antigensLymnea ollula snails were infected with miracidia (with onemiracidium per snail). About 45 days after infection, cercariaewere shed from the snails and settled on the 5 × 5 cm cellophanepapers and transformed into metacercariae as previously described(Kueakhai et al., 2013b). The metacercariae were collected fromthe papers and washed several times with 0.85% NaCl solution. NEJwas excysted by activating metacercariae using a method describedpreviously (Sethadavit et al., 2009). The 4-week-old juveniles werecollected from Golden Syrian hamsters orally infected with F. gigan-tica metacercariae. Adult parasites and eggs were collected fromthe bile ducts and gallbladders of naturally infected cattle killedat a local abattoir in Patumthanee province, Thailand. The wholebody (WB) extracts of NEJs, juveniles and adults were preparedas previously described (Kueakhai et al., 2011, 2013a). For theexcretory–secretory antigens (ES), the fresh 4 week-old juvenileswere washed with 0.85% NaCl and incubated in RPMI medium at37◦C, the culture medium was collected every 6 h for 24 h. Afterincubation, the medium was pooled and centrifuged at 5000 g at4◦C for 20 min. One micro molar phenylmethanesulfonylfluorideor phenylmethylsulfonyl fluoride (PMSF) was added into the super-natant and then the mixture was filtered through 0.22 m milliporefilter. The concentration of the recovered ES antigens was deter-mined by Lowry’s method (Bio-Rad, Philadelphia, PA, USA). Allspecimens were kept at −80◦C until use.
antigensLymnea หอย ollula มีการติดเชื้อ miracidia (กับ onemiracidium ต่อหอยทาก) ประมาณ 45 วันหลังจากการติดเชื้อ, cercariaewere หลั่งจากหอยทากและตั้งรกรากอยู่ใน 5 × 5 ซม. cellophanepapers และกลายเป็น metacercariae ตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ (Kueakhai et al., 2013b) metacercariae ถูกเก็บ fromthe เอกสารและล้างหลายครั้งด้วย 0.85% วิธีการแก้ปัญหาโซเดียมคลอไรด์ NEJwas excysted โดยเปิดใช้งาน metacercariae โดยใช้วิธีการ describedpreviously (Sethadavit et al., 2009) คนหนุ่มสาว 4 สัปดาห์อายุ werecollected จากซีเรียแฮมสเตอร์โกลเด้นที่ติดเชื้อเอฟปากเปล่ากับ Gigan-TICA metacercariae ปรสิตผู้ใหญ่และไข่ที่ถูกเก็บรวบรวม fromthe ท่อน้ำดีและถุงน้ำดีวัวที่ติดเชื้อตามธรรมชาติ killedat โรงฆ่าสัตว์ในท้องถิ่นในจังหวัดปทุมธานี, ไทย wholebody (WB) สารสกัดจาก NEJs หนุ่มสาวและผู้ใหญ่ถูก preparedas อธิบายไว้ก่อนหน้า (Kueakhai et al., 2011 2013a) สำหรับแอนติเจน theexcretory-หลั่ง (ES), สด juvenileswere 4 สัปดาห์อายุล้างด้วยโซเดียมคลอไรด์ 0.85% และบ่มใน RPMI กลางat37◦Cกลางวัฒนธรรมที่ถูกเก็บรวบรวมทุก 6 ชั่วโมงเป็นเวลา 24 ชั่วโมง Afterincubation กลางที่ถูกรวบรวมและหมุนเหวี่ยงที่ 5000 กรัมat4◦Cสำหรับ 20 นาที หนึ่งไมโครกราม phenylmethanesulfonylfluorideor phenylmethylsulfonyl ลูออไรด์ (PMSF) ถูกเพิ่มเข้าไปในซุปเปอร์ natant แล้วส่วนผสมที่ถูกกรองผ่าน 0.22 m? milliporefilter ความเข้มข้นของหาย ES แอนติเจนถูกยับยั้ง-ขุดโดยวิธีการของโลว์รีย์ (Bio-Rad, Philadelphia, PA, USA) Allspecimens ถูกเก็บไว้ที่-80◦Cจนถึงการใช้งาน
การแปล กรุณารอสักครู่..

antigenslymnea ollula หอยทากติดเชื้อ แรงโน้มถ่วง ( onemiracidium ต่อหอยทาก ) ประมาณ 45 วัน หลังจากการติดเชื้อ cercariaewere หลั่งจากหอยทาก และตัดสิน 5 × 5 ซม. cellophanepapers และแปลงเป็นเมตาเซอร์คาเรียตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ ( kueakhai et al . , 2013b ) จากเอกสารและเก็บรวบรวม metacercariae ล้างหลายครั้งด้วยสารละลาย NaCl 0.85 % nejwas excysted โดยการใช้วิธี describedpreviously เมตาเซอร์คาเรีย ( sethadavit et al . , 2009 ) การ 4-week-old เยาวชนเก็บจากสีทองซีเรียแฮมสเตอร์ปากเปล่าติด F . gigan TICA เมตาเซอร์คาเรีย . ผู้ใหญ่ไข่ปรสิตและเก็บจากท่อน้ำดี และถุงน้ำดีตามธรรมชาติที่ติดเชื้อวัว killedat เป็นโรงฆ่าสัตว์ patumthanee ท้องถิ่นในจังหวัด ประเทศไทย ด้านประสิทธิภาพ ( WB ) สารสกัดจาก nejs เยาวชนและผู้ใหญ่ , มี preparedas อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ ( kueakhai et al . , 2011 , ที่มีมากกว่า ) สำหรับ theexcretory –พบแอนติเจน ( ES ) สัปดาห์สด 4 เก่า juvenileswere ล้างด้วยเกลือโซเดียมคลอไรด์ร้อยละ 0.85 โดยใน RPMI กลาง 37 ◦ C , วัฒนธรรมสื่อเก็บข้อมูลทุก 6 ชั่วโมงเป็นเวลา 24 ชั่วโมง ว่า สื่อถูกรวมไฟฟ้าที่ 5000 กรัม at4 ◦ C เป็นเวลา 20 นาทีหนึ่งไมโครโมล phenylmethanesulfonylfluorideor phenylmethylsulfonyl ฟลูออไรด์ ( PMSF ) คือเพิ่มเป็นซูเปอร์ natant หลังจากนั้นส่วนผสมถูกกรองผ่าน 0.22 เมตร milliporefilter . ความเข้มข้นของแอนติเจนคือยับยั้งไว้หาย ES โดยวิธีการของโลว์รีย์ ( ไบโอ ราด , Philadelphia , PA , USA ) allspecimens ไว้ที่ 80 ◦− C จนใช้
การแปล กรุณารอสักครู่..
