The tissues were sonicated in the p

The tissues were sonicated in the presence of 1mL
trizol (Invitrogen, Carlsbad, USA), in order to
disrupt the cells and release the RNA. The resulting
suspensions were passed repeatedly through a 21-in
needle to break the genomic DNA. It was then
placed on ice and 0.2mL chloroform was added.
After vigorous shaking and incubation at room
temperature for 5 min, the samples were centrifuged
in micro-tubes at 13,500 rpm at 4 1C for 15 min. The
lower phase and white protein inter-phase were
discarded, while the clear upper phase containing
the RNA was aspirated and placed in a fresh tube.
An equal volume of cold isopropanol was added
and the solution was allowed to stand at room
temperature for 5–10 min before being centrifuged
as mentioned above. The supernatant was discarded
and the pellet washed in 1mL cold 75% diethylpyrocarbonate
ethanol (DEPC; Sigma, St. Louis, USA)
followed by centrifugation as earlier for 5 min. After
the final wash, the ethanol was removed and the
pellet was air-dried for 10–15 min and redissolved in
DEPC-treated water. The extracted RNA was
diluted 35 times and 70 ml was used to determine
the total RNA concentration and purity of the
samples by a GeneQuant spectrophotometer (Pharmacia
Biotech, Freiburg, Germany). The RNA was
stored at 80 1C.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

เนื้อเยื่อถูก sonicated ในต่อหน้าของมล 1trizol (Invitrogen คาร์ลส สหรัฐอเมริกา), เพื่อรบกวนเซลล์ และปล่อยอาร์เอ็นเอ การส่งผลบริการได้ผ่านซ้ำ ๆ 21 - ในเข็มจะทำลาย genomic DNA ถูกแล้ววางบนน้ำแข็งและ 0.2mL เพิ่มคลอโรฟอร์มหลังจากเขย่าคึกคักและคณะทันตแพทยศาสตร์ห้องอุณหภูมิได้ centrifuged ตัวอย่างใน 5 นาทีในท่อไมโครที่ rpm 13,500 ที่ 1C 4 ใน 15 นาทีระยะต่ำและระยะระหว่างโปรตีนสีขาวยกเลิก ในขณะที่ประกอบด้วยระยะด้านบนชัดเจนอาร์เอ็นเอถูก aspirated และวางท่อสดเพิ่มปริมาตรการเท่ากันของ isopropanol เย็นและโซลูชันที่อนุญาตให้ยืนที่ห้องอุณหภูมิสำหรับ 5-10 นาทีก่อนการ centrifugedดังกล่าวข้างต้น Supernatant ถูกละทิ้งและเม็ดล้างใน 1mL เย็น 75% diethylpyrocarbonateเอทานอล (DEPC ซิกมา St. Louis สหรัฐอเมริกา)ตาม ด้วย centrifugation ไว้ก่อนหน้านี้สำหรับ 5 นาทีหลังจากสุดท้ายล้าง เอทานอลถูกเอาออกและเม็ด air-dried สำหรับ 10-15 นาที และ redissolved ในน้ำถือว่า DEPC อาร์เอ็นเอที่แยกได้ผสมครั้งที่ 35 และ 70 ml ถูกใช้เพื่อกำหนดรวมอาร์เอ็นเอความเข้มข้นและความบริสุทธิ์ตัวอย่าง โดยการ GeneQuant เครื่องทดสอบกรดด่าง (Pharmaciaเทคโนโลยีชีวภาพ Freiburg เยอรมนี) อาร์เอ็นเอถูกเก็บที่ 80 1C.

