Upon arrival, the temperature of th

Upon arrival, the temperature of the
portable incubator was verified to be within 37 C to 39 C.
The vials containing COC were then placed in the laboratoryincubator (38.5 C, 5% CO2 in humidified air) with lids
loosened until 23 hours of maturation had elapsed.
Matured COC were washed in F-CDM and then randomly
assigned for insemination with X-sorted or nonsorted
sperm from one Holstein bull. In total, three bulls were
used. All three bulls were used for Dairy 1 (two from XY
Inc., Fort Collins, CO, USA; one from Select Sires, Plain City,
OH, USA), and two of the bulls used for Dairy 1 were used
for Dairy 2 (one each from XY Inc. and Select Sires). Semen
was thawed, no more than two straws at a time, in a 37 C
water bath for 30 seconds. The X-sorted spermwas thawed,
layered on top of a mini-Percoll gradient (500 mL 45% Percoll
over 450 mL 90% Percoll in a 1.5-mL conical tube), and
the suspension was centrifuged at 600 g for 10 minutes.
The supernatant was removed with a pipette, and 1 mL
HEPES-CDM-1 (H-CDM-1) was added to resuspend the
sperm pellet. The tubewas then centrifuged at 300 g for 5
minutes and the supernatant removed to leave a pellet and
small volume of 50 to 100 mL. The sperm concentrationwas
then determined using a hemacytometer, and sperm was
diluted to 10  106 sperm per mL so that the final
concentration in the fertilization drop would be 2  106
sperm per mL. The fertilization drop was constituted with
30 mL of X-sorted sperm, 25 to 35 COC in 10 mL, and 110 mL
F-CDM in a 60-mm dish under mineral oil.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

เมื่อมาถึง อุณหภูมิของการบ่มเพาะวิสาหกิจแบบพกพาได้รับการตรวจสอบภายใน 37 C จะค 39Vials ประกอบด้วยคอชถูกจัดอยู่ใน laboratoryincubator (38.5 C, 5% CO2 ในอากาศ humidified) พร้อมฝาหลวมจนกว่าพ่อแม่ 23 ชั่วโมงก็ผ่านไปถูกล้าง matured COC ใน F-เมนูแล้วสุ่มกำหนดให้การผสมเทียมกับเรียง ลำดับ X หรือ nonsortedสเปิร์มจากวัวโฮลชไตน์หนึ่ง รวม วัวสามได้ใช้ วัวทั้งหมดสามใช้สำหรับ 1 นม (สองจาก XYอิงค์ ฟอร์ตคอลลินส์ CO สหรัฐอเมริกา จากการเลือกพ่อพันธุ์โค ซิตี้ล้วนOH สหรัฐอเมริกา), และสองวัวใช้สำหรับ 1 นมใช้สำหรับผลิตภัณฑ์นม 2 (หนึ่งละ XY Inc. และเลือกพ่อพันธุ์โค) น้ำเชื้อเป็น thawed หลอดมากกว่าสองที่ 37 Cอาบน้ำ 30 วินาที Spermwas X เรียง thawedชั้นบนไล่ Percoll ขนาดเล็ก (ขนาด 500 มล. 45% Percollมากกว่า 450 มล. 90% Percoll ในหลอดทรงกรวย 1.5 mL), และการระงับได้ centrifuged ที่ 600 g 10 นาทีSupernatant ถูกเอาเปตต์ และ 1 mLHEPES-เมนู-1 (H ตาม 1) ถูกเพิ่มเข้าไป resuspendจ๊ากเม็ด Tubewas centrifuged แล้ว ที่ 300 กรัมสำหรับ 5นาทีและ supernatant ที่เอาไปเป็นเม็ด และขนาดเล็กปริมาณ 50-100 mL Concentrationwas อสุจิจากนั้น กำหนดใช้เป็น hemacytometer และสเปิร์มได้ผสมกับสเปิร์ม 10 106 ต่อ mL ดังนั้นที่สุดท้ายความเข้มข้นในการปล่อยในปัจจุบันจะเป็น 2 106จ๊ากต่อมล หล่นปฏิสนธิได้ทะลักด้วย30 mL ของอสุจิ X เรียง คอช 25-35 10 mL และ 110 mLF-เมนูจาน 60 มม.ภายใต้น้ำมัน

