high level of conservation compared to the voraxinsequence from
A. hebraeum and D. variabilis. The predicted amino acid similarities
give the hypothesis that voraxin is widely conserved in different
tick genera. In Ixodid ticks, blood meal uptake may result in either
induction or up-regulation of certain genes [28]. The result in this
study that both transcription and translation of voraxin in male
testis is dependent on blood feeding corresponds to the previous
study of voraxin in A. hebraeum [21]. Thus, male gonad maturation
by uptake of blood is necessary for the expression of voraxin.
Notably, the voraxintranscripts were also detected in female ticks.
While the voraxin transcripts were detected in various female tissues,
their expression levels were considerably lower than those in
male testis. To remove of doubts of possible contamination among
female cDNA samples, we confirmed that testis-specific RAMP (R.
appendiculatus male-specific protein) [23] mRNA transcript was
detected only in cDNA samples from testis/vas deferens. Endogenous
voraxin (distinct from testis-derived voraxin) might play
an unknown role in female tick physiology because of ubiquitous
expression in female tissues.
Traditionally, tick antigens are classified as concealed (not
secreted into the host during tick feeding) or exposed (secreted
into the host as saliva during tick feeding) antigens. By Western
blot analysis, E. coli-expressed r-voraxin (without fusion
protein) is not recognized by sera of repeatedly bitten rabbit.
Therefore, voraxin would not be naturally exposed to the
immune response of host animals, and could be classified to a concealed
antigen. Though concealed antigens do not induce immune
responses by natural tick infestation, they are immunogenic when
inoculated artificially. Therefore, voraxin could be a potential
candidate as vaccine antigen as long as the antigen encounters
host immunoglobulins which enter the gut or hemolymph, and
is associated with some physiological function of the ticks. Basically,
host immunoglobulins are likely to interact not only with
gut-derived antigens but also other tissues, because it is known that
host immunoglobulins can pass through the midgut into hemocoel
[29]. As a result of immunoglobulin passage into the body
cavity, interference of the target molecules would occur. Among
the several concealed antigens characterized for the development
of anti-tick vaccine, some of them have been reported to induce
significant anti-tick immunity [22,30].
In order to use as an antigen for anti-tick vaccine, we assessed
the immunogenicity of r-voraxin. ByWestern blot analysis, antisera
raised against E. coli-expressed r-voraxin reacted with tick
testis extracts, giving a positive signal at the predicted molecular
weight of native voraxin, indicating that r-voraxin is an
immunogenic molecule. Since the mouse sera used in this study
were produced against TF-fused r-voraxin, there existed a possibility
that the immunogenicity of E. coli-expressed r-voraxin
could be responsible for the TF protein. However, anti-sera also
reacted with E. coli- and insect-derived r-voraxin, which were
expressed without TF protein. Therefore, immunological reactivity
by Western blot analysis was due to the antigenic epitopes present
on voraxin.
In the preliminary vaccination trial, r-voraxin stimulated
protective anti-tick immune response in rabbits, as shown by
the reduced engorgement weight and oviposition. The humoral
response, as determined by ELISA, was detected after the first
booster injection of r-voraxin, and the second booster immunization
elicited a higher ELISA titer. Western blot analysis indicated
that the sera from immunized rabbits as well as immunized mice
recognized the specific protein in testis extract, suggesting that rabbit
antibodies elicited upon vaccination could react with the native
voraxin protein. Vaccination resulted in 40% reduction in female
tick weight, followed by 50% reduction in egg weight expressed as
an average. The effect observed in the present work is comparable
to the effect on adult tick feeding after the immunizations with the
r-voraxin and r-voraxin [21]. The mechanisms by which vaccination
impaired the tick feeding are still unknown. However, it is
possible to speculate that the antibodies against voraxin could
impair the function of male-derived voraxin because the protein
was detected in hemolymph of mated female. Nevertheless, the
protection rate induced by r-voraxin was insufficient to inhibit
tick infestation completely. The possible reason for this insufficient
protection could be the fact that voraxin comprises two proteins,
voraxin and voraxin, and the engorgement stimulation is not
shown only by either of the two recombinant proteins [21]. We
tried to clone both voraxin and voraxin homologous gene in R.
appendiculatus based on the nucleotide sequence of A. hebraeum
voraxins. While the full-length of voraxin was obtained in this
study, we could not amplify the upstream and downstream of
voraxin partial sequence by RACE. Further efforts are in progress
to clone 5- and 3-end of partial fragment of voraxin.
