2.3. Transmission electron microsco

2.3. Transmission electron microscopy
Leaves were cut with a razor to a length of 5 mm and a width
of 1–2 mm, and fixed with 2.5% glutaraldehyde for 2–3 h. Leaves
were then washed two to three times with buffer solution (potassium
phosphate buffer, pH 7.4) and fixed with buffer solution at 4 ◦C
for 12 h. Samples were then treated with 1 mL 2% osmium tetroxide
(OsO4) and 1 mL Dalton fixative solution (K2Cr2O7 0.5 mL + 3.4%
NaCl 0.5 mL) for 1 h and 30 min, and dehydrated by incubation in
an ethanol gradient (30%, 50%, 70% and 90%, 10 min each). Samples
were then dehydrated two times for 5 min each using absolute
ethanol. Samples were washed with propylene oxide for 15 min,
and infiltrated with a solution of epoxy resin and absolute acetone
(1:1) for 3 h at room temperature. Samples were then polymerized
by embedding in a pure epoxy resin mixture for 8 h at 40 ◦C, 50 ◦C,
and 60 ◦C.
Ultrathin sections (50–60 nm) of the embedded pellets were cut
on a Reichert-Jung Ultracut, and mounted on grids. The sections
were stained with 2% aqueous uranyl acetate and lead citrate for
20 min and 10 min at room temperature, respectively. Finally, the
sections were dried and examined under a transmission electron
microscope (DS1300, Hitachi, Japan).

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2.3 การส่งอิเล็กตรอน microscopyใบถูกตัด ด้วยมีดโกนมีความยาว 5 มม.และความกว้าง1 – 2 มม. และถาวรกับ 2.5% glutaraldehyde ใน h. 2 – 3 ใบแล้วก็ล้างสองถึงสามเท่า ด้วยโซลูชันบัฟเฟอร์ (โพแทสเซียมฟอสเฟตบัฟเฟอร์ ค่า pH 7.4) และคง ด้วยโซลูชันการบัฟเฟอร์ที่ 4 ◦Cสำหรับ 12 h. ตัวอย่างได้แล้วรักษา ด้วย 1 mL 2% ออสเมียมเทโตรไซด์(OsO4) และ 1 mL โซลูชันตรึงดาลตัน (K2Cr2O7 0.5 mL + 3.4%NaCl 0.5 mL) สำหรับ 1 h และ 30 นาที และอบแห้ง โดยการบ่มในมีเอทานอลการไล่ระดับสี (30%, 50%, 70% และ 90%, 10 นาที) ตัวอย่างได้ แล้วอบสองครั้งสำหรับ 5 นาทีแต่ละใช้แน่นอนเอทานอล ตัวอย่างที่ล้าง ด้วยโพรพิลีนออกไซด์สำหรับ 15 นาทีและถูกแทรกซึม ด้วยโซลูชั่นอีพ๊อกซี่เรซิ่นและอะซีโตนที่แน่นอน(1:1) สำหรับ 3 h ที่อุณหภูมิห้อง ตัวอย่างที่แล้ว polymerizedโดยฝังในส่วนผสมเรซิ่นอีพ็อกซี่บริสุทธิ์สำหรับ h 8 ที่ ◦C 40, 50 ◦Cและ 60 ◦Cส่วน ultrathin (50 – 60 nm) ของขี้ฝังตัวถูกตัดUltracut Reichert Jung และเมาท์บนกริด ส่วนมีสี ด้วยซิเตรต acetate และลูกค้าเป้าหมายของ uranyl อควี 2% สำหรับ20 นาทีและ 10 นาทีที่อุณหภูมิห้อง ตามลำดับ ในที่สุด การส่วนที่แห้ง และตรวจสอบภายใต้การส่งอิเล็กตรอนกล้องจุลทรรศน์ (DS1300 ฮิตาชิ ญี่ปุ่น)

