.Three different preparation method

.Three different preparation methods were used to make three distinct siRNA nanosome samples (Fig. 1). For the first preparation method, freshly prepared protamine sulfate solution in DEPC-treated water was added drop wise to an aqueous solution of siRNA while vortexing the solution at a moderate speed. siRNA and protamine sulfate condensation was continued for 40 min at room temperature. Following siRNA-protamine sulfate condensation, freshly-prepared, pre-warmed liposome was added to the mixture. The final preparation was mixed rapidly by pipetting up and down 30 times. Freshly-prepared trehalose solution in DEPC-treated water was added and vortexed to allow thorough mixing of the nanosomes and trehalose. This first prepared sample was designated siRNA nanosomes. The siRNA nanosomes were aliquoted into several tubes; each containing 15 μg of siRNA entrapped in the siRNA nanosomes. The different tubes corresponded to the different storage time periods for the sample. All of these siRNA nanosome samples were kept at −80 °C for 2 h followed by lyophilization for 5 days. After lyophilization, the samples were collected, sealed and kept in a desiccator at 4 °C. The stored samples were removed at each storage time: Day 1 (D1), Month 1 (M1), Month 2 (M2), and Month 3 (M3). At each time point, the lyophilized siRNA nanosome powder was reconstituted with DEPC-treated water

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

.การเตรียมการต่าง ๆ สามวิธีก็จะสามหมด siRNA nanosome ตัวอย่าง (Fig. 1) สำหรับวิธีแรกการเตรียม โซลูชันซัลเฟต protamine ลิ้ม DEPC ถือว่าน้ำถูกเพิ่ม wise หล่นไปการละลายของ siRNA ขณะ vortexing การแก้ปัญหาที่ความเร็วปานกลาง ควบแน่นซัลเฟต siRNA และ protamine ได้อย่างต่อเนื่องสำหรับ 40 นาทีที่อุณหภูมิห้อง ต่อ siRNA protamine ซัลเฟตมีหยดน้ำเกาะ ลิ้ม ก่อน warmed liposome ถูกเพิ่มเข้าไปผสม การเตรียมการขั้นสุดท้ายถูกผสมอย่างรวดเร็ว ด้วย pipetting ขึ้น 30 ครั้ง โซลูชันลิ้ม trehalose DEPC รับน้ำเพิ่ม และ vortexed ให้ละเอียดผสม nanosomes และ trehalose ตัวอย่างที่เตรียมไว้นี้แรกมีกำหนด siRNA nanosomes SiRNA nanosomes aliquoted ในท่อหลาย ละประกอบด้วย μg 15 ของ siRNA ที่เก็บกักใน siRNA nanosomes ท่อต่าง ๆ corresponded การเก็บแตกต่างรอบระยะเวลาสำหรับตัวอย่าง ตัวอย่าง nanosome siRNA เหล่านี้ทั้งหมดถูกเก็บไว้ที่ −80 ° C สำหรับ h 2 ตาม lyophilization 5 วัน หลังจาก lyophilization ตัวอย่างถูกเก็บรวบรวม ปิดสนิท และเก็บไว้ใน desiccator ที่ 4 องศาเซลเซียส ตัวอย่างเก็บไว้ออกแต่ละครั้งที่เก็บข้อมูล: วัน 1 (ง 1), เดือน 1 (M1), เดือน 2 (M2), และ 3 เดือน (M3) ในแต่ละจุดของเวลา ผง nanosome lyophilized siRNA ถูก reconstituted น้ำรักษา DEPC

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

สามวิธีการเตรียมที่แตกต่างกันถูกใช้เพื่อให้แตกต่างกันสามบริษัทนาโนโซมตัวอย่าง ( รูปที่ 1 ) สำหรับวิธีการเตรียมตัวก่อนเตรียมสดโปรตามีนสารละลายซัลเฟตในน้ำ depc เพิ่มวางปัญญาสารละลายในขณะที่ vortexing บริษัทโซลูชั่นที่ความเร็วปานกลาง บริษัทโพรทามีนซัลเฟตและควบแน่นได้ต่อเนื่อง 40 นาที ที่อุณหภูมิห้องต่อไปนี้บริษัทโพรทามีนซัลเฟตการควบแน่น สดใหม่ ปรุงก่อนอุ่นไลโปโซมที่ถูกเพิ่มเข้าไปในส่วนผสม การเตรียมการขั้นสุดท้ายผสมอย่างรวดเร็ว โดย pipetting ขึ้นลง 30 ครั้ง เตรียมสดโซลูชั่นในการ depc น้ำถือว่าเป็นการเพิ่มและ vortexed ให้ผสมของ nanosomes และการอย่างละเอียด ก่อนเตรียมตัวอย่างเขตบริษัท nanosomes .ซึ่งเป็นบริษัท nanosomes aliquoted เป็นหลอดหลาย แต่ละที่มี 15 กรัมของบริษัทμ entrapped ในบริษัท nanosomes . ท่อที่แตกต่างกัน สอดคล้องกับเวลาที่แตกต่างกันระยะเวลาเก็บสำหรับตัวอย่าง ทั้งหมดนี้บริษัทนาโนโซมจำนวนไว้ที่ 80 °− C 2 H ตามหลักสูตร 5 วัน หลังจาก Tool , ตัวอย่าง ,ปิดผนึกและเก็บไว้ในเดซิกเคเตอร์ที่ 4 องศา จัดเก็บตัวอย่างถูกเอาออกในแต่ละกระเป๋าเวลา : 1 วัน ( D1 ) 1 เดือน ( 1 ) เดือน 2 ( M2 ) และเดือนที่ 3 ( M3 ) ในแต่ละจุดเวลา ไลโอบริษัทนาโนโซมสามารถ depc น้ำกับผง