Reductase enzymes during decoloriza

Reductase enzymes during decolorization The azo reductase activity was assayed by modifying earlier method (23); monitoring the decrease in the Methyl Red concentration at 440 nm in a reaction mixture of 2.2 ml containing 152 mM Methyl Red, 50 mM sodium phosphate buffer (pH 5.5) and 20 mM NADH.
Enzyme activity was calculated by using molar extinction coefficient of Methyl Red.
NADHeDCIP reductase activity was assayed by following the procedures reported earlier (11).
Riboflavin reductase NAD(P)H:flavin oxidoreductase was measured by the method of Fontecave et al. (24) with some modification. In this aerobic assay, the flavin reductase catalyzes the reduction of riboflavin, and the reduced riboflavin is
immediately reoxidized by oxygen.
Cell extract was added to a solution (final volume, 1 ml) containing 100 mM of TriseHCl (pH 7.5), 25 mmol of NADPH and
0.003 unit riboflavin. The decrease in absorbance at 340 nm (A340) was measured spectrophotometrically.
Reaction rates were calculated by using a molar extinction coefficient of 6.3 mM cm1.
One unit of enzyme activity was defined as mg of riboflavin reduced min/mg protein. All enzyme assays were run in triplicate.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

เอนไซม์ reductase ในระหว่างบำบัดกิจกรรม azo reductase ถูก assayed โดยการปรับเปลี่ยนวิธีการก่อนหน้า (23); ตรวจสอบการลดลงของความเข้มข้น Methyl Red ที่ 440 nm ในการผสมผสานระหว่างปฏิกิริยา 2.2 ml ประกอบด้วย Methyl Red, 50 mM โซเดียมฟอสเฟตบัฟเฟอร์ (pH 5.5) 152 มม. และ 20 มม. NADH เอนไซม์ถูกคำนวณ โดยใช้สัมประสิทธิ์สูญพันธุ์สบของ Methyl Redกิจกรรม NADHeDCIP reductase เป็น assayed ตอนรายงานก่อนหน้า (11)ไรโบเฟลวิน reductase และ (P) H:flavin oxidoreductase ถูกวัด โดยวิธีของ Fontecave et al. (24) มีการปรับเปลี่ยนบาง ทดสอบนี้เต้นแอโรบิก การ flavin reductase catalyzes ลดไรโบเฟลวิน และวิตามินลดลงจะทันที reoxidized ด้วยออกซิเจน สารสกัดจากเซลล์มีค่า (ปริมาตรสุดท้าย 1 ml) ประกอบด้วย 100 มม.ของ TriseHCl (pH 7.5), mmol 25 ของ NADPH และไรโบเฟลวินหน่วย 0.003 ลดลง absorbance ที่ 340 nm (A340) ถูกวัด spectrophotometrically อัตราปฏิกิริยาคำนวณได้ โดยใช้สัมประสิทธิ์สูญพันธุ์สบของ cm1 6.3 มม หน่วยหนึ่งของเอนไซม์ถูกกำหนดเป็นมิลลิกรัมวิตามินลดลงต่ำสุด/มิลลิกรัมโปรตีน Assays เอนไซม์ทั้งหมดถูกเรียกใช้ใน triplicate

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

เอนไซม์ reductase ลดสีในช่วงกิจกรรม reductase เอโซได้รับการวิเคราะห์โดยการปรับเปลี่ยนวิธีการก่อนหน้านี้ (23); การตรวจสอบการลดลงของความเข้มข้นของสีแดง Methyl ที่ 440 นาโนเมตรในผสมปฏิกิริยา 2.2 มล. มี 152 มิลลิเมธิลสีแดง 50 มิลลิโซเดียมฟอสเฟตบัฟเฟอร์ (pH 5.5) และ NADH มิลลิ 20.
กิจกรรมเอนไซม์ที่คำนวณโดยใช้ค่าสัมประสิทธิ์การสูญเสียฟันกรามของ Methyl แดง .
กิจกรรม reductase NADHeDCIP ได้รับการวิเคราะห์โดยทำตามขั้นตอนรายงานก่อนหน้านี้ (11).
Riboflavin reductase NAD (P) H: Flavin oxidoreductase วัดโดยวิธีการ Fontecave et al, (24) มีการดัดแปลงบางส่วน ในการทดสอบแอโรบิกนี้ reductase flavin กระตุ้นการลดลงของ riboflavin และ riboflavin ลดลงเป็น
reoxidized ทันทีโดยออกซิเจน.
สารสกัดจากเซลล์ถูกบันทึกอยู่ในวิธีการแก้ปัญหา (เล่มสุดท้าย 1 มล.) ที่มี 100 มิลลิของ TriseHCl (pH 7.5) 25 มิลลิโมล ของ NADPH และ
0.003 riboflavin หน่วย การลดลงของการดูดกลืนแสงที่ 340 นาโนเมตร (A340) วัด spectrophotometrically.
อัตราการเกิดปฏิกิริยาจะถูกคำนวณโดยใช้ค่าสัมประสิทธิ์การสูญเสียฟันกราม 6.3 มิลลิ CM1.
หนึ่งหน่วยของเอนไซม์ถูกกำหนดเป็นมิลลิกรัม riboflavin ลดนาที / มก. โปรตีน การตรวจเอนไซม์ทั้งหมดได้รับการทำงานในเพิ่มขึ้นสามเท่า

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

และเอนไซม์ในการกำจัดพวก Azo เอนไซม์ซีรั่มโดยวิธีแก้ไขก่อนหน้านี้ ( 23 ) ; การลดปริมาณเมทิลเรด 440 nm ในปฏิกิริยา 2.2 ml ที่มีส่วนผสมของเมทิลเรด 152 มม. 50 มม. โซเดียมฟอสเฟตบัฟเฟอร์ pH 5.5 ) และ 20 มิลลิเมตร แอมโมเนีย
เอนไซม์โดยใช้ค่าสัมประสิทธิ์การสูญพันธุ์โดย
เมทิลเรดกิจกรรมของเอนไซม์ nadhedcip ซีรั่มตามขั้นตอนรายงานก่อนหน้า ( 11 ) .
Riboflavin และ NAD ( P ) H : ฟลาวินอ ซิโดรีดักเทสวัดโดยวิธีของ fontecave et al . ( 24 ) มีการปรับเปลี่ยน ในการทดสอบแบบแอโรบิกนี้ ฟลาวินเทสและการลดลงของ Riboflavin และลดลง Riboflavin เป็น
ทันที reoxidized โดยออกซิเจน
สารสกัดจากเซลล์ได้เพิ่มโซลูชั่น ( ปริมาณ 1 ml สุดท้าย ) ( 100 มม. trisehcl ( pH 7.5 ) , และ 25 มิลลิโมลของ nadph
1 วิตามินบี 2 หน่วย การลดลงของค่าการดูดกลืนแสงที่ 340 nm ( a340 ) วัดนี้ .
อัตราปฏิกิริยาคำนวณโดยใช้ค่าสัมประสิทธิ์การสูญพันธุ์โมล CM1 6.3 มม.
หนึ่งหน่วยของเอนไซม์ถูกกำหนดเป็นมิลลิกรัม วิตามินบีสองลดโปรตีน มิน / mgใช้เอนไซม์ทั้งหมดถูกเรียกทั้งสามใบ