EXTRACTION PROCEDURE:1. Weigh out a

EXTRACTION PROCEDURE:
1. Weigh out approximately 0.5 g of fresh spinach leaves (don’t use stems) and record the
mass. Tear the leaves into confetti-sized pieces and place them into a mortar. Add about
1.0 mL of acetone and grind the leaves with a pestle until the acetone turns a bright, deep
green. You may add more acetone as necessary.
2. Using a 5” Pasteur pipet, transfer the liquid to a centrifuge tube. Don’t be too concerned if
a small amount of sludgelike gunk is also transferred, it will be extracted later. Rinse your
mortar and pestle with another 1.0 mL of acetone and transfer this to the centrifuge tube also.
3. If you have more than 1.5 mL of acetone in the centrifuge tube at this point, it’s a good
idea to reduce the volume via evaporation in a warm sand bath. Don’t forget the boiling chip
or boiling stick or it will spatter. Allow the extract to cool to room temperature before the next
step.
4. Add 2.0 mL of hexane and 2.0 mL of distilled water to the extract in the centrifuge tube,
cork it and shake gently. Occasionally, DIRECT THE TUBE AWAY FROM YOURSELF AND
OTHERS, and vent. Soon, there should be a cloudy, light green lower water layer and a clear,
bright green top hexane layer. Be sure to identify which is the water and which is the hexane
Physiological Chemistry-Extraction of Chlorophyll from Spinach-4
layer. Allow the tube to stand a few minutes undisturbed to maximize separation of these
layers.
5. Using a 5” Pasteur pipet, carefully draw off the water layer and transfer it to a small waste
beaker. Remember to depress your pipet bulb before you insert the pipet into the centrifuge
tube.
6. Add another 2.0 mL of distilled water to the hexane layer in the centrifuge tube as a wash.
The new water layer should be very nearly colorless even after shaking and allowing the layers
to separate. Again, draw off the bottom water layer and combine it with the first one in the
waste beaker.
7. Although water and hexane ‘do not mix’…reality is that a little bit of the water will stay in
the hexane. You can tell there is water in the hexane layer; it may be a little cloudy. You
must ‘dry’ the hexane layer by adding some anhydrous Na2SO4. A few microspatula scoops is
usually sufficient. Na2SO4 soaks up the water as it becomes hydrated. However, you can be
sure you’ve added enough when additional Na2SO4 no longer clumps when swirled in the
extract and your extract is not at all cloudy. Ask your professor for help with this.
8. To remove the drying agent and filter your extract: prepare a filter pipet by inserting a small
cotton plug into a 5” Pasteur pipet. Using a micro clamp, secure the pipet on a ring stand and
place a clean collection vial below the stem of the pipet. Transfer your extract via
pipet to the filter pipet. The cotton plug will prevent any drying agent from contaminating
your extract as it drips into the vial. To complete the transfer, rinse the centrifuge tube
containing the drying agent with another 1.0 mL of hexane and filter this also.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

แยกขั้นตอน:1. น้ำหนักออกประมาณ 0.5 g ของใบผักโขมสด (ไม่ใช้ลำ) และบันทึกมวล ฉีกใบเป็นลายกระดาษโปรยขนาดชิ้น และวางพวกเขาลงในครก เพิ่มเกี่ยวกับ1.0 mL ของอะซีโตน และบดใบไม้กับ pestle จนอะซีโตนเปิดสว่าง ลึกสีเขียว คุณอาจเพิ่มอะซีโตนเพิ่มเติมตามความจำเป็น2. ใช้เป็น 5" พาสเจอร์ pipet โอนย้ายของเหลวไปหลอดเครื่องหมุนเหวี่ยง อย่าไปกังวลถ้ายังมีการถ่ายโอนจำนวน sludgelike gunk จะแยกในภายหลัง ล้างของคุณโกร่งกับ mL อีก 1.0 อะซีโตนและการโอนย้ายนี้จะใช้เครื่องหมุนเหวี่ยงหลอดยัง3. ถ้ามีอะซีโตนมากกว่า 1.5 mL ในหลอดเครื่องหมุนเหวี่ยงที่จุดนี้ มันจะดีความคิดที่จะลดระดับเสียงผ่านการระเหยน้ำทรายอุ่น อย่าลืมชิเดือดหรือต้มไม้หรือจะ spatter ให้สารสกัดให้เย็นอุณหภูมิห้องก่อนถัดไปขั้นตอนการ4. เพิ่ม 2.0 mL ของเฮกเซน และ 2.0 mL ของน้ำกลั่นแยกในเครื่องหมุนเหวี่ยงท่อคอร์กมัน และเขย่าเบา ๆ ตรงท่อจากตัวเองบางครั้ง และอื่น ๆ และระบาย เร็ว ๆ นี้ ควรมีการล้าง และมีเมฆมาก แสงสีเขียวล่างน้ำชั้นชั้นของโพลีด้านบนสีเขียวสดใส ให้แน่ใจว่าได้ระบุซึ่งเป็นน้ำและที่เป็นแบบโพลีสรีรวิทยาเคมีสกัดคลอโรฟิลล์จากผักโขม-4ชั้น ทำให้ท่อยืนเพื่อแยกเหล่านี้เพิ่มอีกไม่กี่นาทีlayers.5. Using a 5” Pasteur pipet, carefully draw off the water layer and transfer it to a small wastebeaker. Remember to depress your pipet bulb before you insert the pipet into the centrifugetube.6. Add another 2.0 mL of distilled water to the hexane layer in the centrifuge tube as a wash.The new water layer should be very nearly colorless even after shaking and allowing the layersto separate. Again, draw off the bottom water layer and combine it with the first one in thewaste beaker.7. Although water and hexane ‘do not mix’…reality is that a little bit of the water will stay inthe hexane. You can tell there is water in the hexane layer; it may be a little cloudy. Youmust ‘dry’ the hexane layer by adding some anhydrous Na2SO4. A few microspatula scoops isusually sufficient. Na2SO4 soaks up the water as it becomes hydrated. However, you can besure you’ve added enough when additional Na2SO4 no longer clumps when swirled in theextract and your extract is not at all cloudy. Ask your professor for help with this.8. To remove the drying agent and filter your extract: prepare a filter pipet by inserting a smallcotton plug into a 5” Pasteur pipet. Using a micro clamp, secure the pipet on a ring stand andplace a clean collection vial below the stem of the pipet. Transfer your extract viapipet to the filter pipet. The cotton plug will prevent any drying agent from contaminatingyour extract as it drips into the vial. To complete the transfer, rinse the centrifuge tubecontaining the drying agent with another 1.0 mL of hexane and filter this also.

