3. Results and discussion
3.1. Clinical signs and histology of EHP infection
The clinical signs associated with the EHP infection in farmed
shrimp are not specific, generally associated with stunted growth
and increased mortality. Based on the data obtained from ponds
in Vietnam (personal communication from shrimp farmers): after
stocking infected postlarvae into the shrimp ponds, the shrimp
grew at a normal rate during the first 25 days, after that,
the shrimp health started to deteriorate; the infected shrimp
exhibited reduction in feed consumption (50–70%) and discolored
hepatopancreas. The growth (i.e. gain in mass, shrimp were
weighted weekly) of the infected shrimp was only 10–40% that of
the non-infected shrimp. Mortality attributed to EHP infection was
variable, with farm reports of a daily mortality of approximately 1–
2%. No significant mortality from EHP-infection has been reported
in a laboratory bioassay (Tangprasittipap et al., 2013), this may be
related to the short duration (7-day) of the bioassay. Severe infections
by EHP can increase the susceptibility for other bacterial
infections. We have found, in some cases, EHP infections were
accompanied by opportunistic infections of Vibrio spp. (named
septic hepatopancreatic necrosis, SHPN), and this could result in
increased mortalities.
Histological examination of samples of EHP-infected P. vannamei
collected from Vietnam showed basophilic inclusions within
the cytoplasm of hepatopancreas tubule epithelial cells of (Fig. 1A).
These inclusions appeared to be at a plasmodium stage; mature,
basophilic, spores were also observed.
3.2. EHP 18S rRNA gene amplification and sequence analyses
We performed a PCR targeting 18S rRNA gene from the
EHP-infected shrimp collected in Vietnam. A 1146 bp DNA fragment
was obtained. By Blast analysis, it showed 96–100% identities
to the 18S rRNA gene of EHP (GenBank Nos. KF362129, KF362130,
FJ496356, KP027539) collected from Thailand and China;
93–94% identities to an intranuclear microsporidium, Enterospora
nucleophila, 87–88% identities to other microsporidia, including
Nucleospora salmonis, Nucleospora cyclopteri and Enterocytozoon
bieneusi; 82–83% identities to Enterscytospora artemiae.
3. Results and discussion3.1. Clinical signs and histology of EHP infectionThe clinical signs associated with the EHP infection in farmedshrimp are not specific, generally associated with stunted growthand increased mortality. Based on the data obtained from pondsin Vietnam (personal communication from shrimp farmers): afterstocking infected postlarvae into the shrimp ponds, the shrimpgrew at a normal rate during the first 25 days, after that,the shrimp health started to deteriorate; the infected shrimpexhibited reduction in feed consumption (50–70%) and discoloredhepatopancreas. The growth (i.e. gain in mass, shrimp wereweighted weekly) of the infected shrimp was only 10–40% that ofthe non-infected shrimp. Mortality attributed to EHP infection wasvariable, with farm reports of a daily mortality of approximately 1–2%. No significant mortality from EHP-infection has been reportedin a laboratory bioassay (Tangprasittipap et al., 2013), this may berelated to the short duration (7-day) of the bioassay. Severe infectionsby EHP can increase the susceptibility for other bacterialinfections. We have found, in some cases, EHP infections wereaccompanied by opportunistic infections of Vibrio spp. (namedseptic hepatopancreatic necrosis, SHPN), and this could result inincreased mortalities.Histological examination of samples of EHP-infected P. vannameicollected from Vietnam showed basophilic inclusions withinthe cytoplasm of hepatopancreas tubule epithelial cells of (Fig. 1A).These inclusions appeared to be at a plasmodium stage; mature,basophilic, spores were also observed.3.2. EHP 18S rRNA gene amplification and sequence analysesWe performed a PCR targeting 18S rRNA gene from theEHP-infected shrimp collected in Vietnam. A 1146 bp DNA fragmentwas obtained. By Blast analysis, it showed 96–100% identitiesto the 18S rRNA gene of EHP (GenBank Nos. KF362129, KF362130,FJ496356, KP027539) collected from Thailand and China;93–94% identities to an intranuclear microsporidium, Enterosporanucleophila, 87–88% identities to other microsporidia, includingNucleospora salmonis, Nucleospora cyclopteri and Enterocytozoonbieneusi; 82–83% identities to Enterscytospora artemiae.
