Pigments determination
Pigments was determined as chlorophyll and carotenoid contents using the method of Holden (1965). Electrophoretic fractionation of soluble proteins
Polyacrylamide gel electrophoreses in the presence of sodium dodecyl sulphate (SDS-PAGE), was used for determining the molecular weight of protein fractions (Total soluble protein) according to method of Laemmli (1970). Standard molecular weight proteins marker was obtained from Sigma, this marker contained different proteins molecular weights, i.e. 250, 150, 100, 70, 50, 40, 30, 20, 15, 10 and 5 kDa.
Enzyme extracts
A ground sample (1.0 g) was homogenized in 3 mL of 50 mM phosphate buffer pH 7.0, 1% PVP, 1 mM ascorbate at 4ºC. After centrifugation at 15,000×g for 15 min, the supernatant was collected according to Vitória et al. (2001).
การกำหนดสี สีที่ถูกกำหนดเป็นคลอโรฟิลล์และ carotenoid เนื้อหาโดยใช้โฮลเดน (1965) ด้วยการแยกส่วนของโปรตีนที่ละลายน้ำได้Polyacrylamide เจ electrophoreses ในต่อหน้าของโซเดียมซัลเฟต dodecyl (SDS-หน้า) ถูกใช้ในการกำหนดน้ำหนักโมเลกุลของโปรตีนเศษ (รวมละลายโปรตีน) ตามวิธีของ Laemmli (1970) เครื่องหมายมาตรฐานน้ำหนักโมเลกุลโปรตีนที่ได้จากซิก เครื่องหมายนี้ประกอบด้วยโปรตีนต่างกันโมเลกุลน้ำหนัก เช่น 250, 150, 100, 70, 50, 40, 30, 20, 15, 10 และ 5 kDa สารสกัดจากเอนไซม์ ตัวอย่างดิน (1.0 กรัม) ถูก homogenized เป็นกลุ่มใน 3 mL ของ 50 มม.ฟอสเฟตบัฟเฟอร์ pH 7.0, 1% PVP, ascorbate 1 มม.ที่ 4ºC หลังจาก centrifugation ที่ 15, 000 ซื้อ g สำหรับ 15 นาที supernatant ถูกรวบรวมตาม Vitória et al. (2001)
การแปล กรุณารอสักครู่..
ความมุ่งมั่นสี
มุกถูกกำหนดเป็นเนื้อหาคลอโรฟิลและ carotenoid ใช้วิธีการโฮลเดน (1965) แยก electrophoretic ของโปรตีนที่ละลายน้ำ
อะคริเลต electrophoreses เจลในการปรากฏตัวของโซเดียมโดเดซิลซัลเฟต (SDS-PAGE) ถูกนำมาใช้สำหรับการกำหนดน้ำหนักโมเลกุลของเศษส่วนโปรตีน (โปรตีนที่ละลายน้ำได้ทั้งหมด) ตามวิธีการของ Laemmli (1970) มาตรฐานเครื่องหมายโมเลกุลโปรตีนน้ำหนักที่ได้รับจาก Sigma เครื่องหมายนี้จะมีโปรตีนที่แตกต่างกันน้ำหนักโมเลกุลคือ 250, 150, 100, 70, 50, 40, 30, 20, 15, 10 และ 5 กิโลดาลตัน
เอนไซม์สารสกัดจาก
ตัวอย่างพื้นดิน (1.0 กรัม ) ก็หดหายใน 3 มิลลิลิตร 50 มิลลิฟอสเฟตบัฟเฟอร์ pH 7.0, 1% PVP 1 ascorbate มิลลิที่4ºC หลังจากการหมุนเหวี่ยงที่ 15,000 × g นาน 15 นาที, สารละลายที่ถูกเก็บรวบรวมตามVitóriaและคณะ (2001)
การแปล กรุณารอสักครู่..
การกำหนดสีกำหนดสี
เป็นคลอโรฟิลล์และแคโรทีนอยด์ เนื้อหา โดยใช้วิธีโฮลเดน ( 1965 ) ส่วนการตรวจวัดปริมาณอะคริลาไมด์เจลโปรตีน
electrophoreses ในการแสดงตนของโซเดียมโดเดซิลซัลเฟต ( SDS-PAGE ) คือใช้หาน้ำหนักโมเลกุลของโปรตีน ( โปรตีนที่ละลายน้ำได้ ( ทั้งหมด ) ตามวิธีของ laemmli ( 1970 )โปรตีนโมเลกุลเครื่องหมายมาตรฐานที่ได้รับจาก ซิกม่า เครื่องหมายนี้ประกอบด้วยโปรตีนน้ำหนักโมเลกุลต่างกัน คือ 250 , 150 , 100 , 70 , 50 , 40 , 30 , 20 , 15 , 10 และ 5 กิโลดาลตัน
ของเอนไซม์สกัดพื้นตัวอย่าง ( 1.0 กรัม ) คือบด 3 มิลลิลิตร 50 mM ฟอสเฟตบัฟเฟอร์ pH 7.0 , 1% PVP 1 มม. จากที่ 4 º C หลังการปั่นเหวี่ยงที่ 15000 × G สำหรับ 15 นาทีและน่าน เก็บตาม vit óเรีย et al . ( 2001 )
การแปล กรุณารอสักครู่..