Anti-diabetic activity against type

Anti-diabetic activity against type 2 diabetes was
assayed according to method of Sauma L. et al. [31].
HepG2 cells were transfected with plasmid pPPRE-Luc and
plasmid phRL-TK. pPPRE-Luc was a plasmid in which the
PPAR-responsive element (PPRE) and the firefly luciferase
reporter gene were transferred, while plasmid phRL-TK as
internal reference was transfected with Renilla luciferase
reporter gene. After the transfected cells were seeded in
96-well plates at a cell density of 1.5 × 104
/well and cultured
in the low-sugar DMEM containing 100 U·mL−1
of
streptomycin and 100 U·mL−1 of penicillin at 37 o
C overnight.
The medium was refreshed with low-sugar DMEM
containing the sample under testing. The blank control
(non-transfected cells), negative control (cells transfected and
added no samples), and positive control (cells transfected and
added pioglitazone) were included and cultured under the
same conditions. After an additional 24-h culture, the
luciferase activity and excitation rate were determined by
measuring chemiluminescence intensity L using a DualLuciferase
Reporter Gene Assay Kit (Promega, USA). L1
represented the firefly luciferase chemiluminescence intensity,
while L2 represented the L value of internal reference. The
excitation rate (ER) was calculated using the following
equation

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

กิจกรรมป้องกันโรคเบาหวานกับโรคเบาหวานชนิดที่ 2 คือassayed ตามวิธีของ Sauma L. et al. [31]เซลล์ HepG2 ถูก transfected กับ pPPRE plasmid ตกแต่ง และplasmid tk. phRL pPPRE-Luc รับ plasmid ซึ่งการองค์ประกอบที่ตอบสนองต่อ PPAR (PPRE) และ luciferase หิ่งห้อยข่าวยีนถ่ายโอน ขณะทีเค phRL plasmid เป็นอ้างอิงภายในเป็น transfected กับ Renilla luciferaseข่าวยีน หลังจากที่เซลล์ transfected ถูกเตรียมในแผ่น 96 หลุมที่มีความหนาแน่นเซลล์จาก 1.5 × 104/ ดี และล้างใน DMEM น้ำตาลต่ำที่ประกอบด้วย 100 U·mL−1 ของstreptomycin และ 100 U·mL−1 ยาเพนนิซิลลินที่ 37 oC ค้างคืนการฟื้นฟู ด้วยน้ำตาลต่ำ DMEMประกอบด้วยตัวอย่างภายใต้การทดสอบ ตัวควบคุมว่าง(ไม่ใช่ transfected เซลล์), ลบควบคุม (เซลล์ที่ transfected และเพิ่มไม่มีตัวอย่าง), และการควบคุมเชิงบวก (เซลล์ที่ transfected และเพิ่มยา pioglitazone) รวม และล้างภายใต้การเงื่อนไขเดียวกัน หลังจาก 24 ชม.เพิ่มเติมวัฒนธรรม การดำเนินการโดย luciferase กิจกรรมและกระตุ้นอัตราวัดความเข้ม chemiluminescence L ที่ใช้เป็น DualLuciferaseข่าวยีน Assay Kit (Promega สหรัฐอเมริกา) L1แสดงความเข้ม chemiluminescence luciferase หิ่งห้อยในขณะที่ L2 แสดงค่า L ของการอ้างอิงภายใน การกระตุ้นอัตรา (ER) ได้คำนวณการใช้ต่อไปนี้สมการ