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.3 กล้องจุลทรรศน์อิเล็กตรอน
ใบถูกตัดด้วยมีดโกนความยาว 5 มิลลิเมตรและความกว้าง
1-2 มิลลิเมตรและแก้ไขด้วย glutaraldehyde 2.5% สำหรับ 2-3 ชั่วโมง ใบ
ถูกล้างแล้ว 2-3 ครั้งด้วยสารละลายบัฟเฟอร์ (โพแทสเซียม
ฟอสเฟตบัฟเฟอร์ค่า pH 7.4) และการแก้ไขด้วยสารละลายบัฟเฟอร์ที่ 4 ◦C
เป็นเวลา 12 ชั่วโมง ตัวอย่างได้รับการรักษาแล้วกับ 1 มิลลิลิตร 2% ออสเมียม tetroxide
(OsO4) และ 1 มิลลิลิตรดาลตันแก้ปัญหาตรึง (K2Cr2O7 0.5 มิลลิลิตร + 3.4%
NaCl 0.5 มิลลิลิตร) เป็นเวลา 1 ชั่วโมงและ 30 นาทีและแห้งโดยการบ่มเพาะใน
การไล่ระดับสีเอทานอล (30%, 50%, 70% และ 90%, 10 นาทีในแต่ละครั้ง) ตัวอย่าง
ถูกแห้งแล้วสองครั้งเป็นเวลา 5 นาทีในแต่ละแน่นอนโดยใช้
เอทานอล ตัวอย่างถูกล้างด้วยออกไซด์โพรพิลีนเป็นเวลา 15 นาที
และแทรกซึมเข้าไปอยู่กับการแก้ปัญหาของอีพอกซีเรซินและอะซีโตนแน่นอน
(1: 1) เป็นเวลา 3 ชั่วโมงที่อุณหภูมิห้อง ตัวอย่าง polymerized แล้ว
โดยการฝังในส่วนผสมอีพอกซีเรซินบริสุทธิ์สำหรับ 8 ชั่วโมงที่อุณหภูมิ 40 ◦C 50 ◦C,
และ 60 ◦C.
ส่วน Ultrathin (50-60 นาโนเมตร) ของเม็ดฝังตัวถูกตัด
ในแชร์-Jung Ultracut, และติดตั้งอยู่บนกริด ส่วนที่
ถูกย้อมด้วย 2% acetate uranyl น้ำและซิเตรตนำสำหรับ
20 นาทีและ 10 นาทีที่อุณหภูมิห้องตามลำดับ สุดท้าย
ส่วนแห้งและตรวจสอบภายใต้อิเล็กตรอนส่ง
กล้องจุลทรรศน์ (DS1300, Hitachi, ญี่ปุ่น)

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2.3 ส่งกล้องจุลทรรศน์อิเล็กตรอน
ใบตัดด้วยมีดโกนให้มีความยาว 5 มม. และความกว้าง
1 – 2 มิลลิเมตร และแก้ไขด้วยกลูตารัลดีไฮด์ 2.5% เป็นเวลา 2 – 3 ชั่วโมง ใบ
แล้วซักสองถึงสามครั้ง ด้วยสารละลายบัฟเฟอร์ ( โพแทสเซียม
phosphate buffer pH 7.4 ) และแก้ไขด้วยสารละลายบัฟเฟอร์ที่ 4 ◦ C
12 ชั่วโมง จำนวน แล้วการรักษาด้วย 2 % ออสเมียม tetroxide
1 มิลลิลิตร( oso4 ) และ 1 ml ดาลตันฟิกเซทีฟโซลูชั่น ( 3.4 %
โซเดียมคลอไรด์ 0.5 ml k2cr2o7 0.5 ml ) เป็นเวลา 1 ชั่วโมงและ 30 นาที และอบแห้ง โดยบ่มใน
เป็นเอทานอลลาด ( 30% , 50% , 70% และ 90% 10 นาทีในแต่ละครั้ง ) ตัวอย่าง
แล้วอบแห้ง 2 ครั้ง 5 นาทีแต่ละใช้แน่นอน
เอทานอล ตัวอย่างการล้างด้วยโพรพิลีนออกไซด์ 15 นาที
และแฝงตัวเข้า ด้วยโซลูชันของอีพอกซีเรซินและแน่นอน )
( 11 ) 3 ชั่วโมงที่อุณหภูมิห้อง ตัวอย่างเป็น polymerized
โดยการฝังในบริสุทธิ์อีพ็อกซี่เรซิ่นผสม 8 H 40 ◦ C 50 ◦ C

C 60 ◦ ultrathin ส่วน ( 50 – 60 nm ) ฝังเม็ดถูกตัด
บนไรเคิร์ตจอง ultracut และติดตั้งบนกริด ส่วน
ถูกย้อมด้วยสี 2% สารละลายตะกั่วอะซิเตทและยูเรนิลซิเตรตสำหรับ
20 นาทีและ 10 นาทีที่อุณหภูมิห้อง ในที่สุด
ส่วนแห้ง และตรวจสอบภายใต้กล้องจุลทรรศน์อิเล็กตรอนแบบส่องกราด (
ds1300 , Hitachi , ญี่ปุ่น )