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

วิธีการสกัด:
1 ชั่งน้ำหนักออกประมาณ 0.5 กรัมของใบผักขมสด (ไม่ได้ใช้ลำต้น)
และบันทึกมวล ฉีกใบเป็นชิ้นขนาดลูกปาและสถานที่ที่พวกเขาลงในครก เพิ่มประมาณ
1.0
มลอะซีโตนและบดใบด้วยสากจนอะซีโตนเปลี่ยนสดใสลึกสีเขียว คุณอาจเพิ่มอะซีโตนเพิ่มเติมตามความจำเป็น.
2 ใช้ 5 "ปาสเตอร์ปิเปตโอนของเหลวหลอดหมุนเหวี่ยง ไม่ต้องกังวลมากเกินไปถ้ามีจำนวนน้อยของ sludgelike gunk จะถูกโอนยังก็จะถูกแยกในภายหลัง
ล้างของคุณครกและสากกับอีก 1.0 มิลลิลิตรอะซีโตนและโอนไปยังหลอด centrifuge ยัง. 3 หากคุณมีมากกว่า 1.5 มิลลิลิตรอะซีโตนในหลอดหมุนเหวี่ยงที่จุดนี้มันเป็นความดีความคิดที่จะลดปริมาณการระเหยผ่านในอ่างทรายที่อบอุ่น อย่าลืมชิปเดือดติดหรือต้มหรือมันจะโปรยลงมา อนุญาตให้สารสกัดให้เย็นที่อุณหภูมิห้องก่อนที่จะต่อไปขั้นตอนที่. 4 เพิ่ม 2.0 มิลลิลิตรเฮกเซนและ 2.0 มิลลิลิตรของน้ำกลั่นที่จะสารสกัดในหลอดหมุนเหวี่ยงที่ก๊อกมันเบาๆ และเขย่า เป็นครั้งคราว, TUBE ตรงออกไปจากตัวเองและคนอื่นๆ และระบาย เร็ว ๆ นี้ควรจะมีเมฆสีเขียวอ่อนชั้นน้ำที่ลดลงและมีความชัดเจนและสีเขียวสดใสเฮกเซนชั้นบน ให้แน่ใจว่าได้ระบุว่าเป็นน้ำและซึ่งเป็นเฮกเซนสรีรวิทยาเคมี-สกัดจากคลอโรฟิลผักโขม-4 ชั้น อนุญาตให้หลอดที่จะยืนไม่กี่นาทีสงบเพื่อเพิ่มการแยกเหล่านี้ชั้น. 5 ใช้ 5 "ปาสเตอร์ปิเปตอย่างระมัดระวังวาดออกชั้นน้ำและโอนไปยังเสียขนาดเล็กบีกเกอร์ อย่าลืมกดหลอดปิเปตของคุณก่อนที่คุณจะใส่ลงไปในปิเปตแปะหลอด. 6 เพิ่มอีก 2.0 มิลลิลิตรของน้ำกลั่นไปยังชั้นเฮกเซนในหลอด centrifuge เป็นล้าง. ชั้นน้ำใหม่ที่ควรจะเป็นมากเกือบไม่มีสีแม้หลังจากการสั่นและช่วยให้ชั้นที่จะแยก อีกครั้งที่วาดออกชั้นน้ำด้านล่างและรวมกับคนแรกในบีกเกอร์เสีย. 7 แม้ว่าน้ำและเฮกเซน 'ไม่ผสม ... ความจริงก็คือว่านิด ๆ หน่อย ๆ ของน้ำจะอยู่ในเฮกเซน คุณสามารถบอกได้มีน้ำในชั้นเฮกเซนนั้น มันอาจจะเป็นเมฆน้อย คุณต้อง 'แห้ง' ชั้นเฮกเซนโดยการเพิ่มบาง Na2SO4 ปราศจาก ไม่กี่ช้อน microspatula คือมักจะเพียงพอ Na2SO4 ดูดซับน้ำมันจะกลายเป็นไฮเดรท แต่คุณสามารถแน่ใจว่าคุณได้เพิ่มพอเมื่อเพิ่มเติม Na2SO4 ดงไม่มีอีกต่อไปเมื่อหมุนวนในสารสกัดและสารสกัดจากของคุณไม่ได้อยู่ที่มีเมฆทั้งหมด ถามอาจารย์ของคุณสำหรับความช่วยเหลือเกี่ยวกับเรื่องนี้. 8 ในการลบตัวแทนอบแห้งและกรองสารสกัดจากคุณ: เตรียมความพร้อมตัวกรองปิเปตโดยการใส่ขนาดเล็กเสียบฝ้ายเป็น5 "ปาสเตอร์ปิเปต ใช้ยึดไมโครปิเปตรักษาความปลอดภัยบนขาตั้งและแหวนวางขวดคอลเลกชันที่สะอาดด้านล่างของก้านปิเปตที่ โอนสารสกัดของคุณผ่านทางปิเปตการปิเปตกรอง ปลั๊กฝ้ายจะป้องกันไม่ให้ตัวแทนอบแห้งจากการปนเปื้อนสารสกัดของคุณเป็นมันหยดลงในขวด เพื่อการโอนล้างหลอดหมุนเหวี่ยงที่มีตัวแทนอบแห้งกับอีก 1.0 มิลลิลิตรเฮกเซนและกรองนี้

