For the detection of MBV, the neste

For the detection of MBV, the nested PCR primers and protocol described by Belcher &
Young (1998) were employed. A nested PCR protocol (Hossain et al. 2001) was also used for WSSV detection. PCR was carried out in a 30 µl reaction mixture consisting of: 1 × PCR buffer; 5 pmol of each primer for HPV and WSSV, and 10 pmol of each primer for MBV; 50 µM each of dATP, dCTP, dGTP and dTTP; 0.9 U of Taq DNA polymerase; and 2 µl of DNA extract. Total DNA extracted from shrimp showing histopathological changes characteristic of WSSV, MBV and HPV were used as templates for positive controls, and DNA extracted from healthy freshwater fish Labeo rohita was used as the template for the negative control. Amplification was carried out in a thermocycler (M. J. Research). The amplified PCR products were electrophoresed in a 1.2% agarose gel containing 0.5 µg ml–1 ethidium bromide, and visualized with a UVtransilluminator (Gel doc system, Hero Lab).

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

สำหรับการตรวจสอบของ MBV ที่ไพรเมอร์ PCR ที่ซ้อนกันและโปรโตคอลอธิบายโดย Belcher &
Young (1998) ถูกว่าจ้าง ซ้อนกัน PCR Protocol (Hossain et al. 2001) นอกจากนี้ยังใช้ในการตรวจหาตัวแดงดวงขาว PCR ได้ดำเนินการใน 30 ไมโครลิตรปฏิกิริยาส่วนผสมประกอบด้วย: 1 × PCR บัฟเฟอร์; 5 pmol ของแต่ละไพรเมอร์สำหรับการติดเชื้อ HPV และตัวแดงดวงขาวและ 10 pmol ของแต่ละไพรเมอร์สำหรับ MBV; 50 ไมครอนแต่ละ dATP, dCTP, dGTP และ dTTP; 0.9 U ของ Taq DNA Polymerase; และ 2 ไมโครลิตรของสารสกัดดีเอ็นเอ รวมดีเอ็นเอที่สกัดจากกุ้งแสดงการเปลี่ยนแปลงทางจุลพยาธิวิทยาลักษณะของตัวแดงดวงขาว, MBV HPV และถูกนำมาใช้เป็นแม่แบบสำหรับการควบคุมบวกและดีเอ็นเอที่สกัดจากปลาน้ำจืดที่มีสุขภาพดี Labeo rohita ถูกใช้เป็นแม่แบบสำหรับการควบคุมเชิงลบ ขยายได้ดำเนินการใน thermocycler A (MJ) การวิจัย ผลิตภัณฑ์ PCR ขยายถูก electrophoresed ในเจล agarose 1.2% ที่มี 0.5 ไมโครกรัมต่อมิลลิลิตร-1 ethidium bromide และมองเห็นด้วย UVtransilluminator (ระบบเจล DOC, ฮีโร่แล็บ)

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ตรวจหาเชื้อ MBV , PCR ไพรเมอร์ที่ซ้อนกันและอธิบายโดยเบลเชอร์ & โปรโตคอลเด็ก ( 2541 ) งาน เป็นแบบซ้อนกันโดยโปรโตคอล ( Hossain et al . 2001 ) ยังใช้สำหรับการตรวจจับี . ซึ่งดำเนินการใน 30 µ L ปฏิกิริยาผสมประกอบด้วย : บัฟเฟอร์ PCR 1 × 5 pmol แต่ละ primer สำหรับ HPV และี และ 10 pmol แต่ละ primer สำหรับ MBV 50 µ M แต่ละ datp dctp dgtp , และ , dttp ; 0.9 U ของดีเอ็นเอพอลิเมอเรส ทัค และ 2 µลิตร สกัด ดีเอ็นเอ ดีเอ็นเอทั้งหมดสกัดจากกุ้งแสดงการศึกษาการเปลี่ยนแปลงลักษณะของเชื้อ MBV ีและ , ใช้เป็นแม่แบบสำหรับการควบคุมที่ดี และดีเอ็นเอที่สกัดจากปลามีสุขภาพดีสมัยจาโคเบียน rohita ถูกใช้เป็นแม่แบบสำหรับควบคุมลบ การเพิ่มปริมาณได้ทำการศึกษาในเทอมอไซเคล ์ ( เอ็มเจ วิจัย ) การขยาย PCR ผลิตภัณฑ์ electrophoresed ใน 1.2 % เจลที่มี 0.5 กรัมต่อ 1 คู่ ) µโบรไมด์ และมองเห็นกับ uvtransilluminator ( ระบบห้องปฏิบัติการพระเอกหมอเจล )