AbstractGATA are a family of transc

Abstract

GATA are a family of transcription factors characterized by their ability to bind to the DNA sequence “GATA”, and involved in a myriad of cellular processes. GATA1/2/3 factors are known as the hematopoietic GATA factors, which play dominated roles in regulating hematopoiesis. In the present study, a gene encoding GATA transcription factor (designed as CfGATA) was cloned and characterized from the scallop Chlamys farreri. The full-length cDNA of CfGATA is of 2058 bp encoding a predicted polypeptide of 457 amino acids with two conserved zinc finger domains, which shared high similarity with other reported GATA1/2/3 proteins. The mRNA transcripts of CfGATA showed higher expression in gills, hepatopancreas, hemocytes and heart, and the CfGATA protein expressed in HEK293 cells was found to be localized specifically in the nuclei. The recombinant CfGATA protein (rCfGATA) exhibited strong ability to bind specific WGATAR DNA sequence by electrophoretic mobility shift assay in vitro. After CfGATA gene was silenced by RNA interference, the hemocyte renewal rate and circulating total hemocyte count (THC) decreased significantly, which was 7.85-fold and 19.46-fold lower than that of PBS control, respectively (P < 0.05). After LPS stimulation, the expression level of CfGATA mRNA decreased significantly in the hemocytes of PBS or EGFP dsRNA treated scallops, which was accompanied by the increase of hemocyte renewal rate and the reduced circulating THC at 24 h. In contrast, the hemocyte renewal rate and circulating THC did not change significantly in CfGATA gene interfered scallops after LPS stimulation. These results suggested that CfGATA, as a conserved GATA1/2/3 transcription factor, plays essential roles in regulating hemocyte production of scallop.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

บทคัดย่อGATA เป็นครอบครัวปัจจัย transcription โดยความสามารถในการผูกกับลำดับดีเอ็นเอ "GATA" และเกี่ยวข้องในกระบวนการโทรศัพท์มือถือให้เลือกมากมาย GATA1/2-3 ตัวจะเรียกว่าปัจจัย GATA กำเนิดของเม็ดเลือด การเล่นบทบาทที่ครอบงำในควบคุม hematopoiesis ในการศึกษาปัจจุบัน ยีนเข้า GATA สัดส่วน transcription (การออกแบบเป็น CfGATA) เป็นโคลน และลักษณะจากหลอดหอยเชลล์ Chlamys farreri CDNA ปราศจากของ CfGATA ของ bp 2058 polypeptide ที่คาดการณ์ของกรดอะมิโน 457 มีสองสังกะสีนำนิ้วโดเมน ที่ใช้ร่วมกันสูงคล้ายกับโปรตีนอื่น ๆ GATA1 2/3 รายงาน การเข้ารหัสได้ ใบแสดงผล mRNA ของ CfGATA พบว่าสูงกว่านิพจน์ gills, hepatopancreas, hemocytes และหัวใจ และโปรตีน CfGATA ที่แสดงในเซลล์ HEK293 พบเป็นภาษาท้องถิ่นโดยเฉพาะในแบบแอลฟา CfGATA recombinant โปรตีน (rCfGATA) จัดแสดงความแข็งแรงผูกลำดับดีเอ็นเอ WGATAR เฉพาะ โดยเห็นด้วยกะวิเคราะห์ใน หลังจากยีน CfGATA เป็น silenced โดยการแทรกแซงอาร์เอ็นเอ hemocyte อายุอัตราการหมุนเวียนรวม hemocyte นับ (THC) ลดลงอย่างมีนัยสำคัญ 7.85-fold และ 19.46-fold ซึ่งต่ำกว่าของ PBS ควบคุม ตามลำดับ (P < 0.05) หลังจากที่กระตุ้น LPS นิพจน์ระดับ CfGATA mRNA ลดลงอย่างมีนัยสำคัญใน hemocytes ของหอยถือว่า dsRNA PBS หรือ EGFP ซึ่งได้มาจากการเพิ่มอัตราต่ออายุ hemocyte และ THC หมุนเวียนลดลงใน 24 ชม ในทางตรงกันข้าม hemocyte อายุและอัตราการหมุนเวียน THC ได้ไม่เปลี่ยนแปลงมากใน CfGATA ยีนติดหอยหลังกระตุ้น LPS ผลลัพธ์เหล่านี้แนะนำว่า CfGATA เป็นตัวนำ GATA1 2/3 transcription คูณ เล่นบทบาทสำคัญในการควบคุมการผลิตหอยแครง hemocyte