The most desirable tick antigen is vaccine that designed to
protect against pathogens transmitted by ticks. Labuda et al. [31]
showed that the anti-tick vaccine derived from a tick cement protein
(64TRP) of R. appendiculatus could protect mice against the
lethal challenge with Ixodes ricinus infected with the tick-borne
encephalitis virus (TBEV). These data suggest that anti-tick vaccine
could have a protective effect against tick-borne pathogen transmission.
In the case of T. parva, previous study has revealed that
the transmission of T. parva from ticks to host increased with the
ระดับสูงเมื่อเทียบกับการอนุรักษ์ voraxin? ลำดับจาก
เอ hebraeum และ D ตัวแปร ความคล้ายคลึงกันกรดอะมิโนที่คาดการณ์
ให้สมมติฐาน voraxin ที่? เป็นป่าสงวนที่แตกต่างกันอย่างแพร่หลายใน
จำพวกเห็บ ในเห็บ Ixodid, การดูดซึมอาหารในเลือดอาจส่งผลทั้งใน
การเหนี่ยวนำหรือระเบียบขึ้นของยีนบางอย่าง [28] ผลที่ได้ในครั้งนี้
ว่าทั้งการศึกษาการถอดรหัสและการแปลของ voraxin? ในชาย
อัณฑะจะขึ้นอยู่กับการให้อาหารในเลือดสอดคล้องกับก่อนหน้านี้
การศึกษาของ voraxin ในเอ hebraeum [21] ดังนั้นการเจริญเติบโตอวัยวะสืบพันธุ์ชาย
โดยการดูดซึมของเลือดเป็นสิ่งที่จำเป็นสำหรับการแสดงออกของ voraxin ?.
ยวด voraxin? ใบรับรองผลการตรวจพบยังอยู่ในเห็บหญิง.
ในขณะที่ voraxin? ยีนที่ถูกตรวจพบในเพศหญิงเนื้อเยื่อต่างๆ
ระดับการแสดงออกของพวกเขาต่ำกว่าผู้ที่อยู่ใน
ลูกอัณฑะชาย ในการลบความสงสัยของการปนเปื้อนที่เป็นไปได้ในหมู่
กลุ่มตัวอย่างเพศหญิง cDNA เรายืนยันว่า RAMP อัณฑะเฉพาะ (ร
appendiculatus โปรตีนชายที่เฉพาะเจาะจง) [23] หลักฐาน mRNA ถูก
ตรวจพบในตัวอย่าง cDNA จากลูกอัณฑะ / vas deferens ภายนอก
voraxin? (แตกต่างจาก voraxin อัณฑะมา?) อาจเล่น
บทบาทที่ไม่รู้จักในสรีรวิทยาเห็บหญิงแพร่หลายเพราะ
การแสดงออกในเนื้อเยื่อหญิง.
ตามเนื้อผ้าติ๊กแอนติเจนจะจัดเป็นที่มองไม่เห็น (ไม่
หลั่งเข้ามาเป็นเจ้าภาพในระหว่างการให้ติ๊ก) หรือสัมผัส (หลั่ง
เข้าไป เป็นเจ้าภาพในระหว่างการให้น้ำลายเห็บ) แอนติเจน โดยเวสเทิร์
วิเคราะห์เปื้อนเชื้อ E. coli แสดง-R-voraxin? (โดยไม่ต้องฟิวชั่น
โปรตีน) ไม่ได้รับการยอมรับจากซีรั่มของกัดซ้ำกระต่าย.
