interactionchromatographyCommercial

interactionchromatographyCommercial nisin was previously diluted in phosphate-buffered saline (0.1 M, pH 7.2, PBS) or Milli-Q water (100 mg/mL,4 log10AU/mL), whereas nisin produced in-house (4982 g/mLof total protein; 4 log10AU/mL) was not diluted. To guaran-tee the hydrophobic interaction, ammonium sulphate wasadded to the samples in sufficient amount to achieve 2 M offinal concentration. From these solutions, a sample (3 mL) wasloaded onto the column. A column (10-mm diameter, 10-cmlength) was packed with butyl sepharose CL 4B matrix (5 mL;GE Healthcare, Uppsala, Sweden). It was equilibrated using3–4 column volumes (1 mL/min) of ammonium sulphate (2 M)in PBS (first profile) or water (second profile). Diluted sam-ples were sequentially eluted with 3 column volumes of (a)2 M ammonium sulphate, (b) 1 M ammonium sulphate and (c)solvent (PBS or water).Elution was performed at a 1 mL/min flow rate and eachcollected fraction contained 1 mL. Fractions were monitoredby absorbance (280 nm), protein content, and nisin activity.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ก่อนหน้านี้ interactionchromatographyCommercial nisin ถูกทำให้เจือจางใน buffered ฟอสเฟตน้ำเกลือ (0.1 M, pH 7.2, PBS) หรือ Q น้ำ (100 mg/mL, log10AU 4 mL), ในขณะที่ไม่ได้ผสม nisin ผลิตในบริษัท (4982 g/mLof รวมโปรตีน log10AU 4 mL) การ guaran-ทีโต้ hydrophobic แอมโมเนียมซัลเฟต wasadded กับตัวอย่างในจำนวนที่เพียงพอเพื่อให้ได้ความเข้มข้น offinal 2 M จากนี้โซลูชั่น wasloaded ตัวอย่าง (3 mL) ลงในคอลัมน์ คอลัมน์ (เส้นผ่าศูนย์กลาง 10 มม. 10 cmlength) ไว้กับเมทริกซ์ 4B sepharose CL ด... (5 mL GE สุขอนามัย Uppsala สวีเดน) ก็ equilibrated using3 – 4 คอลัมน์จำนวนมาก (1 mL/min) แอมโมเนียมซัลเฟต (2 เมตร) ใน PBS (โพรไฟล์แรก) หรือน้ำ (ส่วนกำหนดค่าที่สอง) สาม-ples ที่แตกออกได้ตามลำดับ eluted กับไดรฟ์ข้อมูลคอลัมน์ที่ 3 (ก) 2 เมตรแอมโมเนียมซัลเฟต ม. 1 (ข) แอมโมเนียมซัลเฟต และ (ค) ตัวทำละลาย (PBS หรือน้ำ) Elution ทำที่อัตราการไหล 1 มิลลิลิตร/นาที และเศษส่วน eachcollected ประกอบด้วย 1 mL เศษได้ monitoredby absorbance (280 nm), โปรตีน และกิจกรรม nisin

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

interactionchromatographyCommercial ไนซินถูกเจือจางก่อนหน้านี้ในน้ำเกลือฟอสเฟตบัฟเฟอร์ (0.1 M ค่า pH 7.2 พีบีเอส) หรือน้ำ Milli-Q (100 มิลลิกรัม / มิลลิลิตร 4 log10AU / มิลลิลิตร) ในขณะที่ไนซินที่ผลิตในบ้าน (4982? g / mLof โปรตีนรวม 4 log10AU / มิลลิลิตร) ไม่ได้ถูกปรับลด เพื่อ guaran ทีปฏิสัมพันธ์น้ำ, แอมโมเนียมซัลเฟต wasadded ตัวอย่างในปริมาณที่เพียงพอเพื่อให้บรรลุความเข้มข้น 2 M offinal จากการแก้ปัญหาเหล​​่านี้ตัวอย่าง (3 มิลลิลิตร) wasloaded บนคอลัมน์ คอลัมน์ A (เส้นผ่าศูนย์กลาง 10 มม 10 cmlength) อัดแน่นไปด้วย Sepharose 4B CL บิวทิลเมทริกซ์ (5 มิลลิลิตร; GE Healthcare, Uppsala, สวีเดน) มันเป็น equilibrated ปริมาณคอลัมน์ using3-4 (1 มิลลิลิตร / นาที) ของแอมโมเนียมซัลเฟต (2 M) ในพีบีเอส (รายละเอียดก่อน) หรือน้ำ (รายละเอียดวินาที) ปรับลด sam-Ples ถูกชะลำดับ 3 เล่มคอลัมน์ (ก) 2 M แอมโมเนียมซัลเฟต (ข) 1 M แอมโมเนียมซัลเฟตและ (ค) เป็นตัวทำละลาย (พีบีเอสหรือน้ำ) .Elution เป็นที่ 1 มิลลิลิตร / นาทีอัตราการไหล ส่วน eachcollected มี 1 มิลลิลิตร เศษส่วนมีการดูดกลืนแสง monitoredby (280 นาโนเมตร) มีปริมาณโปรตีนและกิจกรรมไนซิน

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

interactionchromatographycommercial เจือจางในฟอสเฟตบัฟเฟอร์หลังก่อนหน้านี้น้ำเกลือ ( 0.1 M pH 7.2 , PBS ) หรือ milli-q น้ำ ( 100 mg / ml , 4 log10au / มิลลิลิตร ) ในขณะที่ปุ่มที่ผลิตในบ้าน ( ติดต่อ  กรัม / mlof รวมโปรตีน 4 log10au / ml ) คือไม่เจือจาง กับกัวราน่า ทีปฏิกิริยาไฮโดรโฟบิก , แอมโมเนียมซัลเฟต wasadded เพื่อตัวอย่างในปริมาณที่เพียงพอเพื่อให้เกิดสมาธิ offinal 2 M .จากโซลูชั่นเหล่านี้ ตัวอย่าง ( 3 ml . ) wasloaded บนคอลัมน์ คอลัมน์ ( 10 มม. เส้นผ่าศูนย์กลาง 10 cmlength ) คือเต็มไปด้วยบิวทิลเกี่ยวข้อง CL 4B เมทริกซ์ ( 5 มิลลิลิตร ; GE Healthcare อุปซอลา , สวีเดน ) มัน equilibrated using3 – 4 คอลัมน์ ( ปริมาณ 1 มิลลิลิตร / นาที ) ของแอมโมเนียซัลเฟต ( 2 เมตร ) ใน PBS ( รูปแรก ) หรือน้ำ ( รูปที่สอง )เจือจาง ples สามคือเป็นตัวอย่างกับคอลัมน์ 3 เล่ม ( ) 2 M แอมโมเนียมซัลเฟต ( B ) 1 m แอมโมเนียมซัลเฟต ( C ) และตัวทำละลาย ( PBS หรือน้ำ ) ได้มาแสดงที่ 1 มิลลิลิตรต่อนาทีและอัตราการไหล eachcollected เศษส่วนเศษส่วนที่มีอยู่ 1 ml มี monitoredby การดูดกลืนแสง ( 280 nm ) , เนื้อหา โปรตีน และกิจกรรมหลัง .