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ขั้นตอนการสกัด :
1 ชั่งน้ำหนักประมาณ 0.5 กรัมผักขมสดใบ ( ไม่ใช้ลำต้น ) และบันทึก
มวล ฉีกทิ้งเป็นชิ้นขนาดลูกปาและสถานที่ที่พวกเขาลงในครก เพิ่มเกี่ยวกับ
1.0 มล. อะซิโตนและบดใบด้วยสากจน ) เปลี่ยนเป็นสดใส เขียว

คุณอาจเพิ่มอะซีโตนเหลืออยู่เท่าที่จำเป็น .
2 ใช้ 5 " ปิเปตปาสเตอร์ ,การถ่ายโอนของเหลวไปยัง centrifuge หลอด ไม่ต้องคิดมากถ้า
จำนวนเล็ก ๆของ sludgelike สารสกปรกเหนียวก็ย้าย จะแยกทีหลัง ล้างของคุณ
ครกและสากกับอีก 1.0 มิลลิลิตร ) และโอนไปยัง centrifuge หลอดยัง .
3 ถ้าคุณมีมากกว่า 1.5 มิลลิลิตร สำหรับใน centrifuge หลอดที่จุดนี้ มันเป็นดี
ความคิดในการลดปริมาณผ่านการระเหยในอ่างทรายอุ่น อย่าลืมต้มชิป
หรือต้มไม้ หรือจะโปรย . ให้สกัดเย็นที่อุณหภูมิห้องก่อนที่จะขั้นตอนต่อไป
.
4 เพิ่ม 2.0 มิลลิลิตรของเฮกเซนและ 2.0 มิลลิลิตรของน้ำเพื่อสกัดใน centrifuge หลอด
ก๊อกแล้วเขย่าเบา ๆ บางครั้ง ตรงท่อให้ห่างจากตัวเองและ
คนอื่นและระบาย เร็ว ๆ นี้น่าจะมีเมฆ แสงเขียว น้ำ ชั้น ล่าง และใส
สีเขียวสดใสด้านบนน้ำชั้น ให้แน่ใจว่าได้ระบุว่าเป็น น้ำ ซึ่งเป็นสารสกัดคลอโรฟิลล์จากพืชเคมี

spinach-4 ชั้น ให้หลอดไปยืนไม่กี่นาทีโดยการเพิ่มการแยกชั้นเหล่านี้
.
5 ใช้ 5 " ปิเปตปาสเตอร์ ,