่มในแต่ละตัวอย่างและเซลล์ที่ได้นำมาวิเคราะห์โดยการใช้โมโน facscalibur( BD วิทยาศาสตร์ชีวภาพ San Jose , CA , USA ) , เซลล์ในแต่ละกลุ่ม annexin-v ผูกกับพวกเซลล์ที่แสดงฟอสฟาไทดิลเซอรีนบนชั้นนอกของเยื่อหุ้มเซลล์ .นี้จะช่วยให้สำหรับการอาศัยเซลล์ ( ไม่มีรอยเปื้อนกับฟลู โรโครม ) จากเนื้อเยื่อ ( เปรอะเปื้อนแต่ annexin-v ) และเซลล์ ( ที่เปื้อนทั้งของและ annexin-v พี ) อันเป็น ) วิเคราะห์ข้อมูลด้วยมาตรฐานเซลล์ค้นหาซอฟต์แวร์ การทดลองทั้งหมดดำเนินการในที่ซ้ำกันตรวจสอบและตรวจสอบในสามการทดลองที่เป็นอิสระ