G. rostochiensis: ITS-1 (5′-TGT TGT

G. rostochiensis: ITS-1 (5′-TGT TGTACG TGC CGTACC TT-3′), G. pallida: ITS-1 (5′-GGT GAC TCG ACG ATT GCT GT-3′), and universal primer for PCN: 5.8S rDNA (5′-GCA GAA GGC TAG CGATCT TC-3′) (Mulholland et al. 1996). Twenty five ng DNA template from each region was transferred into 25 μl PCR mixture containing 50 mM Tris–HCl(pH 9.0),50mMKCl,1.5mMMgCl2so thatthe 2 is subscript, 0.1 % Triton X-100, 0.2 mM dNTP (New England Biolabs, Hitchin, UK), 50 ng primer and 0.5 unit Taq polymerase (New England Biolabs, Hitchin, UK). PCR products were analysed using 2 % agarose gel electrophoresis in 0.5× TBE buffer and stained with ethidium bromide (Maniatis et al. 1989).

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

Rostochiensis กรัม: เป็นข่าวลือ 1 (5′ TGT TGTACG TGC CGTACC TT-3′) pallida กรัม: เป็น 1 (5′-GGT GAC TCG จีบ ATT GCT GT-3′), และรองพื้นสากลสำหรับ PCN: 5.8S rDNA (5′ GCA เฒ่า GGC แท็ก CGATCT TC-3′) (Mulholland et al. 1996) ยี่สิบห้า ng ดีเอ็นเอต้นแบบจากแต่ละภูมิภาคมีการโอนย้ายลงในส่วนผสม PCR 25 μl ประกอบด้วย 50 mM ตรี – HCl(pH 9.0), 50mMKCl, 1.5mMMgCl2so 2 ว่าตัวห้อย 0.1% ไตรตั้น X 100, dNTP 0.2 mM (นิวอิงแลนด์ Biolabs, Hitchin, UK), รองพื้น 50 ng และ 0.5 หน่วย Taq พอลิเมอเรส (Biolabs นิวอิงแลนด์ Hitchin, UK) ผลิตภัณฑ์ PCR ได้ analysed ใช้ 2% agarose เจ electrophoresis ในบัฟเฟอร์ TBE × 0.5 และสี ด้วย ethidium โบรไมด์ (Maniatis et al. 1989)

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

G. rostochiensis: ITS-1 (5'-TGT TGTACG TGC CGTACC TT-3 '), G. pallida: ITS-1 (5'-GGT GAC TCG ACG ATT GCT GT-3') และไพรเมอร์สากลสำหรับ PCN: 5.8S rDNA (5'-GCA GAA GGC TAG CGATCT TC-3 ') (มัลฮอลแลนด์ et al. 1996) ยี่สิบห้าดีเอ็นเอแม่แบบงะจากแต่ละภูมิภาคก็ถูกย้ายเป็น 25 ไมโครลิตรผสม PCR ที่มี 50 มิลลิ Tris-HCl (pH 9.0) 50mMKCl, 1.5mMMgCl2so thatthe 2 ห้อย, 0.1% Triton X-100 0.2 มิลลิ dNTP (นิวอิงแลนด์ Biolabs, ชิ่งสหราชอาณาจักร), ไพรเมอร์ 50 นาโนกรัมและ 0.5 หน่วยโพลิเมอร์ Taq (นิวอิงแลนด์ Biolabs ชิ่งสหราชอาณาจักร) ผลิตภัณฑ์พีซีอาร์ได้รับการวิเคราะห์โดยใช้ 2% ข่าวคราว agarose 0.5 × TBE buffer และย้อมด้วย ethidium bromide (Maniatis et al. 1989)

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

กรัม rostochiensis : its-1 ( 5 ’ - TGT tgtacg TGC cgtacc tt-3 School ) , จี pallida : its-1 ( 5 ’ - ไม่ผ่าน TCG ACG ATT GCT gt-3 School ) และสากล ไพรเมอร์สำหรับ PCN : 5.8s rDNA ( 5 ’ - GCA GAA cgatct แท็ก ggc tc-3 School ) ( Mulholland et al . 1996 ) ยี่สิบห้าของดีเอ็นเอแม่แบบจากแต่ละภูมิภาค ถูกส่งตัวไปเป็น 25 μผม PCR ผสมที่ประกอบด้วย 50 มม. โดย– HCl ( pH 9.0 ) , 50mmkcl 1.5mmmgcl2so ว่า 2 , ตัวห้อย , 0 .1% Triton X-100 , 0.2 มม. dntp ( อังกฤษ biolabs Hitchin , สหราชอาณาจักร ) , 50 ของไพรเมอร์และ 0.5 หน่วยแท็ค Polymerase ( อังกฤษ biolabs Hitchin , สหราชอาณาจักร ) ผลิตภัณฑ์ PCR วิเคราะห์โดยใช้ 2% เจลอิเล็กโตรโฟรีซิสใน 0.5 ×ทีบีบัฟเฟอร์ และย้อมด้วยทิเดียมโบรไมด์ ( maniatis et al . 1989 )