ดังนั้น voraxin? จะไม่ได้สัมผัสธรรมชาติที่จะ
ตอบสนองของภูมิคุ้มกันของสัตว์ที่เป็นเจ้าภาพและสามารถจำแนกการปกปิด
แอนติเจน แม้ว่าแอนติเจนปกปิดไม่ก่อให้เกิดภูมิคุ้มกัน
ตอบสนองโดยการทำลายธรรมชาติเห็บพวกเขามีภูมิคุ้มกันเมื่อ
เชื้อเทียม ดังนั้น voraxin? อาจจะเป็นที่มีศักยภาพ
ของผู้สมัครเป็นแอนติเจนวัคซีนตราบเท่าที่แอนติเจนพบ
ภูมิคุ้มกันบกพร่องโฮสต์ที่ใส่เดินอาหารหรือเลือดและ
มีความเกี่ยวข้องกับบางฟังก์ชั่นทางสรีรวิทยาของเห็บ โดยทั่วไป
immunoglobulins เจ้าภาพมีแนวโน้มที่จะมีผลกระทบไม่เพียง แต่มี
แอนติเจนลำไส้มา แต่ยังเนื้อเยื่ออื่น ๆ เพราะมันเป็นที่รู้จักกันว่า
ภูมิคุ้มกันบกพร่องโฮสต์สามารถผ่านเข้าไปในกระเพาะ hemocoel
[29] อันเป็นผลมาจากทางอิมมูโนเข้าสู่ร่างกาย
โพรงรบกวนของโมเลกุลเป้าหมายที่จะเกิดขึ้น ท่ามกลาง
แอนติเจนปกปิดหลายลักษณะเพื่อการพัฒนา
วัคซีนต่อต้านเห็บบางส่วนของพวกเขาได้รับรายงานว่าจะก่อให้เกิด
การสร้างภูมิคุ้มกันป้องกันเห็บอย่างมีนัยสำคัญ [22,30].
เพื่อที่จะใช้เป็นแอนติเจนสำหรับวัคซีนป้องกันเห็บเราประเมิน
ภูมิคุ้มกันของ R-voraxin ?. การวิเคราะห์ดวง ByWestern, antisera
ขึ้นกับเชื้อ E. coli-R-แสดง voraxin? ปฏิกิริยากับเห็บ
สารสกัดจากลูกอัณฑะให้เป็นสัญญาณบวกที่คาดการณ์ไว้ในระดับโมเลกุล
น้ำหนักของ voraxin พื้นเมือง ?, แสดงให้เห็นว่า R-voraxin? เป็น
โมเลกุลภูมิคุ้มกัน ตั้งแต่ซีรั่มเมาส์ที่ใช้ในการศึกษาครั้งนี้
มีการผลิตกับ TF-ผสม R-voraxin ?, มีความเป็นไปได้อยู่
ที่ภูมิคุ้มกันของอี R-voraxin coli-แสดงหรือไม่
อาจจะเป็นผู้รับผิดชอบในการโปรตีน TF อย่างไรก็ตามการต่อต้านซีรั่มยัง
ทำปฏิกิริยากับอี coli- และแมลงที่ได้มาจาก R-voraxin ?, ซึ่งถูก
แสดงโดยไม่ต้องลุยโปรตีน ดังนั้นการเกิดปฏิกิริยาภูมิคุ้มกัน
โดยการวิเคราะห์ดวงตะวันเป็นเพราะ epitopes แอนติเจนปัจจุบัน
ใน voraxin ?.
ในการทดลองฉีดวัคซีนเบื้องต้น R-voraxin? กระตุ้นการ
ป้องกันต่อต้านเห็บตอบสนองของภูมิคุ้มกันในกระต่ายที่แสดงโดย
น้ำหนักคัดตึงลดลงและวางไข่ ร่างกาย
ตอบสนองตามที่กำหนดโดยวิธี ELISA ถูกตรวจพบครั้งแรกหลังจาก
การฉีดสนับสนุนของ R-voraxin ?, การสร้างภูมิคุ้มกันและสนับสนุนที่สอง
ออกมา titer ELISA ที่สูงขึ้น การวิเคราะห์ดวงตะวันระบุ
ว่าซีรั่มจากกระต่ายวัคซีนเช่นเดียวกับหนูวัคซีน
ได้รับการยอมรับเฉพาะโปรตีนในสารสกัดจากลูกอัณฑะบอกว่ากระต่าย
แอนติบอดีออกมาเมื่อฉีดวัคซีนจะทำปฏิกิริยากับพื้นเมือง
