One of the major steps in the innate immune response of shrimp includes the activation of serine proteinases of the pro-phenoloxidase pathway by the prophenoloxidase activation enzyme (PPAF). In this study, the cDNA encoding a serine proteinase homologue (SPH) with prophenoloxidase activating activity of Penaeus monodon (PmPPAF) was cloned and characterized. PmPPAF cDNA consists of 1444 nucleotides encoding a protein with 394 amino acid residues. The estimated molecular weight of PmPPAF is 43.5 kDa with an isoelectric point of 5.19. PmPPAF consists of a signal peptide, a CLIP domain and a carboxyl-terminal trypsin-like serine protease domain. It is highly similar to the masquerade-like protein 2A (61% similarity) of the crayfish Pacifastacus leniusculus, other serine protease (42.9–67% identity) of P. monodon, and the PPAF of the crab (61% similarity). Unlike other SPH of P. monodon, which express mainly in the hemocytes, PmPPAF transcripts were detected in the hemocytes, eyestalk, hypodermis, gill, swimming leg and brain. Similar to the crab PPAF, PmPPAF transcript level is high in shrimp at the premolt stages and PmPPAF expression is up-regulated in shrimp infected with white spot syndrome virus (WSSV). Gene silencing of PmPPAF decreased expression of a prophenoloxidase-like gene and injection of Anti-PmPPAF antibody causes a decrease in PO activity. Taken together, these results provided evidence that PmPPAF is a serine proteinase homologue, and is involved in the pro-PO activation pathway of the shrimp innate immune system.
หนึ่งในขั้นตอนที่สำคัญในการตอบสนองทางภูมิคุ้มกันโดยธรรมชาติของกุ้ง รวมถึงการกระตุ้นเอนไซม์ proteinases ของโปรฟีนอลออกซิเดสทางเดินโดยภูมิกระตุ้นเอนไซม์ ( ppaf ) ในการศึกษานี้ สายพันธุ์ของเอนไซม์โปรตีนผิวที่เข้ารหัส ( SPH ) กับภูมิกระตุ้นกิจกรรมของกุ้งกุลาดำ ( pmppaf ) ถูกโคลนและศึกษาคุณสมบัติpmppaf ดีเอ็นเอประกอบด้วยนิวคลีโอไทด์การเข้ารหัสโปรตีน 1444 394 กรดอะมิโนที่ตกค้าง โดยโมเลกุลของ pmppaf เป็น 43.5 kDa ที่มีจุดไอโซอิเล็กทริกของ 5.19 . pmppaf ประกอบด้วยสัญญาณเปปไทด์ , คลิปโดเมนและคาร์บอกซิล สถานีซินเหมือนเซรีนโปรตีนโดเมนมันเป็นอย่างสูงที่คล้ายกับสวมหน้ากากเหมือน 2a โปรตีน ( 61 % ความเหมือน ) ของกุ้ง pacifastacus leniusculus โปรเซอรีน ( 42.9 และ 67% ตัวตน ) ของกุ้งกุลาดำ และ ppaf ของปู ( 61 % ความเหมือน ) ซึ่งแตกต่างจากเวลาอื่น ๆของกุ้งกุลาดำ ซึ่งบริการส่วนใหญ่ในเม็ดเลือด pmppaf transcripts , ถูกตรวจพบในเม็ดเลือดเพื่อ hypodermis , , , เหงือก ขาว่ายน้ำ และสมองคล้ายปู ppaf pmppaf , บันทึกระดับสูงในกุ้งที่ premolt ขั้นตอนและการแสดงออก pmppaf คือคากุ้งติดเชื้อไวรัสโรคจุดขาว ( ี ) ยีนไซเลนซิงของ pmppaf ลดลงการแสดงออกของยีนและภูมิเหมือนฉีดแอนติบอดีต่อต้าน pmppaf สาเหตุที่ลดลงในกิจกรรม Po ถ่ายด้วยกันผลลัพธ์เหล่านี้ให้หลักฐานที่ pmppaf เป็นเอนไซม์โปรตีนผิวและมีส่วนร่วมในโปรโปกระตุ้นทางเดินของกุ้งเช่นกัน ระบบภูมิต้านทาน
การแปล กรุณารอสักครู่..