การแปล กรุณารอสักครู่..

3. ผลการอภิปรายและ
3.1 อาการทางคลินิกและจุล EHP
ของการติดเชื้ออาการทางคลินิกที่เกี่ยวข้องกับการติดเชื้อในEHP เพาะเลี้ยงกุ้งไม่ได้เฉพาะเจาะจงทั่วไปที่เกี่ยวข้องกับการเจริญเติบโตแคระแกรนและการเสียชีวิตเพิ่มขึ้น บนพื้นฐานของข้อมูลที่ได้รับจากบ่อในเวียดนาม (การสื่อสารส่วนบุคคลจากเกษตรกรผู้เลี้ยงกุ้ง): หลังจากปล่อยระยะโพสท์ลาวาติดเชื้อเข้าไปในบ่อกุ้งกุ้งขยายตัวในอัตราปกติในช่วงแรก25 วันหลังจากนั้นสุขภาพกุ้งเริ่มเสื่อมลง; กุ้งที่ติดเชื้อแสดงการลดลงของปริมาณอาหารที่กิน (50-70%) และสีซีดจางตับ การเจริญเติบโต (เช่นกำไรในมวลกุ้งได้ถ่วงน้ำหนักรายสัปดาห์) ของกุ้งที่ติดเชื้อเป็นเพียง 10-40% ของกุ้งที่ไม่ติดเชื้อ ตายมาประกอบกับการติดเชื้อ EHP เป็นตัวแปรที่มีการรายงานในฟาร์มของอัตราการตายรายวันประมาณ1- 2% ไม่มีการตายอย่างมีนัยสำคัญจาก EHP การติดเชื้อได้รับการรายงานในห้องปฏิบัติการทดสอบฤทธิ์ทางชีวภาพ(Tangprasittipap et al., 2013) นี้อาจจะเกี่ยวข้องกับระยะเวลาสั้นๆ (7 วัน) การทดสอบฤทธิ์ทางชีวภาพ การติดเชื้ออย่างรุนแรงโดย EHP สามารถเพิ่มความอ่อนแอสำหรับแบคทีเรียอื่น ๆ ที่ติดเชื้อ เราพบในบางกรณีการติดเชื้อ EHP ถูกมาพร้อมกับการติดเชื้อฉวยโอกาสของเชื้อVibrio spp (ชื่อเนื้อร้าย Hepatopancreatic บำบัดน้ำเสีย, SHPN) และนี้อาจส่งผลให้เกิดการตายที่เพิ่มขึ้น. การตรวจสอบทางจุลกายวิภาคของกลุ่มตัวอย่างของ EHP เชื้อ P. vannamei ที่เก็บรวบรวมจากเวียดนามแสดงให้เห็นว่าการรวม basophilic ภายในเซลล์ของตับท่อเซลล์เยื่อบุผิวของ(รูป. 1A). เหล่านี้ รวมดูเหมือนจะเป็นในขั้นตอน Plasmodium นั้น ผู้ใหญ่basophilic สปอร์ยังถูกตั้งข้อสังเกต. 3.2 EHP 18S rRNA ขยายยีนและวิเคราะห์ลำดับเราดำเนินการกำหนดเป้าหมายPCR ของยีน 18S rRNA จากกุ้งที่ติดเชื้อEHP เก็บในเวียดนาม ส่วนดีเอ็นเอ bp 1146 ที่ได้รับ โดยการวิเคราะห์ระเบิดมันแสดงให้เห็นตัวตนที่ 96-100% กับยีน 18S rRNA ของ EHP (Nos GenBank KF362129, KF362130. FJ496356, KP027539) ที่เก็บรวบรวมจากประเทศไทยและประเทศจีน93-94% ตัวตนไปยัง microsporidium intranuclear, Enterospora nucleophila 87 -88% ถึงตัวตน Microsporidia อื่น ๆ รวมทั้งsalmonis Nucleospora, Nucleospora cyclopteri และ Enterocytozoon bieneusi; 82-83% ถึงตัวตน Enterscytospora artemiae
การแปล กรุณารอสักครู่..