voraxin? โปรตีน การฉีดวัคซีนมีผลในการลดลง 40% ในเพศหญิง
น้ำหนักเห็บตามการลดลง 50% ของน้ำหนักไข่แสดงเป็น
ค่าเฉลี่ย ผลการปฏิบัติในการทำงานในปัจจุบันเทียบ
กับผลกระทบต่อการให้อาหารเห็บผู้ใหญ่หลังจากการฉีดวัคซีนกับ
R-voraxin? และ R-voraxin? [21] กลไกโดยที่การฉีดวัคซีน
ให้อาหารที่มีความบกพร่องเห็บจะยังไม่ทราบ แต่ก็เป็น
ไปได้ที่จะคาดเดาว่าแอนติบอดีต่อ voraxin? อาจ
ทำให้เสียการทำงานของ voraxin ชายมา? เพราะโปรตีนที่
ถูกตรวจพบในเลือดของหญิงแต่งงานแล้ว อย่างไรก็ตาม
อัตราการป้องกันที่เกิดจาก R-voraxin? ก็ไม่เพียงพอที่จะยับยั้ง
การทำลายขีดสมบูรณ์ เหตุผลที่เป็นไปได้สำหรับเรื่องนี้ไม่เพียงพอ
ป้องกันอาจจะเป็นความจริงที่ว่า voraxin ประกอบด้วยสองโปรตีน
voraxin? และ voraxin ?, และการกระตุ้นการคัดตึงไม่ได้
แสดงให้เห็นโดยเฉพาะทั้งสองโปรตีน [21] เรา
พยายามที่จะโคลน voraxin ทั้งสอง? และ voraxin? ยีนที่คล้ายคลึงกันในอาร์
appendiculatus ขึ้นอยู่กับลำดับเบสของเอ hebraeum
voraxins ในขณะที่ความยาวเต็มรูปแบบของ voraxin? ที่ได้รับใน
การศึกษาเราไม่สามารถขยายต้นน้ำและปลายน้ำของ
voraxin? ลำดับบางส่วนจากการแข่งขัน ความพยายามที่จะมีความคืบหน้าใน
การโคลน 5? - และ 3 -End ของชิ้นส่วนบางส่วนของ voraxin ?. ?
แอนติเจนเห็บที่ต้องการมากที่สุดคือการฉีดวัคซีนที่ออกแบบมาเพื่อ
ป้องกันเชื้อโรคที่ส่งมาจากเห็บ Labuda et al, [31]
แสดงให้เห็นว่าวัคซีนต่อต้านเห็บมาจากโปรตีนซีเมนต์เห็บ
(64TRP) ของอาร์ appendiculatus สามารถป้องกันหนูกับ
ความท้าทายที่ร้ายแรงกับ Ricinus Ixodes ติดเชื้อจากเห็บ
ไวรัสไข้สมองอักเสบ (TBEV) ข้อมูลเหล่านี้ชี้ให้เห็นว่าวัคซีนต่อต้านเห็บ
อาจมีผลป้องกันการส่งผ่านเชื้อจากเห็บ.
ในกรณีที่ทีพาร์วาการศึกษาก่อนหน้านี้ได้แสดงให้เห็นว่า
การส่งผ่านของตันพาร์วาจากเห็บที่จะเป็นเจ้าภาพเพิ่มขึ้นด้วย
การแปล กรุณารอสักครู่..
ระดับสูงของการอนุรักษ์เมื่อเทียบกับลำดับ voraxin จาก
. hebraeum และ variabilis . พบว่ากรดอะมิโนคล้ายคลึง
ให้สมมติฐานว่า voraxin อย่างกว้างขวางเพื่อในแตกต่างกัน
ติ๊กสกุล ใน ixodid เห็บ เลือดป่นต่างๆอาจส่งผลให้
เหนี่ยวหรือกฎระเบียบของยีนบางอย่าง [ 28 ] ผลในนี้
การศึกษาทั้งการถอดความและแปล voraxin ชาย
อัณฑะจะขึ้นอยู่กับเลือดการให้สอดคล้องกับการศึกษาก่อนหน้า
ของ voraxin . hebraeum [ 21 ] จึงเป็นต่อมเพศชายโดย
รับเลือดเป็นสิ่งจำเป็นสำหรับการแสดงออกของ voraxin .