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

บทคัดย่อGATA เป็นครอบครัวที่ถอดความปัจจัยที่โดดเด่นด้วยความสามารถในการผูกกับลำดับดีเอ็นเอ "GATA" และมีส่วนร่วมในกระบวนการมากมายของโทรศัพท์มือถือ GATA1 / 2/3 ปัจจัยที่เป็นที่รู้จักกันเป็นปัจจัยเม็ดเลือด GATA ซึ่งมีบทบาทเด่นในการควบคุมโลหิต ในการศึกษาปัจจุบันยีนถอดความปัจจัย GATA (การออกแบบเป็น CfGATA) เป็นโคลนและโดดเด่นจากหอยเชลล์ farreri Chlamys cDNA เต็มความยาวของ CfGATA เป็น 2,058 bp เข้ารหัส polypeptide ที่คาดการณ์ไว้จาก 457 กรดอะมิโนที่มีโดเมนที่สองนิ้วสังกะสีป่าสงวนซึ่งใช้ร่วมกันคล้ายคลึงกันสูงกับคนอื่น ๆ รายงาน GATA1 / 2/3 โปรตีน mRNA จิตบำบัดของ CfGATA แสดงให้เห็นว่าการแสดงออกที่สูงขึ้นในเหงือกตับ, เม็ดเลือดและหัวใจและโปรตีน CfGATA แสดงออกในเซลล์ HEK293 ก็พบว่าได้รับการแปลเป็นภาษาท้องถิ่นโดยเฉพาะในนิวเคลียส โปรตีน CfGATA recombinant (rCfGATA) แสดงความสามารถที่แข็งแกร่งในการผูกลำดับดีเอ็นเอ WGATAR โดยเฉพาะการเคลื่อนไหว electrophoretic ทดสอบการเปลี่ยนแปลงในหลอดทดลอง หลังจากยีน CfGATA ก็เงียบจากการแทรกแซงอาร์เอ็นเอเม็ดเลือดอัตราการต่ออายุและการไหลเวียนของการนับเม็ดเลือดรวม (THC) ลดลงอย่างมีนัยสำคัญซึ่งเป็น 7.85 เท่าและ 19.46 เท่าต่ำกว่าของการควบคุมพีบีเอสตามลำดับ (P <0.05) หลังจากการกระตุ้น LPS ระดับการแสดงออกของ mRNA CfGATA ลดลงอย่างมีนัยสำคัญในเซลล์เม็ดเลือดพีบีเอสหรือ EGFP dsRNA รับการรักษาหอยเชลล์ซึ่งมาพร้อมกับการเพิ่มขึ้นของเม็ดเลือดอัตราการต่ออายุและการไหลเวียนของ THC ลดเวลา 24 ชั่วโมง ในทางตรงกันข้ามเม็ดเลือดอัตราการต่ออายุและการไหลเวียนของ THC ไม่ได้เปลี่ยนแปลงอย่างมีนัยสำคัญในยีน CfGATA แทรกแซงหอยเชลล์หลังจากการกระตุ้น LPS ผลการศึกษานี้ชี้ให้เห็นว่า CfGATA เป็นป่าสงวน GATA1 / 2/3 ปัจจัยถอดความมีบทบาทสำคัญในการควบคุมการผลิตเม็ดเลือดของหอยเชลล์

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

นามธรรม

กะทะเป็นครอบครัวของปัจจัยการถอดความลักษณะความสามารถในการผูกกับดีเอ็นเอลำดับ " กะทะ " และที่เกี่ยวข้องในมากมายของกระบวนการที่เซลล์ gata1 / 2 / 3 ปัจจัยที่เรียกว่าปัจจัย GATA เม็ดโลหิต ซึ่งเล่นครอบงำบทบาทในการควบคุมการกำเนิดเซลล์เม็ดเลือด . ในการศึกษาครั้งนี้ยีนถอดความ GATA ปัจจัยการเข้ารหัส ( ออกแบบมาเป็น cfgata ) ถูกโคลนและศึกษาลักษณะจากหอยเชลล์ chlamys farreri . วิธีเต็มตัวของ cfgata มี 2058 BP การเข้ารหัสคาดการณ์โพลีเปปไทด์ของกรดอะมิโนที่มีสองโดเมน 457 อนุรักษ์สังกะสีนิ้วซึ่งใช้ความคล้ายคลึงกันสูงกับอื่น ๆรายงาน gata1 / 2 / 3 โปรตีน mRNA transcripts ของ cfgata พบการแสดงออกสูงในเหงือกปลานะกุ้งและเม็ดเลือด หัวใจ และ cfgata โปรตีนที่แสดงออกใน hek293 เซลล์พบว่าเป็นถิ่นเฉพาะในนิวเคลียส . โปรตีนรีคอมบิแนนท์ cfgata ( rcfgata ) มีความสามารถที่แข็งแกร่งที่จะผูกลำดับดีเอ็นเอ wgatar โดยเฉพาะยูไนเต็ดเปลี่ยนใช้หลอด หลังจาก cfgata ก็เงียบด้วยการแทรกแซงอาร์เอ็นเอของยีน ,การ hemocyte อัตราต่ออายุและหมุนเวียนนับ hemocyte ทั้งหมด ( THC ) ลดลงอย่างมีนัยสำคัญ ซึ่ง 7.85-fold และ 19.46-fold ต่ำกว่าของ PBS ควบคุมตามลำดับ ( p < 0.05 ) หลังจากเทปการกระตุ้นการแสดงออกของยีนในระดับ cfgata ลดลงอย่างมีนัยสำคัญในเม็ดเลือดของ PBS หรือ egfp dsRNA เลี้ยงหอยซึ่งได้มาโดยการเพิ่มขึ้นของอัตราการต่ออายุ hemocyte และลดหมุนเวียนงานใน 24 ชั่วโมง ในทางตรงกันข้าม , hemocyte อัตราต่ออายุ และการหมุนเวียนงานไม่ได้เปลี่ยนแปลงอย่างมีนัยสำคัญในยีน ~ cfgata หอยหลังหล่อลื่นกระตุ้น ผลลัพธ์เหล่านี้ชี้ให้เห็นว่า cfgata เป็นป่าสงวน gata1 / 2 / 3 ถอดความปัจจัยเล่นบทบาทสำคัญในการควบคุมการผลิต hemocyte ของหอยเชลล์