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

กิจกรรมป้องกันโรคเบาหวานโรคเบาหวานชนิดที่ 2 ได้รับการ
assayed ตามวิธีการของ Sauma ลิตร, et al [31].
เซลล์ HepG2 ถูก transfected กับพลาสมิด pPPRE-Luc และ
พลาสมิด phRL-TK pPPRE-Luc เป็นพลาสมิดที่เป็น
องค์ประกอบ PPAR ตอบสนอง (PPRE) และหิ่งห้อย luciferase
ยีนนักข่าวถูกย้ายในขณะที่พลาสมิด phRL-TK เป็น
อ้างอิงภายใน transfected กับ Renilla luciferase
นักข่าวยีน หลังจากเซลล์ transfected ถูกเมล็ดใน
แผ่น 96 หลุมที่มีความหนาแน่นของเซลล์ 1.5 × 104
/ ดีและเพาะเลี้ยง
ใน DMEM น้ำตาลต่ำที่มี 100 U · ML-1
ของ
streptomycin และ 100 U · ML-1 จากยาปฏิชีวนะที่ 37 o
C ค้างคืน.
กลางได้รับการฟื้นฟูด้วย DMEM น้ำตาลต่ำ
มีตัวอย่างภายใต้การทดสอบ การควบคุมว่างเปล่า
(เซลล์ที่ไม่ใช่ transfected), เครื่องควบคุมเชิงลบ (เซลล์ transfected และ
เพิ่มไม่มีตัวอย่าง) และเครื่องควบคุมเชิงบวก (เซลล์ transfected และ
เพิ่มยา pioglitazone) ถูกรวมและการเพาะเลี้ยงภายใต้
เงื่อนไขเดียวกัน หลังจากวัฒนธรรม 24-H เพิ่มเติมที่
กิจกรรมและการกระตุ้นอัตรา luciferase ถูกกำหนดโดย
การวัดความเข้ม chemiluminescence L ใช้ DualLuciferase
Kit ผู้สื่อข่าวยีน Assay (Promega, สหรัฐอเมริกา) L1
เป็นตัวแทนของความเข้ม luciferase chemiluminescence หิ่งห้อย
ขณะ L2 เป็นตัวแทนของค่า L ของการอ้างอิงภายใน
อัตราการกระตุ้น (ER) ที่คำนวณได้ใช้ต่อไปนี้
สมการ

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

กิจกรรมต่อต้านต่อต้านเบาหวาน โรคเบาหวานชนิดที่ 2 คือปริมาณตามวิธีของ sauma . et al . [ 31 ]เซลล์มะเร็งตับได้ transfected กับพลาสมิดและ pppre ลุคพลาสมิด phrl TK . pppre ลุคเป็นพลาสมิดที่ppar ตอบสนององค์ประกอบ ( ppre ) และหิ่งห้อยลูซิเฟอเรสยีนนักข่าวถูกย้าย ในขณะที่ phrl TK เป็นพลาสมิดอ้างอิงภายในได้ transfected กับ renilla ลูซิเฟอเรสยีน นักข่าว หลังจาก transfected เซลล์มีเมล็ดใน96 ดีจานที่ความหนาแน่นเซลล์ 1.5 × 104/ ดี และการเพาะเลี้ยงใน dmem ที่มีน้ำตาลต่ำ 100 u ด้วย− 1 มิลลิลิตรของและ streptomycin 100 u ด้วย− 1 มิลลิลิตรของเพนิซิลินที่ 37 oC ในชั่วข้ามคืนสื่อถูกฟื้นฟูด้วย dmem น้ำตาลต่ำที่ใช้ในการทดสอบ การควบคุมที่ว่างเปล่า( ไม่ transfected เซลล์ ) , การควบคุม ( เซลล์ transfected ลบและเพิ่มไม่มีตัวอย่าง ) และการควบคุม ( เซลล์ transfected บวกและเพิ่มประโยชน์ ) ถูกรวมและเพาะเลี้ยงภายใต้เงื่อนไขเดียวกัน หลังจากที่วัฒนธรรม 24-h เพิ่มเติมกิจกรรมเอนไซม์ลูซิเฟอเรส ซึ่งถูกกระตุ้นโดยผมใช้วัดความเข้ม dualluciferase เคมีลูมิเนสเซนชุดตรวจยีนนักข่าว ( promega , USA ) L1แสดงหิ่งห้อยลูซิเฟอเรสนโยบายแรงงานเข้มในขณะที่ L2 แทนค่าของการอ้างอิงภายใน ที่อัตราการกระตุ้น ( ER ) คำนวณได้โดยต่อไปนี้สมการ