Finally, after washing five times with PBST, the membranes were incubated in substrate solution buffer (0.1 mol L-1 Tris base, 0.1 mol L-1 NaCl and 0.05 mol L-1 MgCl2, pH 9.5) containing 66 μL NBT (nitro-blue tetrazolium chloride) and 33 μL BCIP (5-bromo-4-chloro-3-indolyl phosphate) or TMB (3,3´,5,5´-tetramethylbenzidine) substrate solution (Promega, Madison, WI, USA). Positive samples developed either purple or blue color in 10-25 min.
สุดท้ายหลังจากล้างห้าครั้งกับ PBST น้ำคร่ำถูกบ่มในบัฟเฟอร์การแก้ปัญหาสารตั้งต้น (0.1 mol L-1 ฐาน Tris 0.1 mol L-1 และโซเดียมคลอไรด์ 0.05 mol L-1 MgCl2 ค่า pH 9.5) ที่มี 66 ไมโครลิตร NBT (nitro- สีฟ้า tetrazolium คลอไรด์) และ 33 ไมโครลิตร BCIP (5-Bromo-4-chloro-3-indolyl ฟอสเฟต) หรือ TMB (3,3', 5,5'-tetramethylbenzidine) วิธีการแก้ปัญหาสารตั้งต้น (Promega, Madison, WI, USA) ตัวอย่างการพัฒนาในเชิงบวกสีทั้งสีม่วงหรือสีฟ้าใน 10-25 นาที
การแปล กรุณารอสักครู่..
ในที่สุด หลังจากซักห้าครั้งกับ pbst , เยื่อแผ่นแบบบ่มในสารละลายบัฟเฟอร์ ( 0.1 โมล ( L-1 ซึ่งฐาน 0.1 และ 0.05 โมลพีเอช L-1 โมล L-1 MgCl2 pH 9.5 ) ประกอบด้วย 66 μ L NBT ( คลอไรด์ tetrazolium Nitro สีฟ้า ) และ 33 μผม bcip ( 5-bromo-4-chloro-3-indolyl ฟอสเฟต ) หรือ TMB ใหม่ 5 , 5 ( 3 , 3 , ใหม่ - tetramethylbenzidine ) พื้นผิวโซลูชั่น ( promega เมดิสัน , WI , USA ) ตัวอย่างบวกพัฒนาทั้งสีม่วงหรือสีฟ้าใน 10-25 นาที
การแปล กรุณารอสักครู่..