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

เนื้อเยื่อถูก sonicated ในการปรากฏตัวของ 1 mL
Trizol (Invitrogen, คาร์ลส, สหรัฐอเมริกา)
เพื่อที่จะทำลายเซลล์และปล่อยตรวจrna ส่งผลให้สารแขวนลอยได้ผ่านซ้ำผ่าน 21 ในเข็มที่จะทำลายดีเอ็นเอ มันถูกแล้ววางอยู่บนน้ำแข็งและคลอโรฟอร์ม 0.2mL ถูกบันทึก. หลังจากที่แข็งแรงสั่นและบ่มในห้องอุณหภูมิ 5 นาทีที่ตัวอย่างที่ถูกปั่นในหลอดขนาดเล็กที่13,500 รอบต่อนาทีที่ 4 1C นาน 15 นาที ระยะต่ำและโปรตีนสีขาวระหว่างขั้นตอนที่ถูกทิ้งในขณะที่ขั้นตอนที่ชัดเจนบนที่มีอาร์เอ็นเอที่ถูกสำลักและวางไว้ในท่อสด. ปริมาณที่เท่ากันของ isopropanol เย็นถูกบันทึกและการแก้ปัญหาที่ได้รับอนุญาตให้ยืนอยู่ที่ห้องอุณหภูมิ5 10 นาทีก่อนที่จะถูกหมุนเหวี่ยงดังกล่าวข้างต้น สารละลายทิ้งและล้างอัดเม็ดใน 1 mL เย็น 75% diethylpyrocarbonate เอทานอล (DEPC; ซิกเซนต์หลุยส์สหรัฐอเมริกา) ตามด้วยการหมุนเหวี่ยงก่อนหน้านี้เป็นเวลา 5 นาที หลังจากล้างสุดท้ายเอทานอลจะถูกลบออกและเม็ดถูกอากาศแห้งประมาณ10-15 นาทีและ redissolved ในน้ำDEPC รับการรักษา อาร์เอ็นเอที่สกัดได้ปรับลด 35 ครั้งและ 70 มล. ถูกใช้ในการตรวจสอบความเข้มข้นของอาร์เอ็นเอรวมและความบริสุทธิ์ของตัวอย่างโดยspectrophotometer GeneQuant (Pharmacia ไบโอเทค, Freiburg, เยอรมนี) RNA ถูกเก็บไว้ที่? 80 1C

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

เนื้อเยื่อถูก sonicated ต่อหน้า 1ml
trizol ( Invitrogen Carlsbad , USA ) , เพื่อ
รบกวนเซลล์และปล่อย RNA ผล
ช่วงล่างผ่านผ่าน 21 ซ้ำๆใน
เข็มเพื่อทำลายดีเอ็นเอ . มันเป็นงั้น
วางไว้บนน้ำแข็งและ 0.2ml คลอโรฟอร์มถูกเพิ่มเข้ามา หลังจากที่เข้มแข็ง
สั่นและบ่มที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 5 นาที

จำนวนไฟฟ้า ,ในหลอดขนาดเล็กที่ 10 , 000 รอบต่อนาที ที่ 4 ใน 15 นาที
เฟสลดโปรตีนและอินเตอร์เฟสเป็นสีขาว
ทิ้งในขณะที่ชัดเจนบนเฟสที่มี RNA คือ aspirated
และวางอยู่ในท่อสด
ปริมาณเท่ากับกระแสเย็นเพิ่ม
และโซลูชั่นที่ถูกปล่อยให้ยืนที่อุณหภูมิห้อง
5 – 10 นาทีก่อนที่จะถูกไฟฟ้า
ดังกล่าวข้างต้น และน่านถูกทิ้ง
และเม็ดล้างใน 1ml หนาว 75% diethylpyrocarbonate
เอทานอล ( depc ; Sigma , เซนต์ หลุยส์ , USA )
ตามด้วยปั่น 5 นาที หลังจากที่ก่อนหน้านี้
ล้างสุดท้าย เอทานอลจะถูกลบออกและ
การผลิตอากาศแห้งประมาณ 10 – 15 นาทีและ redissolved ใน
depc รักษาน้ำ สกัด RNA คือ
เจือจาง 35 ครั้ง และ 70 ml ศึกษา
รวมความเข้มข้นและความบริสุทธิ์ของ
.ตัวอย่างด้วยเครื่อง genequant ( มุ่งมั่น
ชีวภาพ Freiburg , เยอรมนี ) ยีนคือ
เก็บไว้ที่  80 1C .