Each culture is inoculated with 100

Each culture is inoculated with 100 µl of sample per ml of culture medium. This represents a 1/100 dilution of a 0.1 mg ml–1 tissue homogenate. One culture is inoculated with undiluted homogenate, and two with 1/10 homogenate. No adsorption step is used. As an alternative, two to three cultures can be inoculated directly with 10 µl undiluted homogenate per ml of culture medium. Note that a high rate of cell toxicity or contamination often accompanies the use of a large undiluted inoculum. The cultures are incubated at 22°C in an incubator for 6 days. Cultures are read at day 3 and day 6. Cultures are passed at least once to detect samples with low levels of virus. On day 6, the primary cultures (P1) are frozen overnight at –20°C, thawed, gently mixed and then the culture supernatant is inoculated onto fresh cells as before (P2), i.e. 100 µl P1 supernatant per ml culture medium. Remaining P1 supernatants are transferred to sterile 5 ml tubes and placed at 4°C for testing by ELISA or PCR or another means to confirm the cause of cytopathic effect (CPE) as EHNV. P2 is incubated as above, and a third pass is conducted if necessary.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

แต่ละวัฒนธรรมเป็น inoculated กับ 100 µl อย่างต่อมิลลิลิตรของสาร นี้แทนที่เจือจาง 1/100 ของ homogenate เนื้อเยื่อมล. – 1 0.1 มก. วัฒนธรรมหนึ่งเป็น inoculated กับ homogenate ขจัด สองกับ homogenate 1/10 ขั้นตอนที่ดูดซับไม่ได้ เป็นทางเลือก วัฒนธรรมสองถึงสามสามารถ inoculated กับ homogenate 10 µl ขจัดต่อมิลลิลิตรของสาร หมายเหตุ:อัตราสูงสุดของเซลล์ความเป็นพิษหรือปนเปื้อนมักจะมาพร้อมกับใช้ของ inoculum ขจัดตัวใหญ่ วัฒนธรรมได้รับการกกที่ 22° C ในตู้อบเป็น 6 วัน วัฒนธรรมจะอ่านในวันที่ 3 และวันที่ 6 วัฒนธรรมจะผ่านอย่างน้อยหนึ่งครั้งเพื่อตรวจหาตัวอย่างที่ มีไวรัสในระดับต่ำ ในวันที่ 6 วัฒนธรรมหลัก (P1) แช่แข็งค้างคืนที่ 20 ° C เตรียม ผสมเบา ๆ แล้ว supernatant วัฒนธรรมเป็น inoculated ลงสดเซลล์เป็นก่อน (P2), เช่น 100 µl P1 supernatant ต่อมลสาร เหลือ P1 supernatants จะโอนไปยังหลอด 5 มล.ผ่านการฆ่าเชื้อ และวางไว้ที่ 4° C การทดสอบ ELISA หรือ PCR หรือวิธีอื่นเพื่อยืนยันสาเหตุของ cytopathic ผล (CPE) EHNV P2 คือรับการกกดังกล่าวข้างต้น และผ่านสามจะดำเนินการถ้าจำเป็น

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

วัฒนธรรมแต่ละเชื้อด้วย 100 ไมโครลิตรของกลุ่มตัวอย่างต่อมล. ของกลางวัฒนธรรม นี้แสดงให้เห็นถึงการลดสัดส่วนของ 1/100 0.1 มิลลิกรัม homogenate ML-1 เนื้อเยื่อ วัฒนธรรมหนึ่งคือเชื้อด้วย homogenate เจือปนและสองกับ 1/10 homogenate ไม่มีขั้นตอนที่ถูกนำมาใช้ในการดูดซับ เป็นทางเลือกที่ 2-3 วัฒนธรรมสามารถเชื้อโดยตรงกับ 10 ไมโครลิตร homogenate เจือปนต่อมล. ของกลางวัฒนธรรม โปรดทราบว่าอัตราที่สูงของความเป็นพิษมือถือหรือการปนเปื้อนมักจะมาพร้อมการใช้งานของหัวเชื้อเจือปนที่มีขนาดใหญ่ วัฒนธรรมที่ได้รับการบ่มที่อุณหภูมิ 22 องศาเซลเซียสในศูนย์บ่มเพาะเป็นเวลา 6 วัน วัฒนธรรมที่จะอ่านในวันที่ 3 และวันที่ 6 วัฒนธรรมจะถูกส่งผ่านอย่างน้อยหนึ่งครั้งในการตรวจสอบตัวอย่างที่มีระดับต่ำของไวรัส ในวันที่ 6 วัฒนธรรมหลัก (P1) จะถูกแช่แข็งค้างคืนที่ -20 ° C ละลายผสมเบา ๆ แล้วใสวัฒนธรรมที่มีเชื้อเข้าสู่เซลล์สดเป็นมาก่อน (P2) คือสารละลาย P1 100 ไมโครลิตรต่ออาหารเลี้ยงมล. ที่เหลือ supernatants P1 จะถูกโอนไปผ่านการฆ่าเชื้อขนาด 5 ml ท่อและวางไว้ที่ 4 องศาเซลเซียสสำหรับการทดสอบโดยวิธี ELISA หรือ PCR หรือวิธีการอื่นเพื่อตรวจสอบสาเหตุของการเกิดผล cytopathic (CPE) เป็น EHNV P2 บ่มดังกล่าวข้างต้นและผ่านที่สามคือการดำเนินการในกรณีที่จำเป็น