โดยเฉพาะ voraxin transcripts ก็พบเห็บหญิง
ในขณะที่ voraxin transcripts พบในเนื้อเยื่อหญิงต่างๆ
ระดับการแสดงออกของพวกเขาถูกมากต่ำกว่าใน
เพศชายลูกอัณฑะ เพื่อลบข้อสงสัยของการปนเปื้อนที่เป็นไปได้ระหว่าง
ตัวอย่างดีเอ็นเอ หญิง เรายืนยันว่า อัณฑะที่เฉพาะเจาะจงทางลาด ( R .
appendiculatus ชายเฉพาะโปรตีน ) [ 23 ] mRNA ถูกตรวจพบในตัวอย่างหลักฐาน
cDNA จากอัณฑะ / อสุจิ . ใน
voraxin ( แตกต่างจากอัณฑะมา voraxin ) อาจจะเล่น บทบาททางสรีรวิทยา ติ๊กไม่รู้จัก
หญิงเพราะแพร่หลายการแสดงออกในเนื้อเยื่อหญิง
ผ้า ติ๊กแอนติเจนจะจัดเป็นปกปิด ( ไม่หลั่งลงในโฮสต์ในระหว่าง
ติ๊กให้อาหาร ) หรือสัมผัส ( หลั่ง
เป็นโฮสต์เป็นน้ำลายระหว่างเห็บกินแอนติเจน . โดย Western blot analysis
, E( แสดง r-voraxin ( โดยไม่มีโปรตีน
) ที่ไม่ได้รับการยอมรับโดยวิธีซ้ำกัดกระต่าย
ดังนั้น voraxin จะไม่เป็นธรรมชาติตาก
ภูมิคุ้มกันของสัตว์โฮสต์ และอาจจะจัดเพื่อปกปิด
แอนติเจน แม้ว่าแอนติเจนปกปิดไม่ก่อให้เกิดระบบภูมิคุ้มกัน
โดยทำลายขีดธรรมชาติ พวกเขา immunogenic เมื่อ
เชื้อเทียม ดังนั้นvoraxin อาจเป็นผู้สมัครที่มีศักยภาพ
เป็นวัคซีนแอนติเจนตราบใดที่แอนติเจน พบเจ้าภาพมมูโนโกลบูลินซึ่งระบุดี
หรือ เลือด และเกี่ยวข้องกับบางฟังก์ชันทางสรีรวิทยาของเห็บ โดย
มมูโนโกลบูลินเจ้าบ้านมีโอกาสที่จะโต้ตอบไม่เพียง แต่กับ
ไส้ได้มาแอนติเจนแต่ยังเนื้อเยื่ออื่น ๆ เพราะมันเป็นที่รู้จักกันว่า
มมูโนโกลบุลินยังสามารถผ่านประสิทธิภาพและเหมาะสมในฮีโมซีล
[ 29 ] ผลของอิมมูโนโกลบุลินเดินเข้าไปในร่างกาย
โพรง การแทรกแซงของเป้าหมายโมเลกุลจะเกิดขึ้น ระหว่าง
หลายลักษณะปกปิดแอนติเจนสำหรับการพัฒนาวัคซีนต่อต้านเห็บ
, บางส่วนของพวกเขาได้รับการรายงานเพื่อก่อให้เกิดความป้องกันเห็บ 22,30 ภูมิคุ้มกัน [
]เพื่อใช้เป็นแอนติเจนในวัคซีนต่อต้านเห็บ เราสามารถประเมิน
ของ r-voraxin . blot analysis โดยวิธีเลี้ยงกับแอนติ
, E . coli แสดง r-voraxin ทำปฏิกิริยากับสารสกัดจากติ๊ก
ลูกอัณฑะ ให้มีสัญญาณบวกที่ทำนายน้ำหนักโมเลกุล
พื้นเมืองของ voraxin ระบุว่า r-voraxin เป็นโมเลกุล immunogenic
. นับตั้งแต่เมาส์ ( ใช้ในการศึกษา
มีการผลิตกับ TF ผสม r-voraxin มีมีอยู่ความเป็นไปได้
ที่สามารถของ E . coli มี r-voraxin
สามารถรับผิดชอบ TF โปรตีน อย่างไรก็ตาม ยังทำปฏิกิริยากับ Anti เซร่า
E . coli - และแมลงที่มา r-voraxin ซึ่ง
แสดงโดยไม่ได้โปรตีนจาก TF . ดังนั้นปฏิกิริยาทางภูมิคุ้มกัน โดยเทคนิค Western blot
เนื่องจากได้รับการศึกษาจากปัจจุบัน
ใน voraxin .
ในการทดลองวัคซีนเบื้องต้น r-voraxin กระตุ้น
ป้องกันต่อต้านติ๊ก ภูมิคุ้มกันในกระต่าย , ที่แสดงโดยน้ำหนัก และ ลดอาการคัดตึงเต้านม
วางไข่ . การตอบสนอง humoral
, ตามที่กำหนดโดยวิธี ELISA พบ Booster , หลังฉีดครั้งแรก
ของ r-voraxin และสอง Booster ภูมิคุ้มกัน
โดยใช้ ELISA สูงกว่าค่า . blot analysis พบ
ตะวันตกซีรั่มกระต่ายที่ได้รับเช่นเดียวกับการฉีดกระตุ้นหนู
โปรตีนที่เฉพาะเจาะจงในลูกอัณฑะ สกัด บอกว่ากระต่าย
เมื่อวัคซีนสามารถทำปฏิกิริยากับแอนติบอดีโดยใช้พื้นเมือง
voraxin โปรตีน วัคซีนมีผลในการลด 40% ในหญิง
ขีดน้ำหนัก ตามด้วยการลด 50% ในน้ำหนักไข่แสดงเป็น
เฉลี่ย .ผลที่พบในงานปัจจุบันก็เปรียบได้กับผลกระทบต่อขีด
อาหารผู้ใหญ่หลังจากภูมิคุ้มกันด้วย
r-voraxin และ r-voraxin [ 21 ] กลไกซึ่งวัคซีน
ติ๊กให้อาหารที่บกพร่องจะยังไม่ทราบ อย่างไรก็ตาม มันเป็นไปได้ที่จะคาดการณ์ว่า
voraxin แอนติบอดีต่อ อาจบั่นทอนประสิทธิภาพการทำงานของชายที่มา voraxin เพราะโปรตีน
ที่ตรวจพบในเลือด ของคู่กัน หญิง อย่างไรก็ตาม อัตราการ r-voraxin
คุ้มครองไม่เพียงพอที่จะยับยั้ง
ติ๊กมาอย่างสมบูรณ์ เหตุผลที่เป็นไปได้สำหรับการป้องกันไม่เพียงพอ
นี้อาจจะจริงที่ว่า voraxin ประกอบด้วยสองโปรตีน
voraxin และ voraxin และอาการคัดตึงเต้านมกระตุ้นไม่ได้
แสดงเท่านั้น โดยทั้งสอง recombinant โปรตีน [ 21 ] เรา
พยายามที่จะโคลนทั้ง voraxin voraxin เปรียบเทียบและ ยีน R .
appendiculatus ตามลำดับนิวคลีโอไทด์ของ hebraeum
voraxins . ในขณะที่เต็มตัวของ voraxin ได้รับในการศึกษา
, เราไม่สามารถขยายด้านเหนือน้ำและท้ายน้ำ
voraxin บางส่วนลำดับโดยการแข่งขัน เพิ่มเติมความพยายามในการโคลน ความคืบหน้า
5 และ 3 - ปลายชิ้นส่วนบางส่วนของ voraxin
.แอนติเจนติ๊กที่พึงปรารถนามากที่สุด คือวัคซีนที่ออกแบบมาเพื่อป้องกันเชื้อโรค
ส่งโดยเห็บ labuda et al . [ 31 ]
พบว่าวัคซีนต่อต้านเห็บมาจากเห็บซีเมนต์โปรตีน
( 64trp ) ของ อาร์ appendiculatus สามารถปกป้องหนูกับ
ท้าทายร้ายแรงกับ ixodes ricinus ติดเชื้อเห็บแบก
โรคเยื่อหุ้มสมองอักเสบ ( tbev ) ข้อมูลเหล่านี้ชี้ให้เห็นว่า วัคซีนต่อต้านเห็บ
อาจจะมีผลช่วยป้องกันเห็บหามส่งเชื้อโรค .
ในกรณีของ parva การศึกษาก่อนหน้านี้ได้เปิดเผยว่า การส่งของ parva
จากเห็บเป็นเจ้าภาพกับ
เพิ่มขึ้น
การแปล กรุณารอสักครู่..