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

เมื่อมาถึงอุณหภูมิของ
ศูนย์บ่มเพาะแบบพกพาที่ได้รับการตรวจสอบให้อยู่ใน 37? C ถึง 39? C.
ขวดที่มี COC ถูกวางไว้แล้วใน laboratoryincubator (38.5 องศาเซลเซียส, CO2 5% ในอากาศความชื้น) ที่มีฝาปิด
หลวมจน 23 ชั่วโมง ของการเจริญเติบโตที่ผ่านไป.
สุก COC ถูกล้างใน F-CDM แล้วสุ่ม
ได้รับมอบหมายสำหรับการผสมเทียมกับ X-เรียงลำดับหรือ nonsorted
สเปิร์มจากวัวโฮลหนึ่ง ทั้งหมดสามวัวถูก
นำมาใช้ ทั้งสามวัวถูกนำมาใช้เป็นเวลา 1 นม (สองจาก XY
Inc. , ฟอร์ตคอลลิน, CO, USA หนึ่งจากเลือกตระกูล, ธรรมดาซิตี้,
OH, USA) และสองของวัวที่ใช้สำหรับนม 1 ถูกนำมาใช้
สำหรับนม 2 ( คนหนึ่งจากแต่ละ XY อิงค์และเลือกตระกูล) น้ำเชื้อ
ถูกละลายไม่เกินสองหลอดในเวลาใน 37? C
อาบน้ำเป็นเวลา 30 วินาที spermwas X เรียงละลาย
ชั้นบนของการไล่ระดับสีมินิ Percoll (500 มล 45% Percoll
กว่า 450 มิลลิลิตร 90% Percoll ในหลอดรูปกรวย 1.5 มิลลิลิตร) และ
ระบบกันสะเทือนที่ถูกหมุนเหวี่ยงที่ 600? กรัมเป็นเวลา 10 นาที.
ใสถูกลบออกด้วยปิเปตและ 1 มิลลิลิตร
HEPES-CDM-1 (H-CDM-1) ถูกบันทึกอยู่ในแขวนลอย
เม็ดสเปิร์ม tubewas ปั่นแล้วที่ 300? กรัมเป็นเวลา 5
นาทีและเหนือตะกอนออกไปปล่อยให้เม็ดและ
ปริมาณเล็ก ๆ ของ 50-100 มิลลิลิตร concentrationwas สเปิร์ม
ที่กำหนดแล้วใช้ hemacytometer และสเปิร์มได้รับการ
ปรับลดถึง 10? 106 สเปิร์มต่อมิลลิลิตรเพื่อที่สุดท้าย
ความเข้มข้นในการวางการปฏิสนธิจะเป็น 2 หรือไม่? 106
สเปิร์มต่อมิลลิลิตร ลดลงปฏิสนธิเป็นองค์ประชุมกับ
30 มิลลิลิตรของตัวอสุจิ X-เรียงลำดับ 25-35 COC ใน 10 มิลลิลิตรและ 110 มิลลิลิตร
F-CDM ในจาน 60 มมภายใต้น้ำมันแร่

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

เมื่อมาถึง อุณหภูมิของตู้อบแบบพกพา
ยืนยันที่จะภายใน 37  C 39  C .
หลอดที่มีก๊กถูกวางไว้แล้วใน laboratoryincubator ( 38.5  C คาร์บอนไดออกไซด์ 5% ใน humidified อากาศ ) มีฝาปิด
หลวมจน 23 ชั่วโมงของอายุผ่านไป .
ครบก๊กถูกล้างใน f-cdm แล้วสุ่ม
มอบหมายสำหรับผสมเทียมกับ x-sorted หรือ nonsorted
สเปิร์มจากโฮลชไตน์วัวรวม , วัวสามตัวถูก
ใช้ . ทั้งสามตัวใช้ต่อ 1 ( สองจาก XY
Inc . , ฟอร์ตคอลลินส์ , CO , สหรัฐอเมริกา จากเลือกพ่อพันธุ์ธรรมดาเมือง
โอ้ , USA ) , และสองของวัวที่ใช้นม 1 ใช้
ผลิตภัณฑ์นม 2 ( หนึ่งในแต่ละจาก XY อิงค์และเลือกพ่อพันธุ์ ) น้ำเชื้อ
ถูกละลาย ไม่เกินสองหลอดครั้ง ใน 37  C
น้ำร้อน 30 วินาที การ x-sorted
spermwas ละลาย ,ชั้นบนของมิ percoll ไล่ระดับ ( 500 มล. 45 % percoll
กว่า 450 มล. 90 % percoll ใน 1.5-ml กรวยและท่อ ) ,
ระงับได้ระดับที่ 600  กรัมต่อ 10 นาที นำออกด้วย

hepes-cdm-1 เปต และ 1 ml ( h-cdm-1 ) คือการเพิ่ม resuspend ที่
อสุจิเม็ด การ tubewas แล้วระดับ 300  g 5
นาทีและนำออกไปทิ้งอาหารเม็ดและ
ปริมาณขนาดเล็กของ 50 ถึง 100 มิลลิลิตรอสุจิ concentrationwas
แล้วพิจารณาการใช้ hemacytometer และระยะเวลาประมาณ 10
 106 อสุจิต่อมิลลิลิตร ดังนั้นที่ความเข้มข้นสุดท้าย
ในการวางจะเป็น 2  106
อสุจิต่อมิลลิลิตร การปฏิสนธิลดลงตั้งขึ้นกับ
30 มล. x-sorted อสุจิ อายุก๊กใน 10 ml และ 110 ml
f-cdm ใน 60 มม. จานภายใต้น้ำมันแร่