of tube as a white mass then the ce

of tube as a white mass then the cells have
already reached stationary phase and these
cells will not be of optimal quality for cryopreservation.
2. Ice tubes of cells until they detach from the
culture tube. Concentrate cells by centrifugation for 5 min at 600g and 4°C.
3. Decant spent medium and add 2 ml of room
temperature FM per cell pellet (from 15 ml
starting culture). Resuspend cells briefly in
FM, and then transfer immediately to a cryo
tube (i.e. sterile Nunc 1 ml tube, Nalgene
Nunc International). All manipulations need
to be done under sterile conditions.
4. Place cryo tube into a room temperature
Nalgene Cryo 1°C Freezing Container (Cat.
# 5100-0001; be sure to fi ll tank to line with
isopropanol as instructed by manufacturer)
and put at –80°C for at least 24 h. Move cryo
tubes containing Giardia to a liquid nitrogen tank for long-term storage.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ของหลอดเป็นสีขาวโดยรวมแล้ว มีเซลล์ถึงระยะของเครื่องเขียนและเหล่านี้แล้วเซลล์จะไม่มีคุณภาพดีที่สุดสำหรับ cryopreservation2. น้ำแข็งหลอดของเซลล์จนกว่าพวกเขาแยกออกจากการวัฒนธรรมหลอด เข้มข้นเซลล์ โดย centrifugation ใน 5 นาทีที่ 4 องศาเซลเซียสและ 600 g3. รินกลางใช้จ่าย และเพิ่มมล 2 ห้องอุณหภูมิ FM ต่อเม็ดเซลล์ (จาก 15 mlเริ่มต้นวัฒนธรรม) Resuspend เซลล์สั้น ๆ ในFM และไปแล้วส่งทันทีการ cryoหลอด (เช่นกอซ Nunc 1 ml หลอด NalgeneNunc นานา) ต้อง manipulations ภาพทั้งหมดจะทำภายใต้เงื่อนไขกอซ4. หลอด cryo วางในอุณหภูมิห้องคอนเทนเนอร์แช่ 1° C Nalgene Cryo (แมว# 5100-0001 ให้แน่ใจว่าถังจะไร้การจัดด้วยisopropanol ตามที่แนะนำ โดยผู้ผลิต)และ –80 ° C สำหรับน้อย 24 h. cryo ย้ายหลอดที่ประกอบด้วยไกรด์เดียกับถังไนโตรเจนเหลวสำหรับการเก็บระยะยาว

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ของหลอดเป็นสีขาวแล้วมวลเซลล์ได้มาถึงแล้วและเฟสเหล่านี้เซลล์จะไม่ได้มีคุณภาพที่เหมาะสมสำหรับการเก็บรักษา. 2 น้ำแข็งหลอดของเซลล์จนกว่าพวกเขาจะแยกออกจากท่อวัฒนธรรม เซลล์สมาธิโดยการหมุนเหวี่ยงเวลา 5 นาทีที่ 600? กรัมและ 4 ° C. 3 ใช้เวลาค่อยๆรินขนาดกลางและเพิ่ม 2 มล. ของห้องอุณหภูมิFM ต่อตะกอนเซลล์ (จาก 15 มลวัฒนธรรมเริ่มต้น) เซลล์ Resuspend สั้น ๆ ในเอฟเอ็มแล้วโอนทันทีเพื่อแช่ท่อ(เช่นการฆ่าเชื้อ Nunc หลอด 1 มิลลิลิตร Nalgene Nunc นานาชาติ) manipulations ทั้งหมดต้องการที่จะทำภายใต้สภาพปลอดเชื้อ. 4 วางท่อแช่ลงในอุณหภูมิห้องNalgene Cryo 1 ° C คอนเทนเนอร์แช่แข็ง (Cat. # 5100-0001; ให้แน่ใจว่าไฟถัง LL เข้าแถวกับisopropanol ตามคำสั่งของผู้ผลิต) และใส่ที่ -80 องศาเซลเซียสเป็นเวลาอย่างน้อย 24 ชั่วโมง ย้ายฝั่งท่อที่มีการ Giardia ถังไนโตรเจนเหลวสำหรับการจัดเก็บระยะยาว

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

หลอดเป็นสีขาว แล้วมวลเซลล์มี
มาถึงระยะ stationary และเซลล์เหล่านี้
จะไม่ได้คุณภาพที่ดีที่สุดสำหรับการเก็บรักษา .
2 น้ำแข็งหลอดเซลล์จนกว่าพวกเขาจะแยกออกจาก
วัฒนธรรมหลอด สมาธิเซลล์โดยการเหวี่ยงแยก สำหรับ 5 นาทีที่ 600   g และ 4 ° C .
3 รินใช้ขนาดกลางและเพิ่ม 2 ml ของ FM อุณหภูมิห้อง
ต่อเซลล์เม็ด ( จาก 15 ml
เริ่มวัฒนธรรม )resuspend เซลล์คร่าวๆใน
FM แล้วโอนทันทีเพื่อแช่แข็ง
ท่อ ( เช่นเป็นหมันขณะนี้ 1 ml หลอดไนล์จีน
ขณะนี้นานาชาติ ) ทั้งหมดตกแต่งต้องการ
ที่ต้องทำภายใต้สภาวะปลอดเชื้อ .
4 สถานที่ท่อแช่แข็งในอุณหภูมิห้องแช่แข็ง 1 ° C
นาลจีนคอนเทนเนอร์แช่แข็ง ( แมว
# 5100-0001 ; ให้แน่ใจว่าถังจะ Fi สายด้วย

ไอโซโพรพานอลตามคำแนะนำจากผู้ผลิต )และใส่ที่– 80 องศา C เป็นเวลาอย่างน้อย 24 ชั่วโมง ย้ายเครื่อง Cryo
หลอดที่มีไกกับถังไนโตรเจนเหลวสำหรับการจัดเก็